ig. 2. Characterization of the desi

ig. 2. Characterization of the designed BRET systems.
(A) Western blot analysis of protein expression for all
BRET fusions and donor-only proteins contained in
lysates of HT1080 cells stably expressing the reporter
proteins. (B) Spectral imaging of HT1080 cells expressing
either RLuc8.6 or BRET6 using 20-nm filers in the
460–720 nm range. EnduRen luciferase substrate was
used for this experiment. Error bars = SD. (C) BRET ratios
of the newly designed systems measured in cell
culture. HT1080 cells (6.4 × 104), stably expressing each
of the BRET fusion and donor-only proteins (RLuc8 or
RLuc8.6), were plated in black 96-well plates and imaged
on the addition of CLZ or CLZ-v. The graph shows
the average BRET ratios calculated as the A/D of the
BRET system minus the A/D of donor-only cells. (D) BRET
ratios calculated for the BRET6 system using various
number of HT1080 cells. Experiments were performed
as described in C. The dotted line represents the linear
fitting for the data points. Error bars = SEM.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ig 2. สมบัติของระบบเบรตมา(A) ตะวันตกทำลายของโปรตีนนิพจน์ทั้งหมดเบรต fusions และผู้บริจาคเฉพาะโปรตีนมีอยู่ในlysates ของเซลล์ HT1080 stably แสดงโปรแกรมรายงานการโปรตีน (ข) สเปกตรัมภาพแสดงเซลล์ HT1080RLuc8.6 หรือ BRET6 ใช้รเจ็ค 20 nm ในการช่วง 460-720 nm EnduRen luciferase พื้นผิวได้ใช้ในการทดลองนี้ แถบข้อผิดพลาด = SD. (C) เบรตอัตราออกแบบใหม่ระบบวัดในเซลล์วัฒนธรรม HT1080 เซลล์ (6.4 × 104), การแสดงแต่ละ stablyเบรตฟิวชั่นและผู้บริจาคเฉพาะโปรตีน (RLuc8 หรือRLuc8.6), ชุบในแผ่น 96 ดีดำ และ imagedในการเพิ่ม CLZ หรือ CLZ-v แสดงกราฟคำนวณอัตราเฉลี่ยเบรตเป็น A/D ของระบบเบรตลบ A/D ของเซลล์ของผู้บริจาคเท่านั้น (D) เบรตอัตราส่วนที่คำนวณได้สำหรับระบบ BRET6 ที่ใช้ต่าง ๆจำนวนเซลล์ HT1080 ดำเนินการทดลองในค เส้นแสดงถึงการเชิงเส้นเหมาะสมสำหรับจุดข้อมูล แถบข้อผิดพลาด = SEM.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ig 2. ลักษณะของการออกแบบระบบ BRET.
() การวิเคราะห์ดวงตะวันของการแสดงออกของโปรตีนทั้งหมด
fusions BRET และโปรตีนบริจาคเพียงอย่างเดียวที่มีอยู่ใน
เซลล์ lysates HT1080 เสถียรแสดงนักข่าว
โปรตีน (ข) การถ่ายภาพเงาของเซลล์ HT1080 แสดง
อย่างใดอย่างหนึ่งหรือ RLuc8.6 BRET6 ใช้ filers 20 นาโนเมตรใน
ช่วง 460-720 นาโนเมตร EnduRen พื้นผิว luciferase ถูก
ใช้ในการทดลองนี้ ข้อผิดพลาดบาร์ SD = (C) อัตราส่วน BRET
ระบบที่ออกแบบใหม่วัดในเซลล์
เพาะเลี้ยง เซลล์ HT1080 (6.4 × 104), เสถียรแสดงแต่ละ
ของฟิวชั่น BRET และผู้บริจาคเพียงโปรตีน (RLuc8 หรือ
RLuc8.6) ถูกชุบสีดำ 96 แผ่นดีและถ่ายภาพ
ในการเพิ่มของ CLZ หรือ CLZ-V กราฟแสดง
อัตราส่วน BRET เฉลี่ยคำนวณเป็น A / D ของ
ระบบ BRET ลบ / D ของผู้บริจาคเซลล์เท่านั้น (D) BRET
คำนวณอัตราส่วนสำหรับระบบ BRET6 ใช้ต่างๆ
จำนวนของเซลล์ HT1080 การทดลองได้ดำเนินการ
ตามที่อธิบายไว้ในซีเส้นประแสดงถึงการเชิงเส้น
ที่เหมาะสมสำหรับจุดข้อมูล ข้อผิดพลาดบาร์ = SEM

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

IG . 2 . คุณสมบัติของการออกแบบระบบเบรต .
( A ) Western blot การวิเคราะห์การแสดงออกของโปรตีนสำหรับ fusions Bret ทั้งหมด
และผู้บริจาคเพียงโปรตีนที่มีอยู่ในเซลล์ของ ht1080
lysates เสถียรแสดงนักข่าว
โปรตีน ( ข ) ภาพสเปกตรัมของ ht1080 เซลล์แสดง
ให้ rluc8.6 หรือ bret6 ใช้ 20 filers nm ใน
460 – 720 nm ช่วง enduren ตั้งต้นคือ
ลูซิเฟอเรสที่ใช้ในการทดลองนี้ ข้อผิดพลาดบาร์ = SD ( c ) เบร็ทอัตราส่วน
ของระบบวัดที่ออกแบบใหม่ในเซลล์เพาะเลี้ยง

ht1080 เซลล์ ( 4 × 104 ) , เสถียรแสดงแต่ละ
ของ Bret ฟิวชั่นและผู้บริจาคโปรตีนเท่านั้น ( rluc8 หรือ
rluc8.6 ) , ชุบดำ 96 แผ่น และภาพลักษณ์ดี
บนเพิ่ม clz หรือ clz-v. กราฟแสดง
เฉลี่ย Bret อัตราส่วนคำนวณเป็น A / D ของ
เบร็ทระบบลบ / D เซลล์เฉพาะผู้บริจาค ( D ) เบร็ท
อัตราส่วนที่คำนวณสำหรับระบบ bret6 โดยใช้หมายเลขต่าง ๆ ht1080
ของเซลล์ ทดลอง
ตามที่อธิบายไว้ใน C . เส้นประแสดงข้อต่อเชิงเส้น
สำหรับข้อมูลจุด ข้อผิดพลาดบาร์ = SEM