3.4. Azoreductase production of isolated bacteria
In the bioremoval studies that performed with B. megateriumand B. pumilus, it has been seen in the media that contains RB dye,the color of the medium was disappeared at the end of the incubation time. Because of this reason it was thought that the dyeremoval was occurred by enzymatic degradation. Therefore the azoreductase activities of the three bacteria were investigated at the optimum pH value for bioremoval studies (pH 7) throughout 1,2, and 3 days of cultivations carried out in molasses liquid mediumat 30◦C and 100 rpm. In the experiments, 2 mL of culture, which was formerly activated at the same pH for the azoreductase activity, was inoculated in 100 mL cultivation medium. The results given in Table 3 shows the azoreductase activities obtained for RB dye throughout three days of incubation time. It is seen in the table that M. luteus did not show azoreductase activity for removal of RB.It was also clearly seen during bioremoval experiments. Because it was noticed that during sampling, the color of the bacterial pellet was the same with the color of tested dye. On the other hand the color of the pellets harvested from B. megaterium and B. pumiluswere not colored. This suggested that Bacillus-derived azoreductases were responsible for biodegradation of RB. Thus it is seen in the table that the maximum azoreductase activity was obtained as 39.9 U mL−1 for B. pumilus at the end of the second day. High enzyme activities were obtained also for the first and the third days of incubation time. This is not a surprising result when the bioremoval experiments were considered. Because this bacteria was could remove all of the tried dye concentrations with nearly 70% removal yield at the end of a short incubation time such as three day. There were also high azoreductase activities for B. mega-terium during the first and second days of incubation time such as 37.4 and 33.6 U/mL. But there was a sharp decrease at third day. The lowest enzyme activity was 0.34 U/mL at third day for these bacteria. Generally, azo dyes are resistant to attack by bacteria under aerobic conditions. In contrast, some specialized strains of aerobic bacteria have developed the ability to reduce the azo group by special oxygen-tolerant azoreductases. For example in a study an azo dye namely Methyl Red was degraded by Enterobacter agglomerans under aerobic conditions containing 100 mg/L dye and the azoreductase activity found as 36.5 U/mL for crude extract (Moutaouakkilet al., 2003). In another study, the researchers isolated an aerobic azoreductase enzyme was decolorizing Methyl red, in addition tosulfonated azo dyes Orange II, Amaranth, Ponceau BS, and PonceauS. The crude enzyme activitiy found as 16.4 × 10−2/20 mL in the presence of 0.2 mM methyl red dye (Chen et al., 2004).
3.4 . การผลิต azoreductase แยกแบคทีเรีย
ใน bioremoval การศึกษาที่ดำเนินการกับพ. megateriumand พ. ลลั ูมิลุส มันได้รับการเห็นในสื่อที่ประกอบด้วย RB ย้อม สีปานกลางก็หายตัวไปที่จุดสิ้นสุดของระยะเวลา . เพราะเหตุนี้มันถูกคิดว่า dyeremoval ที่เกิดจากการย่อยสลายของเอนไซม์ .ดังนั้น azoreductase กิจกรรมของแบคทีเรีย 3 ศึกษาที่ค่า pH ที่เหมาะสมสำหรับ bioremoval Studies ( pH 7 ) ตลอดทั้ง 1 , 2 และ 3 วันนับจากวันเพาะออกมากากน้ำตาลเหลว mediumat 30 ◦ C 100 รอบต่อนาที ในการทดลองที่ 2 ml ของวัฒนธรรม ซึ่งเคยทำงานที่ pH เดียวกันสำหรับ azoreductase กิจกรรม เป็นเชื้อในการเพาะ 100 ml )ผลที่ได้รับใน ตารางที่ 3 แสดงกิจกรรม azoreductase ย้อมตลอด 3 วัน ได้ในระยะเวลาการบ่ม จะเห็นได้ในตารางเมตร luteus ไม่ได้แสดงกิจกรรม azoreductase เพื่อกำจัดพวกมันยังเห็นได้อย่างชัดเจนระหว่างการทดลอง bioremoval . เพราะสังเกตว่าในตัวอย่างสีของเม็ดแบคทีเรียเป็นเดียวกันกับสีทั้งสองสีบนมืออื่น ๆ สีของเม็ดจาก B . megaterium เก็บเกี่ยวและ pumiluswere ไม่ได้สี นี้แสดงให้เห็นว่าเชื้อได้มา azoreductases ต้องรับผิดชอบ ต่อการย่อยสลายของ RB . ดังนั้นจึงเห็นได้ในโต๊ะกิจกรรม azoreductase สูงสุดได้เป็น− 1 สำหรับ B . u 39.9 กรัม ลลั ูมิลุสที่ส่วนท้ายของวันที่สองกิจกรรมเอนไซม์สูงที่ได้รับยังเป็นครั้งแรกและวันที่สามของเวลาในการบ่ม นี้ไม่น่าแปลกใจ เมื่อผลการทดลอง bioremoval ระดับปานกลาง เพราะแบคทีเรียนี้สามารถลบทั้งหมดของพยายามย้อมความเข้มข้นเกือบ 70% เอาผลผลิต ในตอนท้ายของช่วงเวลาสั้น ๆบ่มเช่น สามวัน นอกจากนี้ ยังได้มีกิจกรรม azoreductase สูง Bterium เมกา ช่วงวันแรกและสองของระยะเวลาเช่น 37.4 33.6 U / ml แต่มีการลดลงคมชัดในวันที่สาม เอนไซม์ต่ำสุด 0.34 U / ml ในวันที่สามสำหรับแบคทีเรียเหล่านี้ โดยทั่วไปสีอะโซจะป้องกันการโจมตีโดยจุลินทรีย์ภายใต้สภาวะแอโรบิก . ในทางตรงกันข้ามพิเศษบางสายพันธุ์ของแบคทีเรียแอโรบิกได้พัฒนาความสามารถในการลดกลุ่มอะโซโดยพิเศษออกซิเจนใจกว้าง azoreductases . ตัวอย่างเช่นในการศึกษาการย้อม azo ได้แก่เมทิลสีแดงถูกสลายโดย Enterobacter agglomerans ภายใต้สภาวะแอโรบิก ( 100 mg / L สีและ azoreductase กิจกรรมพบเป็น 36.5 U / ml สารสกัด ( moutaouakkilet al . , 2003 ) ในการศึกษาอื่นนักวิจัยแยกเอนไซม์ azoreductase แอโรบิกคือกระดูกเมธิลสีแดง นอกจากนี้ tosulfonated สีอะโซส้ม II , ผักโขม , BS , และใน ponceaus . เอนไซม์ที่พบเป็น 16.4 activitiy × 10 − 2 / 20 ml ในการแสดงตนของ 0.2 มม. เมธิลสีแดงย้อม ( Chen et al . , 2004 )
การแปล กรุณารอสักครู่..
