Brefeldin A, wortmannin, and jasplakinolide affect
motility and morphology of endosomes
To test if endosomal movements were influenced by
inhibitors of membrane trafficking through endomembrane compartments, we applied brefeldin A(BFA) and
wortmannin to root hairs ofM. truncatula. The effect of
BFAwas traceable after 10 min (Fig. 8a) in the form of
an enlargement of FYVE-labeled endosomes which
concomitantly slowed down their motility. After
60 min of exposure to 100mM BFA, we scored
significant inhibition of endosomal motility and the size
of endosomes enlarged dramatically (Fig. 8b). Two
hours of BFAtreatment resulted in large agglomerates
of aggregated endosomes (Fig. 8c, arrows), known as
the ‘BFAcompartments’ in plant cells, with a greatly
reduced motility. Exposure of hairs to 10mM wortmannin produced similar, although less prominent, effects
on FYVE-labeled endosomes (Fig. 8d–f; Movies 18–21
for BFAand Movie 22 and 23 for wortmannin).
After scoring the dramatic changes of the actin
cytoskeleton upon jasplakinolide treatment, we also
ARTICLE IN PRESS
Fig. 7.Rapid motilities of tip-localized endosomes scored in
the untreated root hairs of M. truncatula(a–c) were not
affected by the inhibition of myosin motor-based activities
with 2,3-butanedione monoxime (d–f) but were almost
instantly inhibited by the exposure to latrunculin B which
rapidly depolymerizes F-actin (g–i). See also Table 1.
Bars¼10mm.
Fig. 8.Brefeldin Ainhibited motilities and caused enlargement
(arrows) and aggregation of FYVE-labeled early endosomes in
root hairs of M. truncatula(a–c). Similar, but less dramatic
effects (arrowheads) were induced also with wortmannin which
inhibits PI(3)P production in plants (d–f). Jasplakinolide
(1mM) inhibited the motility of the FYVE-labeled endosomes
in root hairs ofArabidopsisafter 30 min (g), whilst after 60 min
of exposure first larger aggregates (arrowhead) became visible
(h). After 20 min of 5mM jasplakinolide treatment the same
effects but in a more dramatic way were scored, the motility
was greatly decreased and the endosomes were enlarged
(i, arrowheads). Bars¼10mm.
B. Voigt et al. / European Journal of Cell Biology 84 (2005) 609–621 616
testedA. thalianaroot hairs expressing GFP-FYVE with
1 and 5mM jasplakinolide (Fig. 8g–i). Our data revealed
that FYVE-labeled endosomes considerably enlarged in
hairs treated with jasplakinolide, suggesting that dynamic F-actin is essential also for their morphology.
With increasing time of exposure and concentration of
jasplakinolide, endosomes slowed down their movements (Movie 24).
Brefeldin A, wortmannin, and jasplakinolide affect
motility and morphology of endosomes
To test if endosomal movements were influenced by
inhibitors of membrane trafficking through endomembrane compartments, we applied brefeldin A(BFA) and
wortmannin to root hairs ofM. truncatula. The effect of
BFAwas traceable after 10 min (Fig. 8a) in the form of
an enlargement of FYVE-labeled endosomes which
concomitantly slowed down their motility. After
60 min of exposure to 100mM BFA, we scored
significant inhibition of endosomal motility and the size
of endosomes enlarged dramatically (Fig. 8b). Two
hours of BFAtreatment resulted in large agglomerates
of aggregated endosomes (Fig. 8c, arrows), known as
the ‘BFAcompartments’ in plant cells, with a greatly
reduced motility. Exposure of hairs to 10mM wortmannin produced similar, although less prominent, effects
on FYVE-labeled endosomes (Fig. 8d–f; Movies 18–21
for BFAand Movie 22 and 23 for wortmannin).
After scoring the dramatic changes of the actin
cytoskeleton upon jasplakinolide treatment, we also
ARTICLE IN PRESS
Fig. 7.Rapid motilities of tip-localized endosomes scored in
the untreated root hairs of M. truncatula(a–c) were not
affected by the inhibition of myosin motor-based activities
with 2,3-butanedione monoxime (d–f) but were almost
instantly inhibited by the exposure to latrunculin B which
rapidly depolymerizes F-actin (g–i). See also Table 1.
Bars¼10mm.
Fig. 8.Brefeldin Ainhibited motilities and caused enlargement
(arrows) and aggregation of FYVE-labeled early endosomes in
root hairs of M. truncatula(a–c). Similar, but less dramatic
effects (arrowheads) were induced also with wortmannin which
inhibits PI(3)P production in plants (d–f). Jasplakinolide
(1mM) inhibited the motility of the FYVE-labeled endosomes
in root hairs ofArabidopsisafter 30 min (g), whilst after 60 min
of exposure first larger aggregates (arrowhead) became visible
(h). After 20 min of 5mM jasplakinolide treatment the same
effects but in a more dramatic way were scored, the motility
was greatly decreased and the endosomes were enlarged
(i, arrowheads). Bars¼10mm.
B. Voigt et al. / European Journal of Cell Biology 84 (2005) 609–621 616
testedA. thalianaroot hairs expressing GFP-FYVE with
1 and 5mM jasplakinolide (Fig. 8g–i). Our data revealed
that FYVE-labeled endosomes considerably enlarged in
hairs treated with jasplakinolide, suggesting that dynamic F-actin is essential also for their morphology.
With increasing time of exposure and concentration of
jasplakinolide, endosomes slowed down their movements (Movie 24).
การแปล กรุณารอสักครู่..
brefeldin , wortmannin และ jasplakinolide มีผลต่อการเคลื่อนที่และสัณฐานวิทยาของ endosomes
เพื่อทดสอบ หากการเคลื่อนไหว endosomal ได้รับอิทธิพลโดย
นค้า endomembrane เยื่อผ่านช่องที่เราใช้ brefeldin ( BFA )
wortmannin รากขน OFM . truncatula . ผลของ
bfawas ติดตามได้หลัง 10 นาที ( รูปที่ 8A ) ในรูปแบบของการขยายตัวของ fyve
endosomes ซึ่งติดป้ายชื่อเป็นทีมชะลอการเคลื่อนที่ของพวกเขา หลังจาก 60 นาทีของการสัมผัสกับ 100mm
เรียน เราได้คะแนนระดับ endosomal ยับยั้งการเคลื่อนที่และขนาดของ endosomes ขยายอย่างมาก
( รูปที่ใส่ ) สองชั่วโมงของ bfatreatment ส่งผลให้เกิด
ของขนาดใหญ่รวมรวม ( รูปที่ endosomes 8C , ลูกศร ) , ที่รู้จักกันเป็น bfacompartments
' ' ในเซลล์พืชมีมาก
ลดการเคลื่อนที่ .สัมผัสของเส้นผมที่ 10mm wortmannin คล้ายกัน แต่น้อยกว่าผล
fyve ป้าย ( รูปบน endosomes 8D ) F ; ดูหนัง 18 – 21
สำหรับ bfaand ภาพยนตร์ 22 และ 23 wortmannin ) .
หลังจากการให้คะแนนการเปลี่ยนแปลงขนานใหญ่ของ actin
ขาดตอนเมื่อ jasplakinolide รักษา เรายัง
รูปที่ 7 บทความข่าว motilities ยิงอย่างรวดเร็วเคล็ดลับในถิ่น endosomes
ดิบขนรากของม.truncatula ( ( C ) ไม่มีผลต่อการยับยั้ง
กับ myosin มอเตอร์ตามกิจกรรม 2,3-butanedione monoxime ( D ) F ) แต่เกือบ
ทันทียับยั้งโดยการเปิดรับ latrunculin B ซึ่ง
อย่างรวดเร็ว depolymerizes f-actin ( G ( ฉัน ) เห็นตารางที่ 1 .
บาร์¼ 10mm .
รูปที่ 8 brefeldin ainhibited motilities และทำให้ขยาย
( ลูกศร ) และการรวมตัวของ fyve ติดป้ายก่อน
endosomes ในขนรากของ truncatula ( ( C ) ที่คล้ายกัน แต่ผลกระทบอย่างมาก
น้อย ( หัวลูกศร ) ซึ่งถูกชักนำด้วย wortmannin
ยับยั้งพาย ( 3 ) การผลิตพืช ( D ) P f ) jasplakinolide
( 1 mm ) สามารถยับยั้งการเคลื่อนที่ของ fyve ป้าย endosomes
ในรากขน ofarabidopsisafter 30 นาที ( G ) , ในขณะที่หลังจาก 60 นาทีของการเปิดรับครั้งแรก
ขนาดใหญ่มวลรวม ( หัวลูกศร ) กลายเป็นมองเห็นได้
( H )หลังจาก 20 นาทีของการรักษา jasplakinolide 5mm เดียวกันผลแต่ในทางเร้าใจมากขึ้นคะแนน , การเคลื่อนที่
ถูกลดลงอย่างมาก และ endosomes รากฟัน
( i , หัวลูกศร ) บาร์¼ 10mm .
b วอยก์ต et al . / วารสารยุโรปเซลล์ชีววิทยา 84 ( 2005 ) 609 – 621 616
testeda . thalianaroot ขนการแสดง gfp-fyve กับ
1 และ 5 jasplakinolide ( รูปที่ 8 ) ผม ) ข้อมูลเปิดเผย
ที่ fyve ป้าย endosomes มากขยายใน
ขนได้รับ jasplakinolide บอกว่าแบบไดนามิก f-actin เป็นสิ่งจำเป็นสำหรับการศึกษาของพวกเขา ด้วยการเพิ่มเวลาของการเปิดรับแสง
jasplakinolide และความเข้มข้นของ endosomes , ชะลอตัวลงการเคลื่อนไหวของพวกเขา ( ภาพยนตร์ 24 )
การแปล กรุณารอสักครู่..