To assess the antiinflammatory activity of AGE-1, we
directly measured the AGE-1-mediated inhibition of
NO in LPS-induced macrophage RAW 264.7 cells using
the quantifiable nitrite method. We investigated various
concentrations of AGE-1 (0, 5, 10, 15, and 20 ìg/mL).
As shown in Fig. 2A, AGE-1 at concentrations between
5 and 20 ìg/mL significantly inhibited NO production in
LPS-stimulated RAW 264.7 macrophages. 4-(2-
aminoethyl)benzenesulfonyl fluoride hydrochloride
(AEBSF) 0.3mM was used as positive control for inhibition
of NO production. AEBSF is a stable, water soluble,
and relatively nontoxic compound, possessing
Nicotinamide adenine dinucleotide phosphate
(NADPH) oxidase suppressor activity; therefore, it is
frequently used in the design of antiinflammatory drugs
(Cho et al., 2011). AGE-1 at 5, 10, 15, and 20 ìg/mL
inhibited NO production by 14%, 18%, 24%, and
40%, respectively, compared with NO production in
LPS-treated control cells (IC50= 29.6 ìg/mL). AGE-1
exhibited antiinflammatory activities and was nontoxic
against RAW 264.7 cells at concentrations up to
20 ìg/mL. We also investigated the inhibition of PGE2
production. The concentration of PGE2 in the culture
supernatant was measured using an ELISA kit.
Indomethacin 10 ìM was used as positive control for
inhibition of PGE2 production. Although indomethacin
is a known COX-2 inhibitor, it also inhibits the expression
of PGE2 (Ikarashi et al., 2011). AGE-1 significantly
attenuated the LPS-induced production of PGE2 in a
dose-dependent manner (IC50 = 1.41 ìg/mL) (Fig. 2A).
Interestingly, despite its structural similarities to
AGE-1, AGE-2 did not inhibit NO or PGE2
การประเมินกิจกรรมต้านการอักเสบของอายุ-1 เราการยับยั้งอายุ 1 สื่อของวัดโดยตรงไม่มีในเซลล์ macrophage LPS เกิด RAW 264.7 โดยใช้วิธีการเชิงปริมาณไนไตรท์ เราตรวจสอบต่าง ๆความเข้มข้นของอายุ-1 (0, 5, 10, 15 และ 20 ìg/mL)ดังแสดงในรูปที่ 2A, 1 อายุที่ความเข้มข้นระหว่าง5 และ 20 ìg/mL ยับยั้งผลิตไม่มากLPS ถูกกระตุ้นแมโครฟาจ RAW 264.7 4- (2-ไฮโดรคลอไรด์ฟลูออไรด์ benzenesulfonyl aminoethyl)(AEBSF) 0.3 มม.ใช้เป็นเชิงบวกควบคุมยับยั้งการการผลิตไม่ AEBSF คือ การมีเสถียรภาพ ละลายน้ำได้และ สารประกอบที่ค่อนข้างปลอดสารพิษ เดอลักซ์โอ่โถงพื้นที่Nicotinamide dinucleotide คือฟอสเฟตกิจกรรมตัวเกิน oxidase (NADPH) จึง มันเป็นมักใช้ในการออกแบบของยาต้านการอักเสบ(Cho et al. 2011) อายุ-1 ที่ 5, 10, 15 และ 20 ìg/mLยับยั้งไม่ผลิต โดย 14%, 18%, 24% และ40% ตามลำดับ เมื่อเทียบกับไม่มีการผลิตในควบคุมรักษา LPS เซลล์ (IC50 = 29.6 ìg/mL) อายุ-1จัดแสดงกิจกรรมต้านการอักเสบ และเป็นพิษต่อต้านเซลล์ RAW 264.7 ที่ความเข้มข้นสูงสุด20 ìg/mL นอกจากนี้เรายังตรวจสอบการยับยั้ง PGE2การผลิต ความเข้มข้นของ PGE2 ในวัฒนธรรมsupernatant ถูกวัดโดยใช้ชุดการ ELISAใช้ indomethacin 10 ìM เป็นตัวควบคุมเชิงบวกสำหรับการยับยั้งการผลิต PGE2 แม้ว่า indomethacinเป็นสารยับยั้ง COX-2 รู้จักกัน มันยังยับยั้งการแสดงออกของ PGE2 (Ikarashi et al. 2011) อายุ-1 อย่างมีนัยสำคัญattenuated LPS เกิดผลิต PGE2 ในการลักษณะขึ้นอยู่กับปริมาณ (IC50 = 1.41 ìg/mL) (รูป 2A)เรื่องน่าสนใจ แม้ มีความคล้ายคลึงของโครงสร้างการอายุ-1, 2 อายุไม่ยับยั้งไม่ หรือ PGE2
การแปล กรุณารอสักครู่..

เพื่อประเมินกิจกรรมต้านการอักเสบของ AGE-1 เรา
วัดการยับยั้งการ AGE-1-พึ่งโดยตรง
ไม่มีใน LPS-induced macrophage RAW 264.7 เซลล์โดยใช้
วิธีการเชิงปริมาณไนไตรท์ เราตรวจสอบต่าง ๆ
ความเข้มข้นของ AGE-1 (0, 5, 10, 15, และ 20 IG / มิลลิลิตร)
ดังแสดงในรูป 2A, AGE-1 ที่ระดับความเข้มข้นระหว่าง
5 และ 20 IG / mL อย่างมีนัยสำคัญยับยั้งการผลิต NO ใน
LPS-กระตุ้น RAW 264.7 ขนาดใหญ่ 4- (2-
aminoethyl) benzenesulfonyl ฟลูออไรไฮโดรคลอไร
(AEBSF) 0.3mm ถูกใช้เป็นตัวควบคุมในเชิงบวกสำหรับการยับยั้ง
การผลิต NO AEBSF เป็นมั่นคงละลายน้ำ
และสารพิษค่อนข้างครอบครอง
Nicotinamide adenine dinucleotide ฟอสเฟต
(NADPH) กิจกรรมต้านออกซิเดส; ดังนั้น,
มันถูก ใช้บ่อยในการออกแบบของยาเสพติดต้านการอักเสบ
(Cho et al. 2011) AGE-1 ที่ 5, 10, 15, และ 20 IG / mL
ยับยั้งการผลิต NO 14%, 18%, 24% และ
40% ตามลำดับเมื่อเทียบกับการผลิต NO ใน
เซลล์ควบคุม LPS รับการรักษา (IC50 = 29.6 IG / มิลลิลิตร) AGE-1
แสดงกิจกรรมต้านการอักเสบและเป็นพิษ
กับ RAW 264.7 เซลล์ที่ระดับความเข้มข้นถึง
20 IG / มิลลิลิตร นอกจากนี้เรายังตรวจสอบการยับยั้งการ PGE2
ผลิต ความเข้มข้นของ PGE2 ในวัฒนธรรม
ใสได้รับการวัดโดยใช้ชุด ELISA
indomethacin 10 IM ถูกใช้เป็นตัวควบคุมในเชิงบวกสำหรับ
การยับยั้งการผลิต PGE2 แม้ว่า indomethacin
เป็นที่รู้จักกัน COX-2 ยับยั้ง
นอกจากนี้ยังช่วยยับยั้งการแสดงออก ของ PGE2 (Ikarashi et al. 2011) AGE-1 อย่างมีนัยสำคัญ
ลดการผลิต LPS เหนี่ยวนำของ PGE2 ใน
ลักษณะปริมาณขึ้นอยู่กับ (IC50 = 1.41 IG / มิลลิลิตร) (รูป. 2A)
ที่น่าสนใจแม้จะมีความคล้ายคลึงกันของโครงสร้างที่จะ
AGE-1 อายุ 2 ไม่ได้ยับยั้งหรือ PGE2
การแปล กรุณารอสักครู่..

เพื่อประเมินกิจกรรมการของ age-1 เราตรงวัด age-1-mediated การยับยั้งไม่มีในการ 264.7 เซลล์แมคโครฟาจ RAW ใช้หล่อลื่นวิธีเชิงปริมาณไนไตรท์ . เราตรวจสอบต่าง ๆความเข้มข้นของ age-1 ( 0 , 5 , 10 , 15 และ 20 ì g / ml )ดังแสดงในรูปที่ 2A age-1 ที่ความเข้มข้นระหว่าง ,5 และ 20 ì g / ml สามารถยับยั้งไม่ผลิตสเปรย์กระตุ้นดิบ 264.7 macrophages . 4 - ( 2 -aminoethyl ) benzenesulfonyl ฟลูออไรด์ ไฮโดรคลอไรด์( aebsf ) 0.3 ใช้เป็นตัวควบคุมบวกยับยั้งไม่มีการผลิต aebsf เป็นมั่นคง , ละลายน้ำได้ ,และค่อนข้างปลอดสารพิษนี้ ครอบครองปูใบ้( nadph ) ของกิจกรรม เก็บเสียง ดังนั้น จึงเป็นมักใช้ในการออกแบบของการยา( โช et al . , 2011 ) age-1 ที่ 5 , 10 , 15 และ 20 ìกรัม / มิลลิลิตรยังไม่มีการผลิตโดย 14% , 18 และ 24 เปอร์เซ็นต์40 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับ เมื่อเทียบกับการผลิตในสเปรย์รักษาเซลล์คุม ( ic50 = ราวì g / ml ) age-1การจัดแสดงกิจกรรมและปลอดสารพิษต่อดิบ 264.7 เซลล์ที่เข้มข้นขึ้น20 ì g / ml นอกจากนี้เรายังศึกษาการยับยั้ง pge2การผลิต ความเข้มข้นของ pge2 ในวัฒนธรรมนำการวัดชุด ELISAอินโด 10 ì M ใช้เป็นตัวควบคุมบวกสำหรับการยับยั้ง pge2 การผลิต แม้ว่าการกินคือ การรู้จัก cox-2 ซึ่งนอกจากนี้ยังยับยั้งการแสดงออกของ pge2 ( ikarashi et al . , 2011 ) age-1 อย่างมีนัยสำคัญทางสถิติเป็นสเปรย์หล่อลื่นและ pge2 ในการผลิตของลักษณะปิดกั้น ( ic50 = 1.41 ì g / ml ) ( รูปที่ 2A )น่าสนใจ แม้จะมีความคล้ายคลึงกันของโครงสร้างage-1 age-2 , ไม่ยับยั้งไม่ หรือ pge2
การแปล กรุณารอสักครู่..
