2.7. a-Amylase inhibitory assayTest

2.7. a-Amylase inhibitory assay
Test samples [EESS (6.25, 12.5, 25, 50, 100, 200 mg/mL) and
nojirimycin (6.25e200 mg/mL)] of 500 ml concentration were
added to 500 ml of 0.02 M sodium phosphate buffer (pH 6.9
with 0.006 M sodium chloride) containing 0.5 mg/mL porcine
pancreatic a-amylase solution (Sigma Chemical Co., St.
Louis, MO, USA) and were incubated at 25C for 10 minutes.
After the preincubation, 500 ml of 1% starch solution in 0.02 M
sodium phosphate buffer (pH 6.9 with 0.006 M sodium chloride)
was added to each tube at prespecified intervals. The
reaction mixtures were then incubated at 25C for 10
minutes. The reaction was stopped by adding 1 mL of 3,5-
dinitrosalicylic acid color reagent. The test tubes were then
incubated in a boiling water bath for 5 minutes and cooled
down to room temperature. The reaction mixture was then
diluted after adding 10 mL of distilled water and absorbance
was measured at 540 nm

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.7 การวิเคราะห์ลิปกลอสไขมี Amylaseทดสอบตัวอย่าง [EESS (6.25, 12.5, 25, 50, 100, 200 mg/mL) และnojirimycin (6.25e200 mg/mL)] ของความเข้มข้น 500 ml ได้เพิ่มขนาด 500 มล.ของ 0.02 M โซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 6.9มี 0.006 M โซเดียมคลอไรด์) ที่ประกอบด้วยช่วง 0.5 mg/mLโซลูชันมี amylase ตับอ่อน (ซิกเคมี Co. เซนต์Louis, MO สหรัฐอเมริกา) และ incubated ที่ 25 C 10 นาทีหลังจาก preincubation, 500 ml ของ 1% แป้งใน 0.02 Mโซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 6.9 กับ 0.006 M โซเดียมคลอไรด์)มีเพิ่มให้หลอดแต่ละช่วงเวลา prespecified ที่น้ำยาผสมปฏิกิริยาได้แล้ว incubated ที่ 25 C 10นาที หยุดปฏิกิริยา ด้วยการเพิ่มมล 1 3,5-รีเอเจนต์สีกรด dinitrosalicylic หลอดทดสอบได้แล้วincubated ในน้ำน้ำเดือด 5 นาที และระบายความร้อนด้วยจนถึงอุณหภูมิห้อง มีส่วนผสมของปฏิกิริยาแล้วยกเว้นหลังจากเพิ่ม 10 mL ของน้ำกลั่นและ absorbanceมีวัดที่ 540 nm

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.7 อะไมเลส-ทดสอบการยับยั้ง
ตัวอย่างทดสอบ [EESS (6.25, 12.5, 25, 50, 100, 200 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร) และ
nojirimycin (6.25e200 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร)] 500 มล. ความเข้มข้นที่ถูก
เพิ่มเข้ามาใน 500 มล 0.02 M โซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 6.9
กับ 0.006 โซเดียมคลอไรด์ M) ที่มี 0.5 มิลลิกรัม / มิลลิลิตรสุกร
ตับอ่อนแก้ปัญหาอะไมเลส (ซิกม่า Chemical Co. , เซนต์
หลุยส์, MO, USA) และได้รับการบ่มที่ 25 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 10 นาที.
หลังจาก preincubation 500 มล. ของการแก้ปัญหาแป้ง 1% 0.02 M
โซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 6.9 กับ 0.006 โซเดียมคลอไรด์ M)
ถูกบันทึกอยู่ในหลอดแต่ละช่วงเวลา prespecified
ผสมปฏิกิริยาถูกบ่มแล้วอยู่ที่ 25 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 10
นาที ปฏิกิริยาก็หยุดโดยการเพิ่ม 1 มิลลิลิตร 3,5-
dinitrosalicylic สารสีกรด หลอดทดลองแล้วได้รับการ
บ่มในอ่างน้ำเดือด 5 นาทีและระบายความร้อน
ลงไปที่อุณหภูมิห้อง ผสมปฏิกิริยาจากนั้นก็
ปรับลดหลังจากเพิ่ม 10 มิลลิลิตรของน้ำกลั่นและการดูดกลืนแสง
วัดที่ 540 นาโนเมตร

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.7 . a-amylase ยับยั้ง assay
ทดสอบตัวอย่าง [ eess ( 6.25 , 12.5 , 25 , 50 , 100 และ 200 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร )
nojirimycin ( 6.25e200 mg / ml ) 500 ml ความเข้มข้น
เพิ่ม 500 ml 0.02 M โซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 6.9
กับ 0.006 M โซเดียมคลอไรด์ 0.5 มก. / ล. ) ที่มี มิลลิลิตรจากตับอ่อน ( ซิกมาโซลูชั่น a-amylase

Chemical Co . , เซนต์ หลุยส์ โม , USA ) และอุณหภูมิ 25 C
 เป็นเวลา 10 นาทีหลังจากพบ 500 มิลลิลิตรของสารละลายแป้งร้อยละ 0.02 M
โซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 6.9 กับ 0.006 M โซเดียมคลอไรด์ )
ถูกเพิ่มเข้าไปในแต่ละหลอดที่จรช่วง
ปฏิกิริยาผสมแล้ว  อุณหภูมิ 25 C 10
นาที ปฏิกิริยาที่ถูกหยุดโดยการเพิ่มจำนวน 1 มิลลิลิตร -
dinitrosalicylic กรดสีเกิดปฏิกิริยา หลอดทดสอบแล้ว
บ่มในอ่างน้ำเดือดประมาณ 5 นาที และทำให้เย็น
ลงถึงอุณหภูมิห้อง ปฏิกิริยาที่ผสมเจือจางแล้ว
หลังจากเติมน้ำกลั่น 10 มิลลิลิตรและค่า
วัด 540 นาโนเมตร