Total protein of both untransformed

Total protein of both untransformed and transgenic plants was obtained by centrifugation at 2000×g, and 5-fold concentration. Protein concentration was estimated by the procedure of Bradford (1976). Western blotting was carried out as described in Sambrook et al. (1995). Proteins were separated in sodium dodecyl sulphate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE, 15% acrylamide), and transferred to a Polyvinylidene fluoride (PVDF) membrane (Amersham) using a semi-dry transfer apparatus (Bio-Rad). The membranes were blocked for 1 h at room temperature with 150 mM NaCl, 10 mM Tris/HCl pH 8.0, 0.1% Tween 20 and 1% Triton X-100, and 5% (w/v) skimmed milk.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

โปรตีนรวมทั้ง untransformed และถั่วเหลืองพืชกล่าว โดย centrifugation 2000 × g และความเข้มข้น 5-fold ความเข้มข้นของโปรตีนได้ประมาณตามกระบวนการของแบรดฟอร์ด (1976) Blotting วิธีตะวันตกได้ดำเนินการตามที่อธิบายไว้ใน Sambrook et al. (1995) โปรตีนถูกแบ่งในโซเดียม dodecyl ซัลเฟตเจ polyacrylamide electrophoresis (SDS-หน้า อะคริลาไมด์ 15%), และโอนย้ายไป Polyvinylidene ฟลูออไรด์ (PVDF) เมมเบรน (Amersham) โดยใช้เครื่องมือโอนย้ายกึ่งแห้ง (ไบ-Rad) สารที่ถูกบล็อกสำหรับ h 1 ที่อุณหภูมิห้องกับ 150 มม. NaCl, 10 มม. ตรี/HCl pH 8.0, 0.1% Tween 20 และ 1% ไตรตั้น X 100 และนมขาดมันเนย 5% (w/v)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

โปรตีนรวมทั้งพืช untransformed และยีนที่ได้รับโดยการหมุนเหวี่ยงที่ 2000 ×กรัมและความเข้มข้น 5 เท่า ความเข้มข้นของโปรตีนเป็นที่คาดกันโดยขั้นตอนของ Bradford (1976) วิธี western blotting ได้ดำเนินการตามที่อธิบายไว้ใน Sambrook et al, (1995) โปรตีนที่ถูกแยกออกโซเดียมซัลเฟตใช้ polyacrylamide gel electrophoresis โดเดซิล (SDS-PAGE, ริลาไมด์ 15%) และโอนไปยังฟลูออไร Polyvinylidene (PVDF) เมมเบรน (Amersham) โดยใช้อุปกรณ์การถ่ายโอนกึ่งแห้ง (Bio-Rad) เยื่อถูกบล็อกเป็นเวลา 1 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้อง 150 มิลลิโซเดียมคลอไรด์, 10 mM Tris / HCl พีเอช 8.0, 0.1% Tween 20 และ 1% Triton X-100, และ 5% (w / v) นมพร่องมันเนย

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

โปรตีนรวมของพืชทั้งต้นได้ โดยการปั่นและ untransformed ที่× 2000 กรัม และผู้อื่นความเข้มข้น ความเข้มข้นของโปรตีนประมาณโดยขั้นตอนของแบรดฟอร์ด ( 1976 ) Western blotting พบว่าตามที่อธิบายไว้ใน sambrook et al . ( 1995 ) โปรตีนที่ถูกแยกจากกันในโซเดียมโดเดซิลซัลเฟตโพลีอะคริลาไมด์เจลอิเลคโตรโฟรีซีส ( SDS-PAGE , 15% อะคริลาไมด์ )และโอนไปยังีนฟลูออไรด์ ( PVDF ) เมมเบรน ( ชาม ) โดยใช้เครื่องมือกึ่งแห้งโอน ( ไบโอ ราด ) เยื่อที่ถูกบล็อกเป็นเวลา 1 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้องเติม 150 มม. , 10 มม. นอกจากนี้ / กรดไฮโดรคลอริก pH 8.0 , 0.1% Tween 20 และ 1% Triton X-100 และ 5% ( w / v ) นม .