Schematics of the proposed multi-al

Schematics of the proposed multi-allele genotyping platform are
shown in Fig. 1. Non purified PCR amplified (1087 bp) fragment of
either HBA1 and HBA2 gene is subjected to few (10) cycles of multiplex
PEXT reaction in the presence of allele-specific primers (two primers
per mutation, one for the wild type and the second for the mutant
allele) and biotin-modified nucleotide that is incorporated in the
extended product. Allele-specific primers consist of two parts, the 3′
end that is complementary to the particular HBA1 or HBA2 allele and
the 5′ end containing a unique segment that enables subsequent capture
of the primer on the test zone of the dipstick through hybridization
with complementary immobilized capture oligonucleotides. Extension
by DNA polymerase, lacking 5′ → 3′ exonuclease activity occurs only
if primer is perfectly complementary to the target sequence. Finally,
the extension products are detected within 15 min by means of dry
reagent dipstick assay. The PEXT reaction mixture is applied to the dipstick
and the latter is immersed in the developing solution. As the solution
flows along the strip, the products are captured by immobilized
complementary oligonucleotides at the appropriate test spots and
detected by antibiotin-functionilized gold nanoparticles. Extended
products carrying biotin are bound to the nanoparticles through
biotin-antibiotin interactions and the hybrids produce characteristic
red spots denoting the presence of the corresponding allele in the sample.
The excess of gold nanoparticles is captured at the control zone of
the dipstick by immobilized biotinylated oligonucleotides forming
another red spot that indicates the proper performance of the system

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

มี schematics ของแพลตฟอร์ม genotyping allele หลายนำเสนอแสดงใน Fig. 1 ส่วนเอาต์ (1087 bp) PCR ไม่บริสุทธิ์ของยีนทั้ง HBA1 และ HBA2 ขึ้นอยู่สองสามรอบ (10) ของล็กปฏิกิริยา PEXT ในต่อหน้าของ allele เฉพาะไพรเมอร์ (สองไพรเมอร์ต่อการกลายพันธุ์ ป่าชนิดหนึ่งและที่สองสำหรับการ mutantallele) และไบโอตินปรับเปลี่ยนนิวคลีโอไทด์ที่เป็นส่วนประกอบในการผลิตภัณฑ์เพิ่มเติม ไพรเมอร์ allele เฉพาะประกอบด้วยสองส่วน 3′สิ้นสุดที่เสริมให้เฉพาะ HBA1 หรือ HBA2 allele และสิ้นสุด 5′ ประกอบด้วยเซ็กเมนต์เฉพาะซึ่งช่วยให้จับภาพต่อมาพื้นโซนทดสอบของ dipstick ผ่าน hybridizationพร้อมหาจับ oligonucleotides ส่วนขยายโดยดีเอ็นเอพอลิเมอเรส ขาด 5′ → 3′ exonuclease กิจกรรมเกิดขึ้นเท่านั้นถ้ารองพื้นเสริมสมบูรณ์ลำดับเป้าหมายได้ สุดท้ายตรวจพบผลิตภัณฑ์นามสกุลภายใน 15 นาที โดยแห้งรีเอเจนต์ dipstick วิเคราะห์ ใช้ส่วนผสมปฏิกิริยา PEXT dipstickและหลังเป็นไปในการแก้ปัญหาพัฒนา เป็นการแก้ปัญหาไหลตามแถบ ผลิตภัณฑ์ถูกจับโดยหาoligonucleotides เสริมที่จุดทดสอบที่เหมาะสม และตรวจพบ โดย antibiotin functionilized ทองเก็บกัก ขยายผลิตภัณฑ์ดำเนินการไบโอตินกับเก็บกักผ่านไบโอติน antibiotin โต้ตอบและลูกผสมผลิตลักษณะจุดสีแดงที่กำหนดเรียกค่าของ allele ที่สอดคล้องกันในตัวอย่างเกินเก็บกักทองถูกจับในเขตควบคุมของdipstick โดยเอนไซม์ biotinylated oligonucleotides ขึ้นรูปจุดแดงอื่นที่บ่งชี้ประสิทธิภาพที่เหมาะสมของระบบ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

แผนงานที่เสนอหลายแพลตฟอร์ม genotyping
อัลลีลจะแสดงในรูป 1. ไม่บริสุทธิ์ PCR ขยาย (1087 bp)
ส่วนของทั้งHBA1 และยีน HBA2 อยู่ภายใต้การไม่กี่ (10)
รอบหลายปฏิกิริยาPEXT ในการปรากฏตัวของไพรเมอร์อัลลีลเฉพาะ
(สองไพรเมอร์ต่อการกลายพันธุ์หนึ่งสำหรับชนิดป่าและที่สองสำหรับการกลายพันธุ์อัลลีล) และเบื่อหน่ายไบโอตินที่ปรับเปลี่ยนที่รวมอยู่ในผลิตภัณฑ์ขยาย ไพรเมอร์อัลลีลเฉพาะประกอบด้วยสองส่วน 3 'ท้ายที่เสริมให้กับHBA1 โดยเฉพาะอย่างยิ่งหรืออัลลีล HBA2 และ5' ปลายมีส่วนที่ไม่ซ้ำกันที่ช่วยให้การจับภาพที่ตามมาของไพรเมอร์ในเขตการทดสอบของdipstick ผ่านการผสมข้ามพันธุ์กับเสริม ตรึง oligonucleotides จับ ส่วนต่อขยายจากดีเอ็นเอโพลิเมอร์ขาด 5 '→ 3' กิจกรรม exonuclease เกิดขึ้นเฉพาะถ้าไพรเมอร์เป็นอย่างดีประกอบกับเป้าหมายลำดับ ในที่สุดผลิตภัณฑ์ขยายมีการตรวจพบภายใน 15 นาทีโดยวิธีการของแห้งสารทดสอบdipstick ผสมปฏิกิริยา PEXT ถูกนำไปใช้ dipstick และหลังจะแช่อยู่ในการแก้ปัญหาการพัฒนา ขณะที่การแก้ปัญหาที่ไหลไปตามแถบผลิตภัณฑ์ที่มีการจับตรึงoligonucleotides เสริมที่จุดทดสอบที่เหมาะสมและตรวจพบโดยantibiotin-functionilized อนุภาคนาโนทองคำ ขยายผลิตภัณฑ์แบกไบโอตินจะผูกพันกับอนุภาคนาโนที่ผ่านการปฏิสัมพันธ์ไบโอติน-antibiotin และลูกผสมผลิตลักษณะจุดสีแดงแสดงถึงการปรากฏตัวของอัลลีลที่สอดคล้องกันในตัวอย่าง. ส่วนที่เกินจากอนุภาคนาโนทองถูกจับที่เขตควบคุมของdipstick โดยตรึง oligonucleotides biotinylated การขึ้นรูปอีกจุดสีแดงที่แสดงให้เห็นถึงประสิทธิภาพการทำงานที่เหมาะสมของระบบ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

แผนผังของการเสนอหลายแพลตฟอร์มในการอ่าน
แสดงในรูปที่ 1 . ซึ่งไม่บริสุทธิ์ขยาย ( 1087 BP ) ส่วนของ
ให้ hba1 และยีน hba2 คือต้องไม่กี่ 10 รอบของปฏิกิริยา pext multiplex
ต่อหน้าเฉพาะอัลลีลไพรเมอร์รองพื้น ( 2
ต่อการกลายพันธุ์ หนึ่งในประเภทป่าและสองสำหรับกลายพันธุ์
อัลลีล ) และไบโอตินแก้ไขนิวคลีโอไทด์ที่เป็นส่วนประกอบใน
ขยายผลิตภัณฑ์ โดยเฉพาะในกลุ่มประกอบด้วยสองส่วน , 3 ดูแล
จบที่ประกอบโดยเฉพาะ hba1 หรือ hba2 อัลลีลและ
5 นั้นสิ้นสุดที่มีเฉพาะส่วนที่ให้ตามมาจับ
ของไพรเมอร์ในบริเวณทดสอบของคนมีสีผ่าน hybridization
ประกอบกับถูกตรึงยึดโอลิโกนิวคลีโอไทด์ . นามสกุล
โดยดีเอ็นเอพอลิเมอเรส ขาด 5 ’’→ keyboard - key - name 3 เอกโซนิวคลีเอสกิจกรรมเกิดขึ้นเฉพาะ
ถ้ารองพื้นเป็นอย่างดี ประกอบกับการกำหนดเป้าหมาย ในที่สุด
ผลิตภัณฑ์ส่วนขยายที่ตรวจพบภายใน 15 นาที โดยการใช้บริการ
บ้าอำนาจการทดสอบ การ pext ปฏิกิริยาผสมใช้กับคนมีสี
และหลังแช่ในการพัฒนาโซลูชั่น เป็นโซลูชั่น
ไหลตามแถบ ผลิตภัณฑ์จะถูกตรึง
โอลิโกนิวคลีโอไทด์ประกอบที่จุดทดสอบที่เหมาะสม และตรวจพบโดย antibiotin
functionilized อนุภาคนาโนของทอง . ขยาย
ผลิตภัณฑ์แบกไบโอตินผูกไว้กับอนุภาคผ่าน
ไบโอติน antibiotin ปฏิสัมพันธ์และลูกผสมที่ผลิตลักษณะ
จุดสีแดงแสดงถึงสถานะของอัลลีลที่สอดคล้องกันในตัวอย่าง
ส่วนเกินของอนุภาคทองระดับนาโนเมตรถูกจับที่คุมโซนของ

ใช้ตรึงรูปไลชนิดโอลิโกนิวคลีโอไทด์อีกจุดแดงที่บ่งบอกถึงการทำงานที่เหมาะสมของระบบ