In this study, the motility of frozen boar sperm after thawing was 42.9-50.0% in each treatment, but the motility reduced dramatically during culture. We found out that frozen-thawed boar sperm, even with a low motility, contributed to the penetration rates of oocytes. Watson (1995) reported that the cryopreserved sperm somehow leaded to acceleration of capacitation-like process. Martinez et al. (1996) indicated that, under the in vitro conditions studied, boar sperm underwent capacitation and a true acrosome reaction during co-incubation with oocytes even when not washed or preincubated. Polyspermic penetration has been the persistent problem in IVM-IVF systems (Funahashi and Day, 1997). Polyspermic penetration of oocytes in vitro was not due to delayed or incomplete cortical granule exocytosis (Wang et al., 1998) but more likely to a delayed zona reaction and/or simultaneous sperm penetration (Wang et al., 1999).
Funahashi and Nagai (2001) reported that adenosine increased the normal penetration of oocytes by frozen- thawed boar sperm, and that the number of partially acrosome-reacted sperm at insemination might be one of the primary causes of polyspermy in porcine IVF system. In this study, we found out extremely low incidence of polyspermic penetration. These results were consistent with the above reports of Martinez et al. (1996), Wang et al. (1998, 1999) and Funahashi and Nagai (2001).
In general, semen pellet and straw were thawed and washed three times in mBO medium (Wang et al., 1995), TALP medium (Rath and Niemann, 1997), Dulbecco’s PBS
(Abeydeera and Day, 1997; Abeydeera et al., 1998), mTCM199 medium (Kikuchi et al., 1999; Yamauchi and Nagai, 1999) and BTS (Gandhi et al., 2001; Marchal et al., 2002). This study was the first to compare the in vitro fertilization and development of in vitro matured pig oocytes inseminated with the Duroc boar sperm by different sperm washing media after thawing of the 5 ml frozen straws. The sperm penetration, male pronuclear formation, and percentage of cleaved oocytes were higher in the BTS, mTLP-PVA and TBM washing treatments than the unwashed treatment. These results indicated that the sperm washing after thawing of 5 ml frozen-straw was an important factor for higher sperm penetration and male pronuclear formation. The removed egg yolk particles in the LEN diluent during washing may be one of factors to improve the sperm penetration and male pronuclear formation.
The percentage of cleaved oocytes was higher in the BTS, mTLP-PVA and mTBM washing treatments than the unwashed treatment. The percentage of blastocysts from cleaved oocytes was higher in the mTLP-PVA washing treatment than the unwashed, BTS and mTBM washing treatments. The above results demonstrated that the sperm washing media contributed to sperm penetration rate, monospermy, cleavage rate and blastocyst formation of oocytes.
In conclusion, we found out that the washing of frozen- thawed sperm with mTLP-PVA medium before in vitro fertilization of oocytes in mTBM medium was very important to improve the blasto
ในการศึกษานี้ การเคลื่อนไหวของสเปิร์มแช่แข็งหมูหลังจากละลาย 42.9 50.0% ในแต่ละทรีทเม้นต์ แต่การเคลื่อนไหวลดลงอย่างมากในระหว่างวัฒนธรรม เราพบว่า สเปิร์มแช่แข็งเตรียมหมู แม้จะ มีการเคลื่อนไหวที่ต่ำ ใหอัตราการเจาะเซลล์ไข่ วัตสัน (1995) รายงานว่า สเปิร์ม cryopreserved อย่างใดเพื่อเร่งความเร็วของกระบวนการ capacitation เหมือนตะกั่ว มาร์ติเน et al. (1996) ระบุว่า ภายใต้เงื่อนไขในหลอดทดลองศึกษา สเปิร์มหมูผ่าน capacitation และปฏิกิริยาจริงอะโครโซมในช่วงกกไข่ร่วมกับเซลล์ไข่แม้ว่าไม่ได้ล้าง หรือ preincubated Polyspermic เจาะแล้วปัญหาแบบต่อเนื่องในระบบการทำ IVM IVF (Funahashi และวัน 1997) เจาะ polyspermic ของเซลล์ไข่ในหลอดทดลองคือไม่เนื่อง จากการล่าช้า หรือไม่สมบูรณ์ในคอร์เทกซ์เม็ดถูกกระตุ้น (Wang et al. 1998) แต่แนวโน้มล่าช้า zona ปฏิกิริยาหรือเจาะพร้อมกันสเปิร์ม (Wang et al. 1999)Funahashi และ Nagai (2001) รายงานว่า adenosine เพิ่มขึ้นเจาะปกติของเซลล์ไข่สเปิร์มแช่แข็ง - เตรียมหมู และที่หมายเลขที่ของตัวอสุจิบางส่วนอะโครโซมปฏิกิริยาที่ผสมเทียมอาจเป็นหนึ่งสาเหตุหลักของ polyspermy ในระบบ IVF หมู ในการศึกษานี้ เราพบอุบัติการณ์ต่ำมากของการเจาะ polyspermic ผลลัพธ์เหล่านี้ได้สอดคล้องกับรายงานข้างต้นของมาร์ติเน et al. (1996), Wang et al. (1998, 1999) และ Funahashi และ Nagai (2001)ทั่วไป ฟางและเม็ดน้ำอสุจิถูกขับ และซักสามครั้งใน mBO ปานกลาง (Wang et al. 1995), ขนาดกลาง TALP (รัฐและ Niemann, 1997), PBS ของ Dulbecco(Abeydeera และวัน 1997 Abeydeera et al. 1998), กลาง mTCM199 (คิคุจิ et al. 1999 ยะและ Nagai, 1999) และบีทีเอส (คานธี et al. 2001 Marchal et al. 2002) ศึกษาครั้งนี้เป็นครั้งแรกเพื่อเปรียบเทียบการปฏิสนธิในหลอดทดลองและพัฒนาเซลล์ไข่หมูสกระท่อมในหลอดทดลองที่มีชู้กับอสุจ๊ากหมู Duroc โดยล้างสื่อหลังจากการละลายของ 5 มล.หลอดแช่แข็งอสุจิแตกต่างกัน สเปิร์มเจาะ ก่อ pronuclear ชาย และเปอร์เซ็นต์ของเส้นแหวกได้สูงขึ้นในบีทีเอส mTLP PVA และลูชนั่จากัดล้างรักษามากกว่าการรักษาผด ผลลัพธ์เหล่านี้ระบุว่า สเปิร์มล้างหลังจากละลาย 5 มล.แช่ฟางเป็นตัวแปรสำคัญสำหรับอสุจิเพิ่มขึ้นและก่อตัว pronuclear ชาย เอาไข่แดงอนุภาคในเลนจ่ายระหว่างซักผ้าอาจจะหนึ่งปัจจัยปรับปรุงสเปิร์มเจาะและก่อ pronuclear ชายเปอร์เซ็นต์ของเส้นที่ถูกแบ่งออกเป็นสูงในบีทีเอส mTLP PVA และ mTBM ล้างรักษามากกว่าการรักษาผด เปอร์เซ็นต์ของ blastocysts จากแหวกเส้นได้สูงในการรักษา mTLP-PVA ซักผ้ากว่าบีทีเอสและ mTBM ล้างรักษาผด ผลลัพธ์ข้างต้นแสดงให้เห็นว่า สเปิร์มล้างสื่อส่วนสเปิร์มเจาะราคา monospermy ความแตกแยกอัตราและอดีตก่อตัวของเซลล์ไข่ในบทสรุป เราพบว่าการล้างแช่แข็ง - เตรียมอสุจิด้วย mTLP PVA กลางก่อนที่จะปฏิสนธิในหลอดทดลองของเซลล์ไข่ใน mTBM สำคัญมากในการปรับปรุง blasto
การแปล กรุณารอสักครู่..
ในการศึกษานี้, การเคลื่อนที่ของตัวอสุจิแช่แข็งหมูป่าหลังจากละลายเป็น 42.9-50.0% ในการรักษาแต่ละครั้ง แต่การเคลื่อนที่ลดลงอย่างมากในช่วงวัฒนธรรม เราพบว่าแช่แข็งอสุจิละลายหมูป่าแม้จะมีการเคลื่อนไหวในระดับต่ำมีส่วนทำให้อัตราการรุกของเซลล์ไข่ วัตสัน (1995) รายงานว่าสเปิร์มแช่แข็งอย่างใดนำไปสู่การเร่งความเร็วของกระบวนการ capacitation เหมือน มาร์ติเน et al, (1996) ชี้ให้เห็นว่าภายใต้เงื่อนไขในหลอดทดลองที่ศึกษาสเปิร์มหมูป่าขนาน capacitation และปฏิกิริยา acrosome จริงในระหว่างการร่วมกับการพัฒนาของไข่ฟักตัวแม้ในขณะที่ไม่ได้ล้างหรือ preincubated เจาะ Polyspermic ได้รับปัญหาถาวรในระบบ IVM-IVF (Funahashi วันและ 1997) เจาะ Polyspermic ของเซลล์ไข่ในหลอดทดลองไม่ได้เนื่องจากความล่าช้าหรือไม่สมบูรณ์ exocytosis เยื่อหุ้มสมองทราย (วัง et al., 1998) แต่มีแนวโน้มที่จะเกิดปฏิกิริยา Zona ล่าช้าและ / หรือการเจาะสเปิร์มพร้อมกัน (วัง et al., 1999)
Funahashi และนากาอิ (2001) รายงานว่า adenosine เพิ่มการเจาะปกติของเซลล์ไข่โดย frozen- สเปิร์มละลายหมูป่าและว่าจำนวนของสเปิร์มบางส่วน acrosome ปฏิกิริยาที่ผสมเทียมอาจจะเป็นหนึ่งในสาเหตุหลักของ polyspermy ในระบบการผสมเทียมสุกร ในการศึกษานี้เราพบอุบัติการณ์ที่ต่ำมากของการเจาะ polyspermic ผลลัพธ์เหล่านี้มีความสอดคล้องกับรายงานข้างต้นของมาร์ติเน et al, (1996), วัง, et al (1998, 1999) และ Funahashi และนากาอิ (2001)
โดยทั่วไปน้ำอสุจิเม็ดและฟางข้าวมาละลายและล้างสามครั้งในกลาง MBO (Wang et al, 1995.) กลาง TALP (ไทยรัฐและ Niemann, 1997) Dulbecco พีบีเอส
(Abeydeera และวัน 1997;. Abeydeera et al, 1998 ) mTCM199 กลาง (Kikuchi et al, 1999;. Yamauchi และนากาอิ, 1999) และบีทีเอส (คานธี et al, 2001;.. Marchal, et al, 2002) การศึกษาครั้งนี้เป็นครั้งแรกที่จะเปรียบเทียบการปฏิสนธิในหลอดทดลองและพัฒนาในหลอดทดลองครบกำหนดเซลล์ไข่หมูผสมเทียมกับหมูป่าอสุจิ Duroc โดยสื่ออสุจิซักผ้าที่แตกต่างกันหลังจากที่ละลายใน 5 มล. หลอดแช่แข็ง การรุกของตัวอสุจิ, การก่อ pronuclear เพศชายและร้อยละของการพัฒนาของไข่ผ่าสูงขึ้นในบีทีเอสที่ mTLP-PVA และการรักษา TBM ซักผ้ากว่าการรักษาที่ไม่เคยอาบน้ำ ผลการศึกษานี้ชี้ให้เห็นว่าการซักผ้าอสุจิหลังจากละลาย 5 มล. แช่แข็งฟางเป็นปัจจัยสำคัญสำหรับการเจาะสเปิร์มที่สูงขึ้นและการก่อ pronuclear ชาย ออกอนุภาคไข่แดงในเจือจาง LEN ระหว่างการซักผ้าอาจจะเป็นหนึ่งในปัจจัยที่จะปรับปรุงการเจาะสเปิร์มและการก่อ pronuclear ชาย
ร้อยละของการพัฒนาของไข่ cleaved สูงในรถไฟฟ้า mTLP-PVA และ mTBM รักษาซักผ้ากว่าการรักษาที่ไม่เคยอาบน้ำ ร้อยละของตัวอ่อนจากการพัฒนาของไข่เกาะติดสูงในการรักษาซักผ้า mTLP-PVA กว่าไม่เคยอาบน้ำที่บีทีเอสและทรีทเม้น mTBM ซักผ้า ผลดังกล่าวข้างต้นแสดงให้เห็นว่าสเปิร์มสื่อซักผ้ามีส่วนทำให้อัตราอสุจิเจาะ monospermy อัตราความแตกแยกและการก่อตัวของเซลล์ไข่อ่อน
โดยสรุปเราพบว่าการซักผ้าของตัวอสุจิละลาย frozen- กับสื่อ mTLP-PVA ก่อนการปฏิสนธิในหลอดทดลองของเซลล์ไข่ในสื่อ mTBM เป็นสิ่งที่สำคัญมากในการปรับปรุง blasto
การแปล กรุณารอสักครู่..
ในการศึกษาการเคลื่อนที่ของอสุจิสุกรแช่แข็งหลังจากละลายเป็น 42.9-50.0 % ในการรักษาแต่ละครั้ง แต่การเคลื่อนที่ลดลงอย่างมากในวัฒนธรรม เราพบว่าอสุจิแช่แข็งที่ละลายแล้ว หมูป่า มีการเคลื่อนที่น้อย ส่วนอัตราการเจาะไข่ . วัตสัน ( 1995 ) รายงานว่า การตรวจสอบคุณภาพของสเปิร์มอย่างใด ) ความเร่งของมีเลศนัยเหมือนกระบวนการ มาร์ติเนซ et al . ( 1996 ) พบว่า ภายใต้เงื่อนไขในการใช้สเปิร์มที่ได้รับและหมูป่ามีเลศนัยจริงที่มีปฏิกิริยาระหว่างดินกับไข่ Co แม้ไม่ได้ล้างหรือ preincubated . เจาะ polyspermic มีปัญหาค้างในระบบ ivm-ivf ( funahashi และวัน , 2540 ) เจาะ polyspermic ไข่ในหลอดทดลองได้เนื่องจากการล่าช้าหรือไม่สมบูรณ์ เปลือกเม็ดไซโตซิส ( Wang et al . , 1998 ) แต่น่าจะช้า โซนา ปฏิกิริยาและ / หรือพร้อมกันอสุจิเจาะ ( Wang et al . , 1999 )funahashi และ นากาอิ ( 2001 ) ได้รายงานว่า อะดีโนซีนเพิ่มปกติเจาะไข่โดยแช่แข็ง - ละลายตัวอสุจิ หมูป่า และจำนวนของสเปิร์มผสมเทียมปฏิกิริยาที่มีบางส่วนที่อาจเป็นหนึ่งในสาเหตุหลักของ polyspermy ในระบบ IVF เลือดหมู . ในการศึกษาครั้งนี้เราพบอุบัติการณ์ต่ำมากของการเจาะ polyspermic . ผลลัพธ์เหล่านี้สอดคล้องกับรายงานข้างต้นของมาร์ติเนซ et al . ( 1996 ) , Wang et al . ( 1998 , 1999 ) และ funahashi และ นากาอิ ( 2001 )โดยทั่วไปเม็ดน้ำเชื้อและฟางถูกละลายและล้างสามครั้งใน 5 ขนาดกลาง ( Wang et al . , 1995 ) , talp ขนาดกลาง ( รัฐและนี , 1997 ) , ดัลเบโค่เป็นช่อง( abeydeera และวัน , 1997 ; abeydeera et al . , 1998 ) , mtcm199 ขนาดกลาง ( คิคุจิ et al . , 1999 ; ผู้พัฒนา และ นากา , 1999 ) และรถไฟฟ้า ( คานธี et al . , 2001 ; มาฉัล et al . , 2002 ) การศึกษาครั้งนี้เป็นครั้งแรกเพื่อเปรียบเทียบการผสมเทียมในหลอดแก้ว และพัฒนาการของผู้ใหญ่หมูไข่กับสเปิร์มผสมเทียมหมูดีที่สุดแตกต่างกันล้างสเปิร์มสื่อหลังการละลายของน้ำแข็งหลอด 5 ml . อสุจิการสอดใส่ การสร้างโปรนิวเคลียร์ของเพศชาย และร้อยละของไข่สูงกว่าในรถไฟฟ้า , mtlp PVA และ TBM ล้างการรักษามากกว่าการรักษาไม่เคยซัก ผลการทดลองที่ได้หลังจากการล้างสเปิร์มแช่แข็ง 5 ml หลอดเป็นปัจจัยสําคัญสูงกว่าอสุจิเจาะและการสร้างโปรนิวเคลียร์ชาย เอาไข่แดง อนุภาคในเลนเจือจางระหว่างการซัก อาจเป็นหนึ่งในปัจจัยที่จะเพิ่มอสุจิเจาะและการสร้างโปรนิวเคลียร์ชายเปอร์เซ็นต์ของไข่สูงกว่าในรถไฟฟ้า , mtlp PVA และล้างการรักษามากกว่าการรักษา mtbm ไม่เคยซัก เปอร์เซ็นต์ของการโตของไข่จากที่สูงใน mtlp PVA การรักษากว่า unwashed , รถไฟฟ้าบีทีเอส และ mtbm ซักวัน จากผลดังกล่าวข้างต้นแสดงให้เห็นว่าสื่อสนับสนุนการล้างสเปิร์มสเปิร์มอัตราการเจาะ monospermy อัตราการแบ่งตัวของตัวอ่อน , , และการก่อตัวของไข่ .สรุป เราพบว่า การล้างอสุจิแช่แข็ง - ละลายกับ PVA mtlp กลางก่อนผสมเทียมไข่ใน mtbm กลางสำคัญที่จะปรับปรุง blasto
การแปล กรุณารอสักครู่..