The assay employed was based on spe

The assay employed was based on spectrophotometric methods reported in the literature [12] with some modifications
for use in a microplate reader. The assay was performed in 50 mM Tricine buffer (pH 7.5 with 400 mM NaCl and 10 mM CaCl2). Collagenase from Clostridium histolyticum (ChC – EC.3.4.23.3) was dissolved in buffer for use at an initial concentration of 0.8 units/mL according to the supplier's activity data. The synthetic substrate N-[3-(2-furyl) acryloyl]-Leu-Gly-Pro-Ala (FALGPA) was dissolved in Tricine buffer to 2 mM. Plant extracts were incubated with the enzyme in buffer for 15 minutes before adding substrate to start the reaction. The final reaction mixture (150 μL total volume) contained Tricine buffer, 0.8 mM FALGPA, 0.1 units ChC and 25 μg test extracts. Negative controls were performed with water.
Absorbance at 335 nm was measured immediately after
adding substrate and then continuously for 20 minutes
using a Cary 50 Microplate Reader in Nunc 96 well microtitre
plates. EGCG, 250 μM (0.114 mg/mL) was used as a
positive control.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ทดสอบการจ้างงานก็ขึ้นอยู่กับวิธีการสเปกรายงานในวรรณคดี [12] มีการปรับเปลี่ยนบางอย่าง
เพื่อใช้ในการอ่าน microplate การทดสอบที่ได้รับการดำเนินการใน 50 มิลลิ Tricine บัฟเฟอร์ (pH 7.5 400 มิลลิโซเดียมคลอไรด์และ 10 มิลลิ CaCl2) คอลลาจากเชื้อ Clostridium histolyticum (CHC - EC.3.4.23.3) ก็เลือนหายไปในบัฟเฟอร์สำหรับการใช้งานที่ความเข้มข้นเริ่มต้น 0.8 ยูนิต / มิลลิลิตรตามข้อมูลกิจกรรมของซัพพลายเออร์ พื้นผิวสังเคราะห์ N- [3 (2-furyl) acryloyl] -Leu-Gly-Pro-Ala (FALGPA) ก็เลือนหายไปในบัฟเฟอร์ Tricine 2 มิลลิ สารสกัดจากพืชถูกบ่มกับเอนไซม์ในบัฟเฟอร์เป็นเวลา 15 นาทีก่อนที่จะเพิ่มพื้นผิวเพื่อเริ่มต้นปฏิกิริยา ผสมปฏิกิริยาสุดท้าย (150 ไมโครลิตรปริมาณรวม) ที่มีบัฟเฟอร์ Tricine 0.8 มิลลิ FALGPA 0.1 หน่วย CHC และ 25 ไมโครกรัมสารสกัดจากการทดสอบ การควบคุมเชิงลบได้ดำเนินการด้วยน้ำ.
การดูดกลืนแสงที่ 335 นาโนเมตรวัดทันทีหลังจากที่
การเพิ่มพื้นผิวแล้วอย่างต่อเนื่องเป็นเวลา 20 นาที
โดยใช้แครี 50 อ่านไมโครใน Nunc 96 microtitre ดี
แผ่น EGCG 250 ไมครอน (0.114 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร) ใช้เป็นที่
ควบคุมบวก

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

( ใช้ตามวิธี ) รายงานในวรรณคดี [ 12 ] กับการปรับเปลี่ยนบางอย่างเพื่อใช้ในพื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทย
อ่าน . ( แสดงในบัฟเฟอร์ไตรซีน 50 มม. ( pH 7.5 และ 10 มม. ขนาด 400 มม. ผลิต ) คอลลาเจนจาก Clostridium histolyticum ( CHC ) EC 3.4.23.3 ) ละลายในบัฟเฟอร์สำหรับใช้ที่ความเข้มข้นเริ่มต้นของ 08 หน่วย / มล. ตามของซัพพลายเออร์ กิจกรรมข้อมูล สารสังเคราะห์ - [ 3 - ( 2-furyl ) อะคริโลอิล ) - ลิว GLY โปรเอ๋ ( falgpa ) ละลายในไตรซีนบัฟเฟอร์ 2 มิลลิเมตร สารสกัดจากพืชถูกบ่มด้วยเอนไซม์ในบัฟเฟอร์สำหรับ 15 นาทีก่อนที่จะเพิ่มพื้นผิวเพื่อเริ่มต้นปฏิกิริยา ผสมปฏิกิริยาสุดท้าย ( ปริมาณ 150 μ L ทั้งหมด ) มีไตรซีนบัฟเฟอร์ , 0.8 มม. falgpa , 0 .1 หน่วย CHC และ 25 μกรัมทดสอบสารสกัด การควบคุมทางลบได้ด้วยน้ำ
การดูดกลืนแสงที่ 335 nm ได้ทันทีหลังจาก
เพิ่มพื้นผิวและจากนั้นอย่างต่อเนื่องเป็นเวลา 20 นาที
ใช้แครี่ 50 พื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทยในขณะนี้ด้วย microtitre
อ่าน 96 แผ่น EGCG , 250 μ m ( 0.114 mg / ml ) ถูกใช้เป็น
ควบคุมบวก