SDS/PAGE and Immunoblot Analysis. P

SDS/PAGE and Immunoblot Analysis. Protein samples
from various steps in the purification process were separated
on an 8-25% gradient PhastGel (Pharmacia) and detected by
the silver staining. For immunoblot analysis, samples were
separated by SDS/PAGE on a 10% gel, transferred to nitrocellulose,
and reacted with antisera for N-terminal (aa 6-19)
or C-terminal (aa 382-400) peptides of human calreticulin.
Amino Acid Sequencing. Approximately 1 nmol of HPECpurified
protein was digested with sequencing grade trypsin
(Promega) for 12 hr. The tryptic peptides were purified on a

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

sds / หน้าและการวิเคราะห์ immunoblot โปรตีนตัวอย่าง
จากขั้นตอนต่างๆในกระบวนการทำให้บริสุทธิ์ถูกแยกออก
บน phastgel ลาด 8-25% (Pharmacia) และตรวจพบโดย
ย้อมสีเงิน สำหรับการวิเคราะห์ immunoblot ตัวอย่างที่ถูกแยกจากกันโดย
sds / หน้าเจล 10% โอนไป nitrocellulose,
และปฏิกิริยากับ antisera กับ n-ขั้ว (AA 6-19)
หรือค-ขั้ว (AA 382-400) เปปไทด์ของมนุษย์ calreticulin.
อะมิโนลำดับของกรด ประมาณ 1 นาโนโมลของ hpecpurified
โปรตีนที่ถูกย่อยด้วยลำดับชั้น trypsin
(Promega) เป็นเวลา 12 ชั่วโมง เปปไทด์เอียงและทำให้บริสุทธิ์ใน

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

SDS/หน้า และ Immunoblot วิเคราะห์ ตัวอย่างโปรตีน
ได้แบ่งกระบวนการจากขั้นตอนต่าง ๆ ในการทำให้บริสุทธิ์
ในการ PhastGel ไล่ระดับ 8-25% (Pharmacia) และตรวจพบโดย
ย้อมสีเงิน สำหรับการวิเคราะห์ immunoblot ตัวอย่างดี
คั่น ด้วย SDS/หน้า บนเจ 10% การโอนย้ายไป nitrocellulose,
และปฏิกิริยาที่เกิดขึ้นกับ antisera สำหรับ N-เทอร์มินัล (aa 6-19)
หรือเปปไทด์ C-เทอร์มินัล (aa 382-400) ของมนุษย์ calreticulin
ลำดับเบสกรดอะมิโน Nmol ประมาณ 1 ของ HPECpurified
โปรตีนถูกย่อย ด้วยลำดับเบส trypsin
(Promega) เกรด 12 ชม เปปไทด์ tryptic ที่บริสุทธิ์ในการ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เซิร์ฟเวอร์ SDS / immunoblot หน้าและการวิเคราะห์ โปรตีนตัวอย่าง
จากขั้นตอนต่างๆในกระบวนการทำน้ำบริสุทธิ์ที่แยก
ซึ่งจะช่วยในการไล่ระดับสี 8-25% phastgel (ในบริเวณใกล้เคียงใน)และตรวจพบโดยเกิดรอยเปื้อนควรสีเงิน
ซึ่งจะช่วยได้ สำหรับใช้ในการวิเคราะห์ immunoblot ตัวอย่างมี
แยกออกจากกันโดยหน้าเซิร์ฟเวอร์ SDS /บนเจล 10% ที่จะพาท่านไปส่งถึงยัง nitrocellulose
และปฏิกิริยากับ antisera สำหรับ n - อาคารโดยสาร( AA 6-19 6-19 6-19 6-19 )
หรือ c - อาคารโดยสาร( AA 382-400 ) peptides calreticulin ของมนุษย์.
กรดจัดลำดับกรดอะมิโน. ประมาณ 1 nmol ของโปรตีน hpecpurified
ซึ่งจะช่วยได้บ้างนิดหน่อยด้วย trypsin คุณภาพ การจัดลำดับ
( promega )เป็นเวลา 12 ชั่วโมง peptides tryptic บริสุทธิ์ที่มีอยู่บน