VP35 is a viral polymerase cofactor

VP35 is a viral polymerase cofactor that functions in RNA synthesis and has been proposed to link L to NP. In addition to these roles, VP35 plays a prominent role in Ebola’s inhibition of α and β interferon induction through multiple mechanisms.

RIG-I and MDA-5 are innate pattern recognition receptors that detect foreign cytosolic RNA. RIG-I recognizes 5′-triphosphates of blunt-ended RNA, and MDA-5 senses long double-stranded RNA (dsRNA). Both signal via the downstream adaptor IPS-1 (a.k.a. MAVS, VISA, Cardif), resulting in NF-κB, IRF-3, and IRF-7 activation with subsequent expression of type I interferon and proinflammatory cytokines. Activation of IRF-3/7 is the result of a signal cascade through which they are phosphorylated by TANK-binding kinase 1 (TBK-1) and IκB kinase-ε (IKKε) (Chiang et al., 2014





). Early experiments determined that VP35 disrupted the RIG-I pathway by preventing IRF-3 phosphorylation (Basler et al., 2000





, Basler et al., 2003





). Later, VP35 was shown to interact with the N-terminal kinase domain of IKKε in preventing IRF-3 phosphorylation and acting as a decoy substrate for IKKε /TBK-1 kinases. Furthermore, binding of VP35 to IKKε prevents interactions with other proteins, including IRF-7 and IPS-1 (Prins et al., 2009





). The net result of these interactions is inhibition of the induction of genes with interferon response promoters.

In addition to these downstream events in the RIG-I pathway, VP35 interacts with dsRNA to prevent RIG-I and MDA-5 responses (Cárdenas et al., 2006





). Structural and biochemical studies revealed that VP35 contains a C-terminal interferon inhibitory domain (IID) with two clusters of basic amino acids. One cluster centers on residue R312 and participates in binding to dsRNA. Further analysis revealed that VP35 binds to blunt-ended dsRNA in a manner very similar to that seen with RIG-I (Cárdenas et al., 2006





, Leung et al., 2009





, Leung et al., 2010a





). Structural studies of VP35 dsRNA binding are consistent with the finding that VP35 prevents both RIG-I and MDA-5 responses. Observations from RNA-bound and -unbound structures revealed that VP35 is able to bind both the phosphate backbone of dsRNA and end-capped RNA in VP35 dimers. Mutations of the basic patch centering on R312 abrogate dsRNA binding, and structural analysis suggests that R312 mutations disrupt VP35 dimerization (Kimberlin et al., 2010





). Experiments using recombinant viruses incorporating mutant VP35R312A showed attenuation of virulence and impairment of both virus growth and interferon antagonism, suggesting that IID binding to dsRNA and VP35 dimerization play key roles in the virus life cycle and pathogenesis (Hartman et al., 2008a





, Hartman et al., 2008b





, Kimberlin et al., 2010





, Prins et al., 2010





).

Interestingly, comparisons of VP35 IID from the pathogenic Zaire ebolavirus and Reston ebolavirus—thus far only pathogenic in monkeys—revealed a slight decrease in interferon antagonism and dsRNA binding by Reston. However, these decreases did not appear to contribute significantly to the differences in virulence between the Zaire and Reston viruses (Leung et al., 2010b





). Furthermore, comparison of the structures of the Zaire and Reston VP35 did not reveal substantial differences between the dsRNA recognition mechanisms (Kimberlin et al., 2010





). Together, these data suggest additional viral factors likely play a role in the differential host responses between these two viruses.

Recently, VP35 was found to interact with the PKR activator (PACT) (Fabozzi et al., 2011





). In addition to having activity in RNA silencing and PKR activation, PACT binds to and activates RIG-I. Subsequent work showed that VP35 binding to PACT prevents PACT binding to RIG-I and inhibits RIG-I activation (Luthra et al., 2013





). VP35 binding to PACT is mediated by the same central basic patch in IID that abrogates dsRNA binding described above, suggesting a possible role for dsRNA in this interaction. Surprisingly, PACT interaction with VP35 inhibits the binding of VP35 with L, causing a decreased efficiency of viral RNA synthesis and genome replication, a phenotype of “mutual antagonism” (Luthra et al., 2013





). Taken together with previous data, these experiments point to the critical importance of VP35 antagonism of the RIG-I pathway during ebolavirus infection.

Additional VP35 interactions with cellular proteins have been explored using a yeast two-hybrid system. These studies found that VP35 interacts with IRF-7, Ubc9, and PIAS1 (Chang et al., 2009





). Ubc9 and PIAS1 are key components of the small ubiquitin-related modifier (SUMO) system of posttranslational modification, which regulates a variety of cellular pathways and proteins. During SUMOylation, SUMO proteins are activated by SUMO-specific proteases and are transferred to a SUMO-conjugating E2 enzyme (e.g., Ubc9). Next, an E3 ligase, such as PIAS1, is used to transfer the SUMO domain to a lysine on the target protein (Wimmer et al., 2012





). Studies with Ebola VP35 found that it was able to block CpG-induced interferon induction involving the IRF-3/7 pathway. Subsequent investigation revealed that PIAS1 is able to SUMOylate IRF-7. VP35 expression enhanced SUMOylation of IRF-7, leading to suppression of its activity and a decrease in interferon promoter activity. Similar findings were noted with IRF-3 following expression of VP35 (Chang et al., 2009





). Thus, VP35-induced SUMOylation of IRF-3 and IRF-7 leads to a further reduction in interferon α/β gene transcription.

Arenaviruses (e.g., Lassa, LCMV) have taken a similar multipronged approach to preventing type I interferon responses. Lassa hemorrhagic fever has many characteristics similar to Ebola virus disease, including the absence of interferon production and lymphoid depletion. On the molecular level, arenaviruses have been shown to suppress interferon production by targeting both upstream (i.e., RIG-I/MDA-5) and downstream signaling events (i.e., IKKε interactions, IRF-3 phosphorylation) (Koma et al., 2013





). In this way, each virus disrupts multiple access points in the pathways that lead to increased interferon production. Given the similarity in the clinical syndromes and the common approach to interferon antagonism, further investigations may provide insights into the underlying pathogenic mechanisms of hemorrhagic fever syndromes.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

VP35 เป็น cofactor ไวรัสพอลิเมอเรสที่ทำหน้าที่ในการสังเคราะห์อาร์เอ็นเอ และการนำเสนอการเชื่อมโยงที่ L กับ NP นอกจากบทบาทเหล่านี้ VP35 มีบทบาทโดดเด่นในการยับยั้งของอีโบลาของαและβอินเตอร์เฟียรอนผ่านกลไกหลายเสื้อผ้า-ฉันและ MDA-5 มี receptors การรู้จำรูปแบบข้อสอบที่ตรวจหาอาร์เอ็นเอ cytosolic ต่างประเทศ เสื้อผ้า-ผมรู้จัก 5′-triphosphates ของอาร์เอ็นเอทู่สิ้นสุด และ MDA-5 ความรู้สึกยาวนานคู่ควั่นอาร์เอ็นเอ (dsRNA) ทั้งสัญญาณผ่านอะแด็ป IPS-1 (หรือเวสท์วูด MAVS วีซ่า Cardif), เกิดขึ้นใน NF κB, IRF-3 และ IRF-7 เปิดใช้งานด้วยค่าต่อ ๆ มาของชนิดฉันอินเตอร์ฟีรอนและ proinflammatory cytokines ที่ปลายน้ำ เปิดใช้งานของ IRF-3/7 เป็นผลลัพธ์ของการเรียงซ้อนสัญญาณที่พวกเขาถูก phosphorylated โดยผูกถัง kinase 1 (TBK-1) และ IκB kinase-ε (IKKε) (เมืองร้อยเอ็ด al., 2014). ทดลองก่อนกำหนดว่า VP35 ระหว่างสองวันที่อุปกรณ์-ฉันทางเดิน โดยป้องกัน phosphorylation IRF-3 (Basler et al., 2000, Basler et al., 2003). ภายหลัง VP35 ที่แสดงการโต้ตอบกับโดเมน kinase N-เทอร์มินัลของ IKKε ป้องกัน phosphorylation IRF-3 และทำหน้าที่เป็นนกต่อพื้นผิวสำหรับ IKKε /TBK-1 kinases นอกจากนี้ รวม VP35 เพื่อ IKKε ป้องกันการโต้ตอบกับโปรตีนอื่น ๆ IRF-7 และ IPS-1 (พรินส์ et al., 2009). ผลของการโต้ตอบเหล่านี้จะยับยั้งการเหนี่ยวนำของยีนกับก่อการตอบสนองของอินเตอร์เฟียรอนนอกจากเหตุการณ์เหล่านี้ปลายน้ำในอุปกรณ์-ฉันทางเดิน VP35 โต้ตอบกับ dsRNA เพื่อป้องกันอุปกรณ์-ฉันและการตอบสนอง MDA 5 (Cárdenas et al., 2006). ศึกษาโครงสร้าง และชีวเคมีเปิดเผยว่า VP35 ประกอบด้วยเทอร์มินัล C อินเตอร์ฟีรอนลิปกลอสไขโด (IID) กับกรดอะมิโนพื้นฐาน 2 กลุ่ม คลัสเตอร์หนึ่งศูนย์กลางตกค้าง R312 และผูกกับ dsRNA เข้าร่วม วิเคราะห์เพิ่มเติมเปิดเผยว่า VP35 binds กับ dsRNA ทู่สิ้นสุดในลักษณะคล้ายคลึงกับที่เห็น มีอุปกรณ์-ฉัน (Cárdenas et al., 2006เหลียง et al., 2009เหลียง et al., 2010a). ศึกษาโครงสร้างของผูก VP35 dsRNA สอดคล้องกับการค้นหาว่า VP35 ป้องกันไม่ให้อุปกรณ์ทั้งสอง-ผมและตอบสนอง MDA-5 สังเกตจากอาร์เอ็นเอที่ถูกผูกไว้ และ - ผูกโครงสร้างเปิดเผยว่า VP35 สามารถผูกทั้งฟอสเฟตแกนหลักของ dsRNA และอาร์เอ็นเอจบปรบมือใน VP35 dimers กลายพันธุ์ของการมุ่งเน้นปรับปรุงพื้นฐานใน R312 abrogate dsRNA รวม และวิเคราะห์โครงสร้างแนะนำว่า การกลายพันธุ์ R312 รบกวน dimerization VP35 (Kimberlin et al., 2010). ทดลองใช้ไวรัส recombinant เพจ mutant VP35R312A พบอ่อน virulence และผลของการเจริญเติบโตของไวรัสและอินเตอร์เฟียรอน antagonism แนะนำที่ ผูก IID dsRNA และ VP35 dimerization เล่นบทบาทสำคัญในไวรัสวงจรชีวิตและพยาธิกำเนิด (Hartman et al., 2008a, Hartman et al., 2008b, Kimberlin และ al., 2010พรินส์ et al., 2010).เป็นเรื่องน่าสนใจ เปรียบเทียบของ VP35 IID อุบัติ Zaire ebolavirus และ Reston ebolavirus — ฉะนี้เท่าอุบัติในลิง — เปิดเผยลดลงเล็กน้อยในอินเตอร์ฟีรอน antagonism และผูก dsRNA โดย Reston อย่างไรก็ตาม เหล่านี้ลดลงไม่ปรากฏการ มีส่วนร่วมอย่างมีนัยสำคัญแตกต่างใน virulence ระหว่าง Zaire และ Reston ไวรัส (เหลียง et al., 2010b). นอกจากนี้ การเปรียบเทียบโครงสร้างของ Zaire Reston VP35 ไม่เปิดเผยความแตกต่างที่พบระหว่างกลไกการรับรู้ของ dsRNA (Kimberlin et al., 2010). กัน ข้อมูลเหล่านี้แนะนำปัจจัยที่ไวรัสเพิ่มเติมน่าจะมีบทบาทในการตอบสนองของโฮสต์ที่แตกต่างระหว่างไวรัสเหล่านี้สองล่าสุด VP35 พบเพื่อโต้ตอบกับ activator PKR (สนธิสัญญา) (Fabozzi et al., 2011). นอกจากมีกิจกรรมในอาร์เอ็นเอ silencing และเปิดใช้งานของ PKR สนธิสัญญา binds ไป และเรียกใช้อุปกรณ์-ฉัน งานต่อมาพบว่า VP35 ผูกกับสนธิสัญญาทำให้สนธิสัญญาผูกกับอุปกรณ์-ฉัน และยับยั้งอุปกรณ์-ฉันเปิดใช้งาน (Luthra et al., 2013). ผูก VP35 ให้สนธิสัญญาเป็น mediated โดยปรับปรุงพื้นฐานกลางเดียวใน IID ที่ abrogates ผูก dsRNA ที่อธิบายไว้ข้างต้น แนะนำบทบาทสุดสำหรับ dsRNA ในโต้ตอบนี้ จู่ ๆ สนธิสัญญาการโต้ตอบกับ VP35 ยับยั้งการรวม VP35 ด้วย L ก่อให้เกิดประสิทธิภาพที่ลดลงของไวรัสอาร์เอ็นเอสังเคราะห์และจีโนมจำลอง phenotype ของ "ร่วมกัน antagonism" (Luthra et al., 2013). ดำเนินการกับข้อมูลก่อนหน้านี้ ทดลองเหล่านี้ชี้ไปที่ความสำคัญ VP35 antagonism ของเสื้อผ้าสำคัญ-ฉันทางเดินระหว่าง ebolavirus ติดเชื้อโต้ตอบ VP35 เพิ่มเติมกับโปรตีนเซลมีการอุดมใช้ระบบไฮบริด 2 ยีสต์ การศึกษานี้พบว่า VP35 โต้ตอบกับ IRF-7, Ubc9 และ PIAS1 (ช้างร้อยเอ็ด al., 2009). Ubc9 และ PIAS1 เป็นส่วนประกอบสำคัญของระบบเล็กเกี่ยวข้อง ubiquitin ปรับเปลี่ยน (ซูโม่) การปรับเปลี่ยน posttranslational ซึ่งกำหนดหลักโทรศัพท์มือถือและโปรตีน ระหว่าง SUMOylation ซูโม่โปรตีนจะทำงาน โดยเฉพาะซูโม่ proteases และโอนย้ายไป E2 ซูโม่ conjugating เอนไซม์ (เช่น Ubc9) ถัดไป ใช้ ligase เป็น E3 เช่น PIAS1 โอนย้ายโดเมนซูโม่จะเป็นไลซีนในโปรตีนเป้าหมาย (Wimmer et al., 2012). ศึกษากับอีโบลา VP35 พบว่า มันสามารถบล็อกอินเตอร์ฟีรอนประเภทวัสดุสิ้นเปลืองทำให้เกิดการเหนี่ยวนำที่เกี่ยวข้องกับทางเดินของ IRF-3/7 ภายหลังสอบสวนเปิดเผยว่า PIAS1 สามารถ SUMOylate IRF-7 นิพจน์ VP35 เพิ่ม SUMOylation ของ IRF-7 นำไปสู่การปราบปรามกิจกรรมของและลดลงในกิจกรรมโปรโมเตอร์อินเตอร์เฟียรอน พบคล้ายถูกตั้งข้อสังเกตกับ IRF-3 ต่อของ VP35 (ช้างร้อยเอ็ด al., 2009). ดังนั้น VP35 เกิด SUMOylation ของ IRF-3 และ IRF 7 นำไปสู่ลดการ transcription ของยีนα/βอินเตอร์เฟียรอนArenaviruses (เช่น Lassa, LCMV) มีดำเนินการคล้ายวิธี multipronged เพื่อป้องกันพิมพ์อินเตอร์ฟีรอนตอบผม Lassa โรคไข้เลือดออกมีหลายลักษณะที่คล้ายกับโรคไวรัสอีโบลา รวมทั้งการขาดงานของอินเตอร์เฟียรอนผลิตและการลดลงของ lymphoid ในระดับโมเลกุล arenaviruses ได้รับการแสดงเพื่อระงับอินเตอร์เฟียรอนผลิต โดยการกำหนดเป้าหมายทั้งต้นน้ำ (เช่น อุปกรณ์-I/MDA-5) และน้ำตามปกติเหตุการณ์ (เช่น IKKε โต้ phosphorylation IRF-3) (Koma et al., 2013). ด้วยวิธีนี้ แต่ละไวรัส disrupts เข้าถึงหลายจุดในทางเดินที่นำไปสู่การผลิตอินเตอร์ฟีรอนเพิ่มขึ้น ให้คล้ายในแสงศตวรรษทางคลินิกและแนวทางทั่วไปอินเตอร์ฟีรอน antagonism เพิ่มเติมตรวจสอบอาจให้ลึกอุบัติกลไกพื้นฐานของโรคไข้เลือดออกแสงศตวรรษ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

VP35 เป็นปัจจัยโพลิเมอร์ไวรัสที่ทำหน้าที่ในการสังเคราะห์ RNA และได้รับการเสนอที่จะเชื่อมโยง L เพื่อ NP นอกเหนือจากบทบาทเหล่านี้ VP35 มีบทบาทที่โดดเด่นในการยับยั้ง Ebola ของαและβเหนี่ยวนำ interferon ผ่านกลไกหลาย. RIG-I และภาคตะวันออกเฉียงเหนือ-5 มีรูปแบบการรับรู้โดยธรรมชาติผู้รับที่ตรวจพบ RNA cytosolic ต่างประเทศ RIG-I ตระหนัก 5'-triphosphates ของอาร์เอ็นเอทื่อปลายและภาคตะวันออกเฉียงเหนือ-5 ความรู้สึกของอาร์เอ็นเอเกลียวคู่ยาว (dsRNA) สัญญาณผ่านอะแดปเตอร์ปลายน้ำทั้งสอง IPS-1 (aka Mavs, วีซ่า, คาร์ดิฟ) มีผลใน NF-κB, IRF-3 และยืนยันการใช้งาน IRF-7 ที่มีการแสดงออกที่ตามมาของชนิดที่ interferon และ proinflammatory cytokines ที่ กระตุ้นการทำงานของ IRF-07/03 เป็นผลมาจากน้ำตกสัญญาณผ่านที่พวกเขาจะ phosphorylated โดยไคเนสถังผูกพัน 1 (TBK-1) และIκBไคเนส-ε (IKKε) (เชียงใหม่ et al., 2014 ) การทดลองในช่วงต้นระบุว่า VP35 หยุดชะงักทางเดิน RIG-I โดยการป้องกัน IRF-3 phosphorylation (Basler et al., 2000 , Basler et al., 2003 ) ต่อมา VP35 ก็แสดงให้เห็นในการโต้ตอบกับโดเมนไคเนส N-ขั้วIKKεในการป้องกัน phosphorylation IRF-3 และทำหน้าที่เป็นสารตั้งต้นสำหรับล่อIKKε / TBK-1 ไคเนสส์ นอกจากนี้ยังมีผลผูกพันของ VP35 เพื่อIKKεป้องกันไม่ให้มีปฏิสัมพันธ์กับโปรตีนอื่น ๆ รวมทั้ง IRF-7 และ IPS-1 (Prins et al., 2009 ) ผลสุทธิของการมีปฏิสัมพันธ์เหล่านี้คือการยับยั้งการเหนี่ยวนำของยีนที่มีการตอบสนองต่อการก่อการ interferon. นอกจากนี้เหตุการณ์ที่เกิดขึ้นล่องในทางเดิน RIG-I, VP35 โต้ตอบกับ dsRNA เพื่อป้องกันไม่ให้ RIG-I และการตอบสนอง MDA-5 (Cárdenasและคณะ 2006 ) การศึกษาโครงสร้างและชีวเคมีเปิดเผยว่า VP35 มีโดเมน C ขั้ว interferon ยับยั้ง (IID) มีสองกลุ่มของกรดอะมิโนขั้นพื้นฐาน หนึ่งศูนย์คลัสเตอร์บนตกค้าง R312 และมีส่วนร่วมในการผูกกับ dsRNA การวิเคราะห์เพิ่มเติมเปิดเผยว่า VP35 ผูกกับทื่อสิ้นสุดวันที่ dsRNA ในลักษณะที่คล้ายกันมากกับที่เห็นด้วย RIG-I (Cárdenas et al., 2006 , เหลียง et al., 2009 , เหลียง et al., 2010a ) การศึกษาโครงสร้างของ VP35 dsRNA ผูกพันมีความสอดคล้องกับผลการศึกษาพบว่า VP35 ป้องกันไม่ให้ทั้งสอง RIG-I และการตอบสนอง MDA-5 สังเกตจาก RNA-ผูกพันและโครงสร้าง -unbound เปิดเผยว่า VP35 สามารถที่จะผูกทั้งกระดูกสันหลังของฟอสเฟต dsRNA และ RNA ปลายปกคลุมใน dimers VP35 การกลายพันธุ์ของตรงกลางแพทช์พื้นฐานเกี่ยวกับ R312 ยกเลิก dsRNA ผูกพันและการวิเคราะห์โครงสร้างแสดงให้เห็นว่าการกลายพันธุ์ R312 รบกวน VP35 dimerization (Kimberlin et al., 2010 ) การทดลองโดยใช้ไวรัส recombinant ผสมผสานกลายพันธุ์ VP35R312A แสดงให้เห็นว่าการลดทอนความรุนแรงของโรคและการด้อยค่าของทั้งสองการเจริญเติบโตของเชื้อไวรัสและการเป็นปรปักษ์กัน interferon บอกว่า IID ผูกพันกับ dsRNA และ VP35 dimerization มีบทบาทสำคัญในการป้องกันไวรัสวงจรชีวิตและการเกิดโรค (ฮาร์ทแมน et al., 2008a , ฮาร์ทแมนและ al., 2008b , Kimberlin et al., 2010 , Prins et al., 2010 ). ที่น่าสนใจ, การเปรียบเทียบของ VP35 IID จาก Ebolavirus ที่ทำให้เกิดโรคซาอีร์และเรสตัน Ebolavirus-ป่านนี้เท่านั้นที่ทำให้เกิดโรคในลิงเปิดเผยลดลงเล็กน้อยในการเป็นปรปักษ์กัน interferon และ dsRNA ผูกพันโดยเรสตัน อย่างไรก็ตามการลดลงเหล่านี้ไม่ปรากฏว่ามีส่วนสำคัญต่อความแตกต่างในความรุนแรงระหว่างไวรัสซาอีร์และเรสตัน (เหลียง et al., 2010b ) นอกจากนี้การเปรียบเทียบโครงสร้างของซาอีร์และเรสตัน VP35 ไม่ได้เปิดเผยความแตกต่างที่สำคัญระหว่าง dsRNA กลไกการรับรู้ (Kimberlin et al., 2010 ) ร่วมกันข้อมูลเหล่านี้ชี้ให้เห็นปัจจัยไวรัสเพิ่มเติมน่าจะมีบทบาทสำคัญในการตอบสนองของโฮสต์ที่แตกต่างกันระหว่างทั้งสองไวรัส. เมื่อเร็ว ๆ นี้ VP35 ถูกพบในการโต้ตอบกับกระตุ้น PKR (PACT) (Fabozzi et al., 2011 ) นอกจากจะมีกิจกรรมในสมรอาร์เอ็นเอและยืนยันการใช้งาน PKR, PACT กระหม่อมและเปิดใช้งาน RIG-I การทำงานที่เกิดขึ้นภายหลังพบว่า VP35 ผูกพันกับ PACT ป้องกันไม่ให้ PACT ผูกพันกับ RIG-I และยับยั้งการยืนยันการใช้งาน RIG-I (Luthra et al., 2013 ) VP35 ผูกพันกับ PACT เป็นผู้ไกล่เกลี่ยโดยเดียวกันแพทช์พื้นฐานสำคัญในการ IID ที่ abrogates dsRNA ผูกพันอธิบายไว้ข้างต้นชี้ให้เห็นบทบาทที่เป็นไปได้ในการมีปฏิสัมพันธ์ dsRNA นี้ น่าแปลกที่การมีปฏิสัมพันธ์กับ PACT VP35 ยับยั้งผูกพันของ VP35 กับ L ทำให้ประสิทธิภาพลดลงของการสังเคราะห์ RNA ของไวรัสและการจำลองแบบจีโนมฟีโนไทป์ของ "การเป็นปรปักษ์กันซึ่งกันและกัน" (Luthra et al., 2013 ) ที่ร่วมกันกับข้อมูลก่อนหน้านี้การทดลองนี้ชี้ไปที่ความสำคัญของการเป็นปรปักษ์กัน VP35 ของทางเดิน RIG-I ระหว่างการติดเชื้อ Ebolavirus. ปฏิสัมพันธ์ VP35 เพิ่มเติมกับโปรตีนของเซลล์ได้รับการสำรวจโดยใช้ยีสต์สองระบบไฮบริด การศึกษาเหล่านี้พบว่ามีปฏิสัมพันธ์กับ VP35 IRF-7, Ubc9 และ PIAS1 (ช้าง et al., 2009 ) Ubc9 PIAS1 และเป็นองค์ประกอบสำคัญของการปรับปรุง ubiquitin ที่เกี่ยวข้องกับขนาดเล็ก (ซูโม่) ระบบการดัดแปลงหลังที่ควบคุมความหลากหลายของทางเดินของเซลล์และโปรตีน ในช่วง SUMOylation โปรตีน SUMO จะเปิดใช้งานโดยโปรตีเอส SUMO ที่เฉพาะเจาะจงและจะถูกโอนไปเอนไซม์ SUMO-conjugating E2 (เช่น Ubc9) ถัดไป ligase E3 เช่น PIAS1 ถูกนำมาใช้ในการถ่ายโอนโดเมน SUMO เพื่อไลซีนโปรตีนเป้าหมาย (Wimmer et al., 2012 ) การศึกษากับอีโบลา VP35 พบว่ามันก็สามารถที่จะปิดกั้นการเหนี่ยวนำ interferon CpG ที่เกิดขึ้นเกี่ยวข้องกับ IRF-07/03 เดิน ภายหลังการสอบสวนเปิดเผยว่า PIAS1 สามารถ SUMOylate IRF-7 การแสดงออก VP35 เพิ่ม SUMOylation ของ IRF-7 ที่นำไปสู่การปราบปรามของกิจกรรมและการลดลงของกิจกรรมการก่อการ interferon การค้นพบที่คล้ายกันถูกตั้งข้อสังเกตกับ IRF-3 ต่อไปนี้การแสดงออกของ VP35 (ช้าง et al., 2009 ) ดังนั้น SUMOylation VP35 เหนี่ยวนำของ IRF-3 และ IRF-7 นำไปสู่การลดลงต่อไปใน interferon α / βยีนถอดความ. Arenaviruses (เช่น Lassa, LCMV) ได้นำวิธีการ multipronged คล้ายกับการป้องกันชนิดที่ interferon การตอบสนอง โรคไข้เลือดออก Lassa มีหลายลักษณะคล้ายกับโรคไวรัสอีโบลารวมถึงกรณีที่ไม่มีการผลิต interferon และการสูญเสียต่อมน้ำเหลือง ในระดับโมเลกุล arenaviruses ได้รับการแสดงที่จะระงับการผลิต interferon โดยการกำหนดเป้าหมายทั้งต้นน้ำ (เช่น RIG-I / MDA-5) และกิจกรรมการส่งสัญญาณปลายน้ำ (เช่นปฏิสัมพันธ์IKKε, IRF-3 phosphorylation) (Koma et al., 2013 ) ด้วยวิธีนี้แต่ละไวรัสรบกวนจุดเชื่อมต่อหลายคนในทางเดินที่นำไปสู่การเพิ่มกำลังการผลิต interferon ที่ได้รับความคล้ายคลึงกันในกลุ่มอาการทางคลินิกและแนวทางร่วมกันในการเป็นปรปักษ์กัน interferon, สืบสวนต่อไปอาจจะให้ข้อมูลเชิงลึกในกลไกที่ทำให้เกิดโรคพื้นฐานของโรคไข้เลือดออก

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

vp35 เป็นโคแฟกเตอร์ที่ไวรัสใช้ฟังก์ชันในการสังเคราะห์ RNA และมีการนำเสนอการเชื่อมโยงผมกับ NP นอกเหนือไปจากบทบาทเหล่านี้ vp35 มีบทบาทโดดเด่นในวัตถุมงคลของการยับยั้งและการαรอนบีตา ผ่านกลไกต่างๆ และเป็นแหล่ง mda-5

rig-i รูปแบบตัวรับที่ตรวจพบในต่างประเทศ cytosolic RNA rig-i จำ 5 ’ - ไตรฟ เฟตของ RNA ทื่อสิ้นสุด ,mda-5 ประสาทสัมผัสและควั่น RNA ( dsRNA ยาวคู่ ) ทั้งสัญญาณผ่านอะแดปเตอร์ ips-1 ปลายน้ำ ( a.k.a . mavs , วีซ่า , Cardiff ) ที่เกิดใน NF - κ B , irf-3 และ irf-7 กระตุ้นการแสดงออกที่ตามมาของประเภทและชนิด proinflammatory รอน .การ irf-3 / 7 คือผลของสัญญาณน้ำตกผ่านที่พวกเขาจะฟอสฟอรีเลเตตโดยถังผูกไคเนส 1 ( tbk-1 ) และผมκ B ไคเนส - ε ( ikk ε ) ( เชียงใหม่ ) et al . , 2014





) ในการทดลองกำหนดให้ vp35 หยุดชะงักทาง rig-i โดยการป้องกัน irf-3 ฟอสโฟริเลชัน ( Basler et al . , 2000





Basler , et al . , 2003





) ต่อมาvp35 แสดงโต้ตอบกับกรดอะมิโนพบว่าโดเมนของ ikk εในการป้องกัน irf-3 ฟอสโฟริเลชันและเป็นนกต่อพื้นผิวสำหรับ ikk ε / tbk-1 ยา . นอกจากนี้ การจับ vp35 เพื่อ ikk εป้องกันการปฏิสัมพันธ์กับโปรตีนอื่น ๆรวมทั้ง irf-7 และ ips-1 ( พรินส์ et al . , 2009





)ผลของปฏิสัมพันธ์เหล่านี้คือการยับยั้งการตอบสนองกับโปรโมเตอร์ยีนอินเตอร์เฟียรอน

นอกจากกิจกรรมเหล่านี้ล่องในเส้นทาง rig-i vp35 , โต้ตอบกับ dsRNA เพื่อป้องกัน rig-i mda-5 และการตอบสนอง ( C . kgm rdenas et al . , 2006





)โครงสร้างและชีวเคมี พบว่ามีการยับยั้ง vp35 ซึ่งอินเตอร์โดเมน ( เปลือกให้เปิด ) กับสองกลุ่มของกรดอะมิโนพื้นฐาน หนึ่งในกลุ่มศูนย์ r312 กาก และมีส่วนร่วมในการจับกับ dsRNA . พบว่า vp35 ผูกกับทื่อสิ้นสุด dsRNA ในลักษณะคล้ายกับที่เห็น rig-i ( C . kgm rdenas et al . , 2006





เหลียง ,





et al . , 2009 ,Leung et al . , 2010a





) การศึกษาโครงสร้างของ vp35 dsRNA ผูกพันจะสอดคล้องกับการ vp35 rig-i mda-5 ป้องกันทั้งสองและการตอบสนอง สังเกตจาก RNA ถูกมัดและ - Unbound โครงสร้าง พบว่า vp35 สามารถผูกทั้งฟอสเฟตกระดูกสันหลังของ dsRNA และสิ้นสุดที่ปกคลุมใน vp35 RNA สาย . การกลายพันธุ์ขั้นพื้นฐานของแพทช์ตรงกลางใน r312 การทำฟาร์ม dsRNA ผูกและการวิเคราะห์โครงสร้าง ชี้ให้เห็นว่า r312 การกลายพันธุ์ ทำให้ vp35 สหชาต ( คิมเบอร์ลิน et al . , 2010





) ทดลองใช้ยีนไวรัสกลายพันธุ์ พบการผสมผสาน vp35r312a โรคทั้งไวรัสและการเติบโตและแก่เฒ่าอินเตอร์ ,แนะนำว่า เปลือกให้เปิดเครื่อง และ vp35 dsRNA สหชาต มีบทบาทในวงจรชีวิตและการตรวจหาไวรัส ( Hartman et al . , 2008a





ฮาร์ทแมน , et al . , 2008b





คิมเบอร์ลิน , et al . , 2010





พรินส์ , et al . , 2010





) .

น่าสนใจการเปรียบเทียบ vp35 เปลือกให้เปิดจากเชื้อโรค Zaire อีโบราไวรัสอีโบราไวรัสและเชื้อโรคในเรสตันจึงห่างไกลเพียงลิงพบลดลงเล็กน้อยในการต่อสู้และการทำลาย dsRNA โดย เรสตัน อย่างไรก็ตาม ลดลงเหล่านี้ไม่ได้ปรากฏแตกต่างกันไปในความรุนแรงและความแตกต่างระหว่างสาธารณรัฐซาเอียร์เรสตันไวรัส ( Leung et al . , 2010b





) นอกจากนี้การเปรียบเทียบโครงสร้างของซาอีร์ และเรสตัน vp35 ไม่แสดงความแตกต่างอย่างมากระหว่าง dsRNA กลไกการรับรู้ ( คิมเบอร์ลิน et al . , 2010





) กัน ข้อมูลเหล่านี้ชี้ให้เห็นปัจจัยไวรัสเพิ่มเติมอาจมีบทบาทในการตอบสนองที่แตกต่างระหว่างสองโฮสต์ไวรัส

เมื่อเร็วๆ นี้ vp35 พบเพื่อโต้ตอบกับ PKR activator ( สัญญา ) ( fabozzi et al . , 2011





) นอกจากมีกิจกรรมในการกระตุ้นยีน silencing PKR และ คำสัญญาที่ผูกกับ และกระตุ้น rig-i. ตามมาทำงาน พบว่า vp35 ผูกสัญญาป้องกันสนธิสัญญาผูกพันกับ rig-i และยับยั้งการกระตุ้น rig-i ( luthra et al . , 2013





) vp35 ผูกสัญญาเป็นคนกลาง โดยเดียวกันกลางพื้นฐานแพทช์ในเปลือกให้เปิดที่ abrogates dsRNA ผูกพันที่อธิบายไว้ข้างต้นแนะนำบทบาทที่เป็นไปได้สำหรับ dsRNA ในปฏิกิริยานี้ จู่ ๆ ข้อตกลง การปฏิสัมพันธ์กับ vp35 ยับยั้งการจับของ vp35 L , ก่อให้เกิดประสิทธิภาพการสังเคราะห์ RNA ไวรัสลดลงและการจีโนม , ฟีโนไทป์ของ " การต่อสู้ร่วมกัน " ( luthra et al . , 2013





) ถ่ายร่วมกับข้อมูลก่อนหน้านี้การทดลองเหล่านี้จุดสําคัญของการต่อสู้ของ vp35 ทางเดิน rig-i ในระหว่างการติดเชื้ออีโบราไวรัส

เพิ่มเติม vp35 ปฏิสัมพันธ์กับเซลล์โปรตีนได้สำรวจการใช้ยีสต์แบบสองระบบ การศึกษานี้พบว่า vp35 โต้ตอบกับ irf-7 ubc9 , และ pias1 ( ชาง et al . , 2009





)และ ubc9 pias1 เป็นส่วนประกอบสำคัญของเล็ก ๆข้างนอกที่เกี่ยวข้อง ( ซูโม่ ) ระบบของการปรับเปลี่ยน posttranslational ซึ่งควบคุมความหลากหลายของเส้นทางของเซลล์และโปรตีน ในช่วง sumoylation โปรตีนน้ำหนักโมเลกุลซูโม่จะเปิดใช้งานโดยเฉพาะ ซูโม่จะถูกโอนไป conjugating E2 ซูโม่เอนไซม์ ( เช่น ubc9 ) ถัดไป , E3 pias1 ไลเกส , เช่น ,ใช้ในการถ่ายโอนโดเมนซูโม่ lysine ในโปรตีนเป้าหมาย ( วิมเมอร์ et al . , 2012





) การศึกษากับอีโบล่า vp35 พบว่าสามารถป้องกันและนำ CPG รอนเกี่ยวข้องกับ irf-3 / 7 เส้นทาง การตรวจสอบภายหลังพบว่า pias1 สามารถ sumoylate irf-7 . การแสดงออกที่เพิ่มขึ้นของ irf-7 vp35 sumoylation ,นำไปสู่การปราบปรามกิจกรรมและลดลงในกิจกรรมส่งเสริมการขายอินเตอเฟอรอน . ข้อมูลคล้ายกันได้กล่าวกับ irf-3 ต่อการแสดงออกของ vp35 ( ชาง et al . , 2009





) ดังนั้น vp35 ชักนำ sumoylation ของ irf-3 irf-7 และนำไปสู่การลดรอนบีตาในα / ยีนถอดความ .

arenaviruses ( e.g . , เขื่อน ,lcmv ) ได้นำวิธีการ multipronged คล้ายกับการป้องกันชนิด รอนตอบ เขื่อน โรคไข้เลือดออกมีลักษณะคล้ายกันมากกับอีโบลาไวรัสโรค รวมทั้งการขาดการผลิตและการทำลายเม็ดเลือด . ในระดับโมเลกุล arenaviruses ได้รับการแสดงที่จะระงับการผลิต interferon โดยเป้าหมายทั้งต้น ( เช่นrig-i / mda-5 ) และด้านกิจกรรม ( เช่น การε ikk ปฏิสัมพันธ์ irf-3 ฟอสโฟริเลชัน ( Koma et al . , 2013





) วิธีนี้ แต่ละจุดการเข้าถึงหลายไวรัสรบกวนในทางเดินที่นำไปสู่การเพิ่มขึ้นของ interferon การผลิต ได้รับความเหมือนในกลุ่มอาการทางคลินิกและวิธีการทั่วไปในการต่อสู้น ,การตรวจสอบต่อไปอาจให้ข้อมูลเชิงลึกในต้นแบบกลไกของโรคไข้เลือดออกต่อไป