2.2. ABA treatment and RNA extracti

2.2. ABA treatment and RNA extraction

The seeds of the model maize inbred line B73 were sterilized, germinated in petri dish, and transplanted into a plastic mesh grid for hydroponic culture at 28 °C under illumination of 200 μmol/m− 2 s− 1 for a photoperiod of 12 h light/12 h dark. The nutrient solution was replaced every three days. At the three-leaf stage, 100 identical seedlings were divided into three replicates, and treated with 100 μmol L− 1 (±) ABA (Sigma, USA). After 0 (control), 1, 3, 6, 9, 12 and 24 h, the leaves and roots were collected, and ground into powder in liquid nitrogen. Total RNA was extracted with RNAiso Plus (TaKaRa, Japan), measured for RNA concentration and integrity, and used for reverse transcription of cDNA with PrimeScript™II1st Strand cDNA synthesis Kit (Takara, Japan).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.2. ABA รักษาและสกัดอาร์เอ็นเอเมล็ดของข้าวโพดรุ่นเสถียรบรรทัด B73 sterilized งอกในจานเพาะเชื้อ และปลูกเป็นพลาสติกตาข่ายตารางสำหรับไฮโดรโปนิวัฒนธรรมที่ 28 ° C ภายใต้แสงสว่างของ 200 ไมโคร โมล/m− 2 s− 1 สำหรับช่วงแสง 12 h แสง/12 ชม.เข้ม สารละลายถูกแทนทุกสามวัน ในขั้น 3 ใบ 100 ต้นกล้าเหมือนแบ่งเหมือนกับสาม และรักษา ด้วย 100 ไมโครโมล 1 L− (±) ABA (ซิกม่า สหรัฐอเมริกา) หลังจาก 0 (ควบคุม), 1, 3, 6, 9, 12 และ 24 h ใบและรากได้รวบรวม และบดเป็นผงในไนโตรเจนเหลว รวม RNA แยกกับ RNAiso พลัส (TaKaRa ญี่ปุ่น), วัดความเข้มข้นของ RNA และความสมบูรณ์ และใช้สำหรับถอดรหัสย้อนกลับของ cDNA กับการสังเคราะห์ cDNA PrimeScript™ II1st Strand Kit (Takara ญี่ปุ่น)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.2 การรักษา ABA และ RNA สกัด

เมล็ดของรูปแบบข้าวโพดสายพันธุ์ B73 ถูกฆ่าเชื้องอกในจานเพาะเชื้อและปลูกลงในตารางตาข่ายพลาสติกสำหรับวัฒนธรรม hydroponic ที่ 28 ° C ภายใต้การส่อง 200 ไมโครโมล / M- 2 s- 1 สำหรับ แสงไฟจาก 12 H / มืด 12 ชั่วโมง วิธีการแก้ปัญหาสารอาหารที่ถูกแทนที่ทุกสามวัน ในขั้นตอนสามใบ 100 ต้นกล้าเหมือนถูกแบ่งออกเป็นสามซ้ำและได้รับการรักษาด้วย 100 ไมโครโมล L-1 (±) ABA (Sigma, สหรัฐอเมริกา) หลังจากที่ 0 (Control), 1, 3, 6, 9, 12 และ 24 ชั่วโมงใบและรากที่ถูกเก็บรวบรวมและบดเป็นผงในไนโตรเจนเหลว อาร์เอ็นเอทั้งหมดถูกสกัดด้วย RNAiso พลัส (Takara ประเทศญี่ปุ่น), วัดความเข้มข้นของ RNA และความสมบูรณ์และใช้สำหรับการถอดความย้อนกลับของยีนที่มี PrimeScript ™ II1st Strand ยีนสังเคราะห์ Kit (Takara ประเทศญี่ปุ่น)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.2 . ABA บำบัดและ RNA การสกัดเมล็ดของข้าวโพดสายพันธุ์แท้แบบเส้น b73 ถูกฆ่าเชื้องอก , ในจานเพาะเชื้อและปลูกถ่ายลงในตะแกรงตาข่ายพลาสติกสำหรับวัฒนธรรม Hydroponic ที่ 28 ° C ในรัศมี 200 μ mol / m − 2 s − 1 สำหรับช่วงแสง 12 ชั่วโมง 12 ชั่วโมงแสง / มืด สารละลายธาตุอาหารที่ถูกแทนที่ทุก 3 วัน ขั้นตอนที่ 3 ใบ 100 ต้นกล้าเหมือนกัน แบ่งเป็น 3 แบบ และได้รับ 100 μโมล L − 1 ( ± ) ABA ( Sigma , USA ) หลังจาก 0 ( control ) , 1 , 3 , 6 , 9 , 12 และ 24 ชั่วโมง ใบ และราก ในการเก็บรวบรวมและบดเป็นผงในไนโตรเจนเหลว อาร์เอ็นเอทั้งหมดถูกสกัดด้วย rnaiso พลัส ( Takara , ญี่ปุ่น ) , วัดความเข้มข้นของ RNA และสมบูรณ์ และใช้สำหรับการถอดรหัสของยีนกับ primescript ย้อนกลับ™ ii1st เกลียวดีเอ็นเอสังเคราะห์ชุด ( Takara , ญี่ปุ่น )