Approximately 20 mg of liver was pl

Approximately 20 mg of liver was placed into 500 µL of chilled PBS (pH 7.4) and homogenized. The homogenate was centrifuged at 2000 x g for 10 min at 4 °C and 100 µL of the supernatant was then removed for free glycerol and total protein analysis. Triglyceride content was measured using a method adapted from Starke et al. The remaining liver homogenate was incubated with 100 µL of lipase for 16 h at 37°C and glycerol content was then determined by an enzymatic glycerol phosphate oxidase method . Triglyceride content was calculated based on the difference between glycerol concentrations before and after lipase digestion. Total protein content of the original homogenate was analyzed by a Coomassie blue colorimetric method .To avoid potential bias introduced by differences in moisture content of liver samples, liver TG concentration was normalized by protein concentration which is unaltered in fatty liver.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ประมาณ 20 มิลลิกรัมของตับอยู่ใน 500 µL ของ PBS แช่เย็น (pH 7.4) และ homogenized Homogenate การแก้ไขผลิตภัณฑ์ที่ g 2000 x 10 นาทีที่อุณหภูมิ 4 ° C และ 100 µL ของ supernatant ถูกเอาออกสำหรับวิเคราะห์โปรตีนรวมและกลีเซอรอลฟรี ไตรกลีเซอไรด์เนื้อหาซึ่งวัดได้โดยใช้วิธีการดัดแปลงจาก Starke et al Homogenate ตับเหลือมี incubated มี 100 µL ของเอนไซม์ไลเปสสำหรับ h 16 37° c และกลีเซอรอลเนื้อหาแล้วกำหนด โดยวิธีการ oxidase ฟอสเฟตเอนไซม์กลีเซอรอล ไตรกลีเซอไรด์เนื้อหาถูกคำนวณจากความแตกต่างระหว่างความเข้มข้นของกลีเซอรอลก่อน และ หลังการย่อยอาหารเอนไซม์ไลเปส ปริมาณโปรตีนทั้งหมดของ homogenate เดิมถูกวิเคราะห์ โดยวิธีการวัดสี Coomassie blue เพื่อหลีกเลี่ยงอาจเกิดอคติจากความแตกต่างในความชื้นของตัวอย่างตับ ตับ TG สมาธิได้ตามปกติ โดยความเข้มข้นของโปรตีนซึ่งมี unaltered ในตับไขมัน

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ประมาณ 20 มิลลิกรัมของตับถูกวางลงใน 500 ไมโครลิตรของแช่เย็นพีบีเอส (pH 7.4) และหดหาย homogenate ถูกหมุนเหวี่ยงที่ 2,000 XG เป็นเวลา 10 นาทีที่ 4 ° C และ 100 ไมโครลิตรของสารละลายจะถูกลบออกแล้วสำหรับกลีเซอรอลฟรีและการวิเคราะห์โปรตีนทั้งหมด เนื้อหาไตรกลีเซอไรด์วัดโดยใช้วิธีการที่ดัดแปลงมาจากสตาร์ก, et al homogenate ตับที่เหลือถูกบ่มด้วย 100 ไมโครลิตรของเอนไซม์ไลเปสเป็นเวลา 16 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสและเนื้อหากลีเซอรอลถูกกำหนดแล้วโดยเอนไซม์กลีเซอรอลฟอสเฟตวิธีการออกซิเดส เนื้อหาไตรกลีเซอไรด์ที่คำนวณได้อยู่บนพื้นฐานของความแตกต่างระหว่างความเข้มข้นของกลีเซอรอลก่อนและหลังเอนไซม์ไลเปสย่อยอาหาร ปริมาณโปรตีนรวมของ homogenate เดิมถูกวิเคราะห์โดยวิธีการสีฟ้า Coomassie หากต้องการหลีกเลี่ยงอคติที่มีศักยภาพการแนะนำให้รู้จักความแตกต่างในปริมาณความชื้นของตัวอย่างตับตับเข้มข้น TG ถูกปกติโดยความเข้มข้นของโปรตีนซึ่งเป็นไม่เปลี่ยนแปลงในตับไขมัน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ประมาณ 20 มิลลิกรัมของตับอยู่ใน 500 µลิตรเย็นพีบีเอส ( pH 7.4 ) และบด . โดยแยกเป็นระดับที่ 2000 x G สำหรับ 10 นาทีที่ 4 ° C และ 100 µ L ของกลีเซอรอลสูงถูกลบออกแล้วสำหรับฟรีและการวิเคราะห์โปรตีนทั้งหมด ไตรกลีเซอไรด์ปริมาณการวัดโดยใช้วิธีที่ดัดแปลงจาก Strong et al . ที่เหลือเป็นตับแยกแยก 100 µ L ไลเปสเพื่อ 16 ชั่วโมง 37 ° C และกลีเซอรอล เนื้อหาถูกกำหนดโดยมีกลีเซอรอลฟอสเฟตเอนไซม์โดยวิธี ไตรกลีเซอไรด์ปริมาณคำนวณอยู่บนพื้นฐานของความแตกต่างระหว่างความเข้มข้นของกลีเซอรอลก่อนและหลังการย่อยอาหารเอนไซม์ . ปริมาณโปรตีนรวมของปริมาณเดิมถูกวิเคราะห์โดยวิธี Colorimetric เหล่านี้น่าจะเป็นสีฟ้า เพื่อหลีกเลี่ยงการเกิดอคตินำโดยความแตกต่างของความชื้นของตัวอย่าง ตับ ตับเป็นปกติของ TG โดยโปรตีนซึ่งจะไม่เปลี่ยนแปลงในตับไขมัน