Crystals that are optically too dense to record absorption
spectra of any use are still amenable to ¯uorescence spectroscopy,
as demonstrated in the case of PYP (Fig. 3). Emission
spectra from the weakly fuorescent chromophore of PYP,
although they mainly probe the crystal surface and may be
distorted by inner ®ltering effects, are of outstanding signal to
noise ratio, and reveal several features that could be useful for
detailed studies on this system. Although a precise interpretation
of these spectra is beyond the scope of this paper,
they appear consistent with results obtained by Hoff et al.
(1992), who described the low-temperature ¯uorescence of
PYP in solution of 67% (vol./vol.) glycerol. Although in¯uence
of e.g. the glycerol content or the crystallization medium
should be taken into account, fuorescence could be used to
perform a comparative study of PYP in solution and in the
crystalline form. Although PYP rapidly enters its photocycle
upon blue light absorption, it seems likely that, at the used
temperatures and under our conditions of illumination
[compare with Genick et al. (1998) who used much longer light
exposure], the spectra of Fig. 3 mostly originate from PYP in
its ground-state conformation. However, the build-up of
intermediate states along the PYP photocycle could potentially
be followed by fuorescence under conditions of actinic
illumination. Our results open the way to similar studies on
crystals of other light-sensitive proteins. For example, bacteriorhodopsin
was also demonstrated to be fuorescent at low
temperature (Gillbro & Kriebel, 1979; Gillbro et al., 1977;
Gillbro & SundstroÈ m, 1983).
ผลึกที่มีสายตาที่หนาแน่นเกินไปที่จะบันทึกการดูดซึม
สเปกตรัมของการใช้งานใด ๆ ยังคงคล้อยตาม¯uorescenceสเปกโทรสโก,
แสดงให้เห็นว่าในกรณีของ PYP (รูปที่. 3) การปล่อย
สเปกตรัมจาก chromophore fuorescent อ่อนของ PYP,
แม้ว่าพวกเขาส่วนใหญ่ตรวจสอบพื้นผิวผลึกและอาจถูก
บิดเบือนโดยผลกระทบ®lteringภายในมีสัญญาณที่โดดเด่นเพื่อ
เสียงอัตราส่วนและเปิดเผยคุณสมบัติหลายประการที่อาจจะมีประโยชน์สำหรับ
การศึกษารายละเอียดเกี่ยวกับระบบนี้ แม้ว่าการตีความแม่นยำ
ของสเปกตรัมเหล่านี้อยู่นอกเหนือขอบเขตของบทความนี้
พวกเขาจะปรากฏสอดคล้องกับผลที่ได้รับจากฮอฟฟ์ et al.
(1992) ที่อธิบาย¯uorescenceอุณหภูมิต่ำของ
PYP ในการแก้ปัญหา 67% (vol./vol .) กลีเซอรอล แม้ว่าin¯uence
ของเนื้อหาเช่นกลีเซอรอลหรือขนาดกลางตกผลึก
ควรจะนำเข้าบัญชี fuorescence สามารถใช้ในการ
ดำเนินการศึกษาเปรียบเทียบ PYP ในการแก้ปัญหาและใน
รูปแบบผลึก แม้ว่า PYP อย่างรวดเร็วเข้าสู่ photocycle ของมัน
เมื่อดูดซึมแสงสีฟ้ามันดูเหมือนว่าที่ใช้
อุณหภูมิและภายใต้เงื่อนไขของการส่องสว่างของเรา
[เปรียบเทียบกับ Genick et al, (1998) ที่ใช้มากอีกต่อไปแสง
แสง], สเปกตรัมของมะเดื่อ 3 ส่วนใหญ่มาจาก PYP ใน
ของโครงสร้างพื้นรัฐ อย่างไรก็ตามการสร้างขึ้นของ
รัฐระดับกลางตาม photocycle PYP อาจ
จะตามมาด้วย fuorescence ภายใต้เงื่อนไขของ actinic
ส่องสว่าง ผลของเราเปิดทางให้กับการศึกษาที่คล้ายกันใน
ผลึกของโปรตีนที่ไวต่อแสงอื่น ๆ ยกตัวอย่างเช่น bacteriorhodopsin
ก็ยังแสดงให้เห็นว่า fuorescent ต่ำ
อุณหภูมิ (Gillbro & KRIEBEL 1979; Gillbro et al, 1977;.
Gillbro & SundstroÈ M, 1983)
การแปล กรุณารอสักครู่..
