Further, we examined the effect of

Further, we examined the effect of scPPX1 on the single channel activity of TRPM8 in planar lipid bilayers (Fig. 8, 9). Channels were obtained in presence of 1% diC16 PtdIns(4,5)P2 and 500 μM menthol with subsequent addition of 2 μg/ml scPPX1. No change in channel activity was detected when scPPX1 was added to the external side of TRPM8. Conversely, addition of scPPX1 to the internal side resulted in the inhibition of TRPM8 currents by affecting both the open probability and conductance of the channel. We first analyzed the changes in the open probability of the channel upon the cleavage of polyP. We found that TRPM8 channel openings in inward direction were eliminated very rapidly (within 1–2 min) after the addition of scPPX1. In contrast, the open probabilityof the channel in outward direction exhibited much slower changes (up to 30min). Figure 8A demonstrates current traces recordings obtained at −150 +150 mV voltage ramps before and after the treatment with scPPX1 in a time courseat the beginning of 3rd, 10th, 18th, 28th and 33rd minutes. The statistics of
the changes in open probability was obtained at different voltages in gap-free recordings for TRPM8 alone or after the treatment with scPPX1 for the following intervals of time: 5–7 min, 9–11 min, 14–16 min, 20–23 min, and 28–32 min
(Fig. 8B). Overall 16 experiments were conducted and open probabilities valuesobtained for each voltage were derived from the analysis of at least 550–2636events.

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เพิ่มเติม เราได้ตรวจสอบผลของ scppx1 บนช่องเดี่ยว กิจกรรมของ trpm8 ในระนาบไขมันสองชั้น ( ภาพที่ 8 , 9 ) ช่องทางที่ได้รับในการแสดงตนของ 1% ptdins dic16 ( 4 , 5 ) และ 500 μ P2 M เมนทอลตามมาเพิ่ม 2 μ g / ml scppx1 . ไม่มีการเปลี่ยนแปลงในกิจกรรมช่องที่ตรวจพบเมื่อ scppx1 ถูกเพิ่มไปยังด้านนอกของ trpm8 . ในทางกลับกันนอกจากนี้ scppx1 ข้างๆภายในมีผลในการยับยั้ง trpm8 กระแส โดยส่งผลกระทบต่อทั้งระบบเปิดและความน่าจะเป็นของช่อง เราแรกวิเคราะห์การเปลี่ยนแปลงในโอกาสเปิดช่องทางบนแนวแตกเรียบของหินปะการัง . เราพบว่า trpm8 ช่องเปิดในทิศทางที่ด้านในถูกตัดออกอย่างรวดเร็ว ( ภายใน 1 – 2 นาที ) หลังจากเติม scppx1 .ในทางตรงกันข้าม การเปิด probabilityof ช่องทางในทิศทางขาออกมีการเปลี่ยนแปลงช้ามาก ( ไม่เกิน 30 นาที ) รูปที่แสดงให้เห็นร่องรอยการบันทึกที่ได้รับกระแส 8A − 150 150 MV แรงดันไฟฟ้าทางลาดก่อนและหลังการรักษาด้วย scppx1 ในเวลา courseat เริ่มต้นที่ 3 , 10 , 18 และ 28 - 33 นาที สถิติของ
การเปลี่ยนแปลงในโอกาสเปิดได้แรงดันไฟฟ้าที่แตกต่างกันในช่องว่างบันทึกฟรีสำหรับ trpm8 คนเดียวหรือหลังจากการรักษาด้วย scppx1 สำหรับตามช่วงของเวลา : 5 - 7 นาที 9 – 11 นาที 14 – 16 นาที 20 – 23 นาที , และ 28 – 32 นาที
( รูปที่ใส่ )รวม 16 การทดลอง และเปิดสถานะ valuesobtained แต่ละแรงดันได้มาจากการวิเคราะห์อย่างน้อย 550 – 2636events

.