2. Experimental2.1. Plant materials

2. Experimental
2.1. Plant materials
Rio red grapefruits were harvested in November 2007, washed
in a commercial packing shed in Mission, Texas. The fruits were
peeled and blended for 3min in a Vita-Prep blender obtained from
Vita-Mix food services (Cleveland, OH, USA). The same blended
juice was used for all the analysis except in Section 2.3.4, where
the fruits were harvested from February 2010. The fruit juice was
stored at −80 ◦C until all the experiments were conducted.
2.2. Chemicals and instrumentation
Narirutin, naringin, neohesperidin, didymin and poncirin standards
were purchased from Sigma Aldrich (St. Louis, MO, USA).
For sample preparation, 5mL BD syringe, 0.45m acrodisc 25mm
syringe filters were purchased from Fisher Scientific (Fair Lawn, NJ,
USA). High performance liquid chromatographic grade methanol
(MeOH), ethanol (EtOH), acetonitrile (ACN), dimethyformamide
(DMF) solvents were obtained from Fisher Scientific (Fair Lawn,
NJ, USA) and ACS grade dimethyl sulfoxide (DMSO) was purchased
from Mallinckrodt chemicals (Phillipsburg, NJ, USA). HPLC grade
phosphoric acid was purchased from EMD chemicals (Gibbstown,
NJ, USA). The samples were centrifuged in the Beckman model
J2-21 high speed centrifuge (Beckman Instruments, Fullerton, CA,
USA).
2.3. Factors affecting sample preparation
2.3.1. Solvent and heat
Grapefruit juice was extracted with the following solvents,
MeOH, EtOH, ACN, DMSO and DMF. Extraction solvent (3 mL) was
added to 3mL of grapefruit juice and the mixture was vortexed for
5 s. The sample and solvent mixture was then heated in a hot water
bath set at different temperatures (20, 40, 50 or 60 ◦C) for 30 min
and later the samples were centrifuged at 4301×g for 10 min. The
extraction temperatures above the boiling points of the solvents
were avoided. Centrifuge supernatant was filtered with 0.45m
acrodisc syringe filter into an amber glass vial and analyzed in HPLC.
2.3.2. Solvent and centrifuge speed
Grapefruit juice (3 mL)was extracted with 3mL ofMeOH, EtOH,
ACN, DMSO and DMF. The sample mixture was vortexed for 5 s and
centrifuged for 605, 3293, 6720 and 11357×g at 0 ◦C for 10 min.
Two aliquots (from centrifuged sample) of 1mL each were taken
from top and bottom of the centrifuge tube and analyzed separately
to determine flavanone concentrations from grapefruit extracts.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2. ทดลอง
2.1 พืชวัสดุ
Rio grapefruits แดงถูกเก็บเกี่ยวในเดือน 2007 พฤศจิกายน ล้าง
ในบันทึกค้าหลั่งในภารกิจ เท็กซัส ผลไม้ถูก
ปอกเปลือก และสำหรับ 3 นาทีในการเบลนเดอร์วีตาเตรียมได้จากการผสมผสาน
วีตาผสมอาหารบริการ (คลีฟแลนด์ OH สหรัฐอเมริกา) เหมือนผสม
น้ำใช้สำหรับการวิเคราะห์ทั้งหมดยกเว้นในส่วน 2.3.4 พัฒนา ที่
ผลไม้ถูกเก็บเกี่ยวตั้งแต่ 2553 กุมภาพันธ์ น้ำผลไม้ถูก
เก็บไว้ที่ −80 ◦C จนกว่าได้ดำเนินการทดลองทั้งหมด
2.2 สารเคมีและเครื่องมือ
Narirutin, naringin, neohesperidin, didymin และ poncirin
ซื้อจาก Aldrich ซิก (St. Louis, MO สหรัฐอเมริกา) .
สำหรับการเตรียมตัวอย่าง 5mL BD เข็ม 0.45 m acrodisc 25 มม.
ซื้อกรองเข็มจาก Fisher วิทยาศาสตร์ (งานสนามหญ้า NJ,
สหรัฐอเมริกา) Methanol
(MeOH) เกรด chromatographic เหลวประสิทธิภาพสูง เอทานอล (EtOH), (ACN) acetonitrile, dimethyformamide
(DMF) หรือสารทำละลายที่ได้จากวิทยาศาสตร์ Fisher (งานสนามหญ้า,
NJ สหรัฐอเมริกา) และ ACS เกรด dimethyl sulfoxide (DMSO) ถูกซื้อ
Mallinckrodt สารเคมี (Phillipsburg, NJ สหรัฐอเมริกา) HPLC เกรด
ร้าน EMD สารเคมีกรดฟอสฟอริก (Gibbstown,
NJ สหรัฐอเมริกา) ตัวอย่างถูก centrifuged ในแบบ Beckman
เครื่องหมุนเหวี่ยงความเร็วสูง J2-21 (Beckman เครื่อง ฟู CA,
สหรัฐอเมริกา) .
2.3 ปัจจัยที่มีผลต่อการเตรียมตัวอย่าง
2.3.1 ตัวทำละลายและความร้อน
ส้มโอน้ำถูกสกัด ด้วยการต่อไปนี้หรือสารทำละลาย,
ทานอ EtOH, ACN, DMSO และกรม ถูกตัวทำละลายสกัด (3 mL)
เพิ่ม 3mL น้ำส้มโอและส่วนผสม vortexed สำหรับ
5 s ชิ้นงานตัวอย่าง และตัวทำละลายส่วนผสมถูกอุ่นในน้ำร้อนแล้ว
ตั้งอ่างอาบน้ำที่อุณหภูมิแตกต่างกัน (20, 40, 50 หรือ 60 ◦C) สำหรับ 30 นาที
และภายหลังมี centrifuged ตัวอย่างที่ 4301 × g สำหรับ 10 นาที ใน
สกัดอุณหภูมิจุดเดือดของตัวหรือสารทำละลาย
ได้หลีกเลี่ยง เครื่องหมุนเหวี่ยง supernatant ถูกกรอง ด้วย 0.45 m
acrodisc กรองเข็มเป็นคอนแทคสีเหลืองอำพันแก้วและวิเคราะห์ใน HPLC.
2.3.2 ตัวทำละลายและเครื่องหมุนเหวี่ยงความเร็ว
น้ำส้มโอ (3 mL) ถูกสกัด ด้วย ofMeOH 3mL, EtOH,
ACN, DMSO และกรม ส่วนผสมอย่างถูก vortexed สำหรับ 5 s และ
centrifuged สำหรับ 605, 3293, 6720 และ 11357 × g ที่ 0 ◦C สำหรับ 10 นาที
aliquots สอง (จากตัวอย่าง centrifuged) ของ 1 มล.ที่ถ่าย
จากด้านบนและด้านล่างของท่อเครื่องหมุนเหวี่ยง และวิเคราะห์แยกต่างหาก
กำหนด flavanone ความเข้มข้นจากสารสกัดจากส้มโอ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2 การทดลอง
2.1 วัสดุที่โรงงาน
โอเกรปสีแดงได้รับการเก็บเกี่ยวในเดือนพฤศจิกายน 2007 ล้าง
ในเชิงพาณิชย์โรงบรรจุใน Mission ผลไม้ที่
ปอกเปลือกและผสมสำหรับ 3 นาทีในเครื่องปั่น Vita-เตรียมได้จากการ
ให้บริการอาหาร Vita-Mix (คลีฟแลนด์, OH, USA) ผสมเดียวกัน
น้ำที่ใช้สำหรับการวิเคราะห์ทั้งหมดยกเว้นในส่วน 2.3.4 ที่
ผลไม้ถูกเก็บเกี่ยวตั้งแต่เดือนกุมภาพันธ์ปี 2010 น้ำผลไม้ถูก
เก็บไว้ที่ -80 ◦Cจนกว่าการทดลองทั้งหมดถูกดำเนินการ
2.2 สารเคมีและเครื่องมือ
Narirutin, naringin, neohesperidin didymin และ poncirin มาตรฐาน
ที่ซื้อมาจากซิกม่าดิช (เซนต์หลุยส์, MO, USA)
สำหรับการเตรียมตัวอย่าง 5mL BD เข็ม 0.45? เมตร acrodisc 25mm
กรองเข็มฉีดยาที่ซื้อมาจากฟิชเชอร์ทางวิทยาศาสตร์ (ยุติธรรม สนามหญ้า, นิวเจอร์ซีย์,
สหรัฐอเมริกา) ของเหลวสมรรถนะสูงเมทานอลโครมาเกรด
(เมธานอล), เอทานอล (เอทานอล), acetonitrile (ACN) dimethyformamide
(DMF) ตัวทำละลายที่ได้รับจากฟิชเชอร์ทางวิทยาศาสตร์ (สนามหญ้า,
NJ, USA) และ บริษัท เอซีเอ dimethyl sulfoxide เกรด (DMSO) ที่ซื้อมา
จาก Mallinckrodt สารเคมี (ลิฟส์, นิวเจอร์ซีย์, ประเทศสหรัฐอเมริกา) เกรด HPLC
กรดฟอสฟซื้อมาจากสารเคมีเมอร์ (Gibbstown,
NJ, USA) กลุ่มตัวอย่างที่ถูกปั่นในเบคค์แบบ
J2-21 ความเร็วสูง centrifuge (เบคค์เครื่องมือ Fullerton, CA,
USA)
2.3 ปัจจัยที่มีผลกระทบต่อการเตรียมสารตัวอย่าง
2.3.1 ตัวทำละลายและความร้อน
น้ำผลไม้ส้มโอได้รับการสกัดด้วยตัวทำละลายต่อไปนี้
เมธานอลเอทานอล, ACN, DMSO และกรมเชื้อเพลิงธรรมชาติ การสกัดด้วยตัวทำละลาย (3 มิลลิลิตร) ถูก
เพิ่มเข้าไปใน 3 mL ของน้ำผลไม้ส้มโอและมีส่วนผสมที่ได้รับการ vortex สำหรับ
5 ร้าน ตัวอย่างและตัวทำละลายผสมร้อนแล้วในน้ำร้อน
อาบน้ำตั้งไว้ที่อุณหภูมิที่แตกต่างกัน (20, 40, 50 หรือ 60 ◦C) นาน 30 นาที
และหลังจากนั้นกลุ่มตัวอย่างจะถูกหมุนเหวี่ยงที่ 4301 ×กรัมเป็นเวลา 10 นาที
สกัดอุณหภูมิสูงกว่าจุดเดือดของตัวทำละลาย
ที่ถูกหลีกเลี่ยง centrifuge ใสถูกกรองกับ 0.45? เมตร
acrodisc กรองเข็มฉีดยาลงไปในขวดแก้วสีเหลืองอำพันและการวิเคราะห์ใน HPLC
2.3.2 ตัวทำละลายและ centrifuge ความเร็ว
น้ำผลไม้ส้มโอ (3 มิลลิลิตร) ถูกสกัดด้วย 3 mL ofMeOH, เอทานอล,
ACN, DMSO และกรมเชื้อเพลิงธรรมชาติ ส่วนผสมของกลุ่มตัวอย่างที่ได้รับการ vortex 5 และ
หมุนเหวี่ยงสำหรับ 605, 3293, 6720 และ 11357 ×กรัมที่ 0 ◦C 10 นาที
สอง aliquots (จากตัวอย่างหมุนเหวี่ยง) ของ 1 mL แต่ละถูกนำ
มาจากด้านบนและด้านล่างของหลอด centrifuge และวิเคราะห์ แยกต่างหาก
เพื่อตรวจสอบความเข้มข้น flavanone จากสารสกัดจากส้มโอ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2 . ทดลอง
2.1 . วัสดุพืชสีแดงเกรริโอ
เก็บในเดือนพฤศจิกายน 2007 , ล้าง
ในการบรรจุเชิงพาณิชย์หลั่งในภารกิจ เท็กซัส ผลมาปอกเปลือกและปั่น
สำหรับ 3min ใน Vita เตรียมเครื่องปั่นที่ได้รับจาก
บริการอาหาร Vita Mix ( Cleveland , OH , USA ) น้ำผลไม้ปั่น
เดียวกันถูกใช้สำหรับการวิเคราะห์ทั้งหมดยกเว้นในส่วน 2.3.4 ที่
ผลไม้ที่ถูกเก็บเกี่ยวจากกุมภาพันธ์ 2010 ผลไม้น้ำผลไม้คือ
อุณหภูมิ− 80 ◦ C จนกระทั่งการทดลองทั้งหมดจำนวน
2.2 . เคมีภัณฑ์และเครื่องมือวัด
narirutin พันธุ์ neohesperidin didymin , , , และมาตรฐาน poncirin
ซื้อมาจากซิกม่า Aldrich ( St . Louis , MO , USA ) .
สำหรับการเตรียมสารตัวอย่าง 5 BD , เข็ม , 0.45  acrodisc 25mm
Mเข็มตัวกรองที่ถูกซื้อจากฟิชเชอร์ทางวิทยาศาสตร์ ( ยุติธรรมสนามหญ้า , NJ ,
สหรัฐอเมริกา ) โครมาโตกราฟีของเหลวสมรรถนะสูงเกรดเมทานอล ( เมทิลแอลกอฮอล์ )
, เอทานอล ( แอลกอฮอล์ ) , ไน ( ACN ) dimethyformamide
( DMF ) สารละลายที่ได้จากฟิชเชอร์ทางวิทยาศาสตร์ ( ยุติธรรมสนามหญ้า ,
NJ , USA ) และมาตรฐานเกรดเต๊ะ ( DMSO ) ซื้อ
จากสารเคมี ( phillipsburg Ltd , NJ , USA )
เกรด HPLCกรดฟอสฟอริค ซื้อมาจาก EMD สารเคมี ( gibbstown
, NJ , USA ) จำนวนระดับในแบคแมนแบบ
j2-21 เหวี่ยงความเร็วสูง ( Beckman เครื่องมือ , Fullerton , CA , USA

) 2.3 ปัจจัยที่มีผลต่อการเตรียมตัว
2.3.1 . ตัวทำละลายและความร้อน
น้ำองุ่นสกัดต่อไปนี้ด้วยตัวทำละลาย ปริมาณแอลกอฮอล์ ACN
, , , และ DMSO ย . การสกัดด้วยตัวทำละลาย ( 3 ml . ) คือ
เพิ่มม. ของเกรปฟรุต และส่วนผสม vortexed สำหรับ
5 S . ตัวอย่างและตัวทำละลายผสมที่ถูกอุ่นในอ่างน้ำ
จาตั้งที่อุณหภูมิแตกต่างกัน ( 20 , 40 , 50 และ 60 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 30 นาที
◦ ) และต่อมาจำนวนไฟฟ้าที่ 4301 ×กรัมต่อ 10 นาที
การสกัด อุณหภูมิสูงกว่าจุดเดือดของตัวทำละลาย
ถูกหลีกเลี่ยง เครื่องกรองนำมันกับ 0.45  M
acrodisc เข็มกรองใส่ขวดแก้วสีเหลืองอำพัน และวิเคราะห์ HPLC .
2.3.2 . ตัวทำละลายและเครื่องปั่นเหวี่ยงความเร็ว
เกรปฟรุต ( 3 ml . ) ถูกสกัดด้วยแอลกอฮอล์ ofmeoh , ม. , ต. DMSO และ DMF
, . ตัวอย่างส่วนผสม vortexed 5 s
ไฟฟ้าสำหรับ 605 ตะวันออก 6720 , และ G 11357 × 0 ◦ C 10 นาที
2 เฉยๆ ( จากระดับตัวอย่าง ) ของ 1ml แต่ละถ่าย
จากด้านบนและด้านล่างของหลอด centrifuge และวิเคราะห์แยก
กำหนดคือความเข้มข้นจากส้มโอสารสกัด