The extracts were analysed by LC–MS/MS on a Shimadzu
Prominance Nano HPLC (Japan) coupled to a Triple TOF 5600 mass
spectrometer (ABSCIEX, Canada) equipped with a nano
electrospray ion source. The peptide extract, 10 lL, was injected
onto a 50 mm 300 lm C18 trap column (Agilent Technologies,
Australia) at 60 lL/min. The samples were de-salted on the trap
column for 5 min using 0.1% formic acid at 60 lL/min. The trap column
was then placed in-line with the analytical nano HPLC column
(150 mm 100 lm 300SBC18, 3.5 lm, Agilent Technologies,
Australia) for mass spectrometry analysis. Linear gradients of
2–80% solvent B over 40 min at 500 nL/min flow rate, followed
by a steeper gradient from 80% to 96% solvent B in 1 min and held
for 5 min, were used for peptide elution. Solvent A consisted of
0.1% formic acid and solvent B contained 90% acetonitrile with
0.1% formic acid. The ionspray voltage was set to 2200 V, declustering
potential (DP) 100 V, curtain gas flow 25, nebuliser gas 1 (GS1)
12 and interface heater at 160 C. Full scan TOF-MS data were
acquired over the mass range 300–1800 and MS/MS 80–1400 for
product ion. The data was acquired and processed using Analyst
TF 1.6.1 software (ABSCIEX, Canada).
The extracts were analysed by LC–MS/MS on a ShimadzuProminance Nano HPLC (Japan) coupled to a Triple TOF 5600 massspectrometer (ABSCIEX, Canada) equipped with a nanoelectrospray ion source. The peptide extract, 10 lL, was injectedonto a 50 mm 300 lm C18 trap column (Agilent Technologies,Australia) at 60 lL/min. The samples were de-salted on the trapcolumn for 5 min using 0.1% formic acid at 60 lL/min. The trap columnwas then placed in-line with the analytical nano HPLC column(150 mm 100 lm 300SBC18, 3.5 lm, Agilent Technologies,Australia) for mass spectrometry analysis. Linear gradients of2–80% solvent B over 40 min at 500 nL/min flow rate, followedby a steeper gradient from 80% to 96% solvent B in 1 min and heldfor 5 min, were used for peptide elution. Solvent A consisted of0.1% formic acid and solvent B contained 90% acetonitrile with0.1% formic acid. The ionspray voltage was set to 2200 V, declusteringpotential (DP) 100 V, curtain gas flow 25, nebuliser gas 1 (GS1)12 and interface heater at 160 C. Full scan TOF-MS data wereacquired over the mass range 300–1800 and MS/MS 80–1400 forproduct ion. The data was acquired and processed using AnalystTF 1.6.1 software (ABSCIEX, Canada).
การแปล กรุณารอสักครู่..
สารสกัดที่ได้มาวิเคราะห์โดย LC-MS / MS บน Shimadzu
Prominance นาโน HPLC (ญี่ปุ่น) คู่กับ TOF Triple 5600
มวลสเปกโตรมิเตอร์(ABSCIEX, แคนาดา)
พร้อมกับนาโนแหล่งกำเนิดไอออนelectrospray สารสกัดจากเปปไทด์ 10
จะถูกฉีดลงบน50 มม? 300 ลูเมน C18 คอลัมน์ดัก (Agilent Technologies,
ออสเตรเลีย) ที่ 60 LL / นาที กลุ่มตัวอย่างถูกยกเลิกเค็มในกับดักคอลัมน์เป็นเวลา 5 นาทีโดยใช้ 0.1% กรดที่ 60 LL / นาที
คอลัมน์ดักที่ถูกวางไว้ในแนวเดียวกันกับคอลัมน์ HPLC นาโนวิเคราะห์ (150 มิลลิเมตร 100 ลูเมน 300SBC18 3.5 ไมครอน, Agilent Technologies, ออสเตรเลีย) สำหรับการวิเคราะห์มวลสาร การไล่ระดับสีเชิงเส้นของ2-80% ตัวทำละลาย B กว่า 40 นาทีที่ 500 nL / นาทีอัตราการไหลตามโดยลาดชันจาก80% เป็น 96% ในตัวทำละลาย B 1 นาทีและจัดขึ้นเป็นเวลา5 นาทีถูกนำมาใช้สำหรับการชะเปปไทด์ ตัวทำละลายประกอบด้วยกรด 0.1% และตัวทำละลาย B มี acetonitrile 90% กับ 0.1% กรด แรงดันไฟฟ้า ionspray ถูกกำหนดให้ 2200 V, declustering ที่มีศักยภาพ (DP) 100 V, การไหลของก๊าซม่าน 25, แก๊ส Nebuliser 1 (GS1) 12 และเครื่องทำอินเตอร์เฟซที่ 160 องศาเซลเซียส เต็มสแกนข้อมูล TOF-MS ถูกที่ได้มาในช่วงมวล300-1800 และ MS / MS 80-1400 สำหรับไอออนสินค้า ข้อมูลที่ได้มาประมวลผลและวิเคราะห์โดยใช้TF 1.6.1 ซอฟแวร์ (ABSCIEX, แคนาดา)
การแปล กรุณารอสักครู่..
สารสกัดและวิเคราะห์โดย LC MS / MS ที่ Shimadzu
prominance นาโนกรัม ( ญี่ปุ่น ) คู่กับสาม tof 5600 Mass Spectrometer (
absciex , แคนาดา ) พร้อมกับนาโน
วิธีพ่นละอองไฟฟ้าอิออนแหล่งที่มา สารสกัดจากเปปไทด์ 10 จะถูกฉีด
ลง 50 mm 300 Lm c18 กับดักคอลัมน์ ( Agilent Technologies ,
ออสเตรเลีย ) ที่ 60 จะ / นาทีจำนวนเดเค็มบนกับดัก
คอลัมน์สำหรับ 5 นาทีใช้ 01 % กรดที่ 60 จะ / นาที กับดักคอลัมน์
ถูกวางไว้แล้วในบรรทัด ด้วยการวิเคราะห์นาโน HPLC คอลัมน์
( 150 มม. 100 LM 300sbc18 3.5 โดย Agilent Technologies ,
, ออสเตรเลีย ) สำหรับการวิเคราะห์มวลสาร . เชิงเส้นการไล่สีของ
2 – 80% ตัวทำละลาย B มากกว่า 40 นาที 500 nl / min อัตราการไหลตามความลาดชัน
โดยจาก 80% ถึง 96% ตัวทำละลาย B ใน 1 นาทีและจัดขึ้น
5 นาที ใช้เปปไทด์ชนิด .ตัวทำละลายเป็นประกอบด้วย
0.1% กรดและตัวทำละลาย B ที่มีอยู่ 90% ไนกับ
0.1% กรด . การ ionspray แรงดันตั้ง 2200 V , declustering
ศักยภาพ ( DP ) 100 V , ม่านก๊าซไหล 25 Nebuliser แก๊ส 1 ( GS1 )
12 และอินเตอร์เฟซที่ C 160 เครื่องสแกนเต็มรูปแบบข้อมูล tof-ms ถูก
ได้มากว่าช่วงมวล 300 – 1 , 800 และ MS / MS 80 – 1400 สำหรับ
ไอออนผลิตภัณฑ์ข้อมูลที่ได้มาวิเคราะห์และประมวลผลการใช้ TF ซอฟต์แวร์ (
. absciex , แคนาดา )
การแปล กรุณารอสักครู่..