Maintaining and transferringstock a

Maintaining and transferring
stock and starter cultures
Stocks of monospecific (uni-algal) cultures can be obtained
by collecting local species, separating them by size
(filtration) or density (centrifugation), and inoculating agar
plates containing enrichment media. From these multi-species
algal cultures, individual colonies are selected through
agar streaks, micropipette isolation, liquid dilution, or flow
cytometer cell sorters (Fulks and Main, 1991). Culturing
algae in highly filtered, autoclaved, enriched seawater in
the presence of antibiotics allows bacteria- and protozoanfree
pure cultures (axenic) to be isolated. However, the
isolation and screening of local species is laborious and
mono-specific cultures of most microalgae species used for
aquaculture are readily available from research laboratories,
commercial hatcheries, and vendors.
Stock cultures are kept in specialized maintenance
media, which may be enriched seawater or nutrientenriched
agar plates or slants, under closely controlled
conditions of temperature and illumination. A special
temperature-controlled area or room adjacent to the algal
culture room is usually allocated for this purpose.
Stock cultures serve as inocula for the large-volume
production of phytoplankton used for harvest or feeding.
Stock cultures containing sterile, autoclaved media
are kept in small, transparent, autoclavable containers
such as 25-mL test tubes or 250- to 500-mL borosilicate
glass, flat-bottomed, conical flasks fitted with cotton wool
plugs at the necks (or polyethylene beakers can serve as
caps). They also are maintained in seawater agar medium
impregnated with suitable nutrients in petri dishes or on
slants in test tubes. Every effort should be made not to
contaminate the stock and starter cultures with competing
microorganisms. To minimize potential contamination,
an enclosed culture transfer hood outfitted with a
Bunsen burner and UV lights should be used (a laminarflow
hood is preferred if available) (Fig. 4).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

รักษาและการโอนย้ายวัฒนธรรมสต็อกและสตาร์ทเตอร์สามารถได้รับหุ้นของวัฒนธรรม (uni-สาหร่าย) monospecificโดยการรวบรวมสายพันธุ์ท้องถิ่น แบ่งแยกตามขนาด(การก) หรือความหนาแน่น (หมุนเหวี่ยง), และวุ้น inoculatingแผ่นที่ประกอบด้วยสื่อเพิ่มคุณค่า จากสายพันธุ์เหล่านี้หลายวัฒนธรรมสาหร่าย เลือกละอาณานิคมผ่านวุ้นเส้น แยก micropipette เจือจางของเหลว หรือไหลcytometer เซลล์ sorters (Fulks และหลัก 1991) นำไปเลี้ยงสาหร่ายในน้ำทะเลกรองสูง นึ่ง อุดมในการปรากฏตัวของยาปฏิชีวนะทำให้แบคทีเรียและ protozoanfreeบริสุทธิ์ (axenic) จะแยกวัฒนธรรม อย่างไรก็ตาม การการแยกและคัดเลือกเฉพาะพันธุ์ลำบาก และวัฒนธรรมเฉพาะโมโนสาหร่ายทุกชนิดที่ใช้สำหรับเพาะเลี้ยงสัตว์น้ำได้จากห้องปฏิบัติการวิจัยhatcheries ค้า และผู้จัดจำหน่ายวัฒนธรรมสินค้าจะถูกเก็บไว้ในการบำรุงรักษาเฉพาะสื่อ ซึ่งอาจเป็นน้ำทะเลที่อุดมด้วยหรือ nutrientenrichedแผ่นวุ้น หรือ เอียง ต่ำกว่าอย่างใกล้ชิดที่ควบคุมเงื่อนไขของอุณหภูมิและแสงสว่าง พิเศษตั้งควบคุมอุณหภูมิหรือห้องติดกับสาหร่ายห้องวัฒนธรรมมักจะถูกจัดสรรสำหรับวัตถุประสงค์นี้สินค้าวัฒนธรรมทำหน้าที่เป็น inocula สำหรับการไดรฟ์ข้อมูลขนาดใหญ่การผลิตของแพลงก์ตอนพืชที่ใช้สำหรับการเก็บเกี่ยวหรือให้อาหารสินค้าวัฒนธรรมผ่านการฆ่าเชื้อ ผลิตสื่อเก็บในภาชนะบรรจุขนาดเล็ก ใส autoclavableเช่นหลอดทดสอบ 25 มิลลิลิตรหรือ borosilicate 250 ถึง 500 มล.แก้ว ชีวา กรวยขวดด้วยสำลีปลั๊กที่ไซน์ (หรือบีกเกอร์พลาสติกสามารถทำหน้าที่เป็นตัวพิมพ์ใหญ่) พวกเขายังจะรักษาวุ้นในน้ำทะเลชุบ ด้วยสารอาหารที่เหมาะ ในการเพาะอาหารslants ในหลอดทดลอง ควรจะทำทุกวิถีทางไม่ให้ปนเปื้อนวัฒนธรรมสต็อกและเริ่มต้น ด้วยการแข่งขันจุลินทรีย์ เพื่อลดการปนฮูดโอนล้อมวัฒนธรรมติดกับบุนเซนเตาและ UV ไฟควรจะใช้ (ใน laminarflowเครื่องดูดควันเป็นที่ต้องการถ้ามี) (4 รูป)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การรักษาและการโอน
หุ้นและวัฒนธรรม Starter
หุ้นของ monospecific (Uni-สาหร่าย) วัฒนธรรมที่สามารถรับได้
โดยการเก็บรวบรวมสายพันธุ์ท้องถิ่นแยกพวกเขาตามขนาด
(กรอง) หรือความหนาแน่น (หมุนเหวี่ยง) และการฉีดวัคซีนวุ้น
แผ่นที่มีสื่อการเพิ่มปริมาณ จากหลายสายพันธุ์เหล่านี้
วัฒนธรรมสาหร่ายบุคคลอาณานิคมได้รับการคัดเลือกผ่าน
ลายเส้นวุ้น micropipette แยกเจือจางของเหลวหรือไหล
cytometer เซลล์ sorters (Fulks และ Main, 1991) การเพาะเลี้ยง
สาหร่ายในการกรองสูงมวลน้ำทะเลที่อุดมด้วย
การปรากฏตัวของยาปฏิชีวนะช่วยให้ bacteria- และ protozoanfree
เชื้อบริสุทธิ์ (axenic) ที่จะแยก อย่างไรก็ตาม
การแยกและการคัดกรองของสายพันธุ์ท้องถิ่นลำบากและ
โมโนเฉพาะวัฒนธรรมของสายพันธุ์สาหร่ายที่ใช้สำหรับการ
เพาะเลี้ยงสัตว์น้ำที่มีอยู่ได้อย่างง่ายดายจากห้องปฏิบัติการวิจัย,
โรงเพาะฟักและผู้ขาย.
วัฒนธรรมแจ้งจะถูกเก็บไว้ในการบำรุงรักษาเฉพาะ
สื่อซึ่งอาจจะอุดมน้ำทะเล หรือ nutrientenriched
แผ่นวุ้นหรือ slants ภายใต้การควบคุมอย่างใกล้ชิด
เงื่อนไขของอุณหภูมิและไฟส่องสว่าง พิเศษ
พื้นที่ควบคุมอุณหภูมิหรือห้องพักที่อยู่ติดกับสาหร่าย
ห้องวัฒนธรรมมักจะถูกจัดสรรเพื่อการนี้.
วัฒนธรรมการแจ้งทำหน้าที่เป็น inocula สำหรับปริมาณมาก
การผลิตของแพลงก์ตอนพืชที่ใช้สำหรับการเก็บเกี่ยวหรือการให้อาหาร.
วัฒนธรรม Stock ที่มีการฆ่าเชื้อสื่อมวล
จะถูกเก็บไว้ใน ขนาดเล็กโปร่งใสภาชนะหม้อนึ่งฆ่าเชื้อ
เช่นหลอดทดสอบ 25 มิลลิลิตรหรือ 250 ถึง 500 มิลลิลิตร borosilicate
แก้วแบนก้นขวดรูปกรวยพอดีกับสำลี
อุดที่คอ (หรือบีกเกอร์เอทิลินสามารถทำหน้าที่เป็น
ตัวพิมพ์ใหญ่) พวกเขายังคงอยู่ในน้ำทะเลปานกลางวุ้น
ชุบด้วยสารอาหารที่เหมาะสมในอาหารเลี้ยงเชื้อหรือบน
slants ในหลอดทดลอง พยายามทุกวิถีทางที่ควรจะทำไม่ให้
ปนเปื้อนหุ้นและ Starter วัฒนธรรมกับการแข่งขัน
จุลินทรีย์ เพื่อลดการปนเปื้อนที่อาจเกิดขึ้น
ล้อมรอบเครื่องดูดควันถ่ายโอนวัฒนธรรมแต่งตัวด้วย
เตาและรังสียูวีแผดเผาไฟควรใช้ (ก laminarflow
เครื่องดูดควันเป็นที่ต้องการถ้ามี) (รูปที่. 4)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การรักษาและการโอนหุ้นและเริ่มต้นวัฒนธรรมหุ้นของ monospecific ( UNI สาหร่าย ) วัฒนธรรมที่สามารถได้รับโดยการเก็บรวบรวมสายพันธุ์ท้องถิ่น แบ่งตามขนาด( การกรอง ) หรือความหนาแน่น ( ปั่น ) และณต่างๆจานที่มีการสื่อ จากเหล่านี้ชนิดมัลติวัฒนธรรมของสาหร่าย อาณานิคมบุคคล เลือก ผ่านวุ้นสาย ไมโครปิเปตต์แยก , การไหลของของเหลวหรือใช้โมโนเซลล์ ( fulks sorters และหลัก , 1991 ) การเพาะเลี้ยงสาหร่ายในสูงกรองสังเคราะห์ อุดมสมบูรณ์ น้ำทะเลในการปรากฏตัวของยาปฏิชีวนะให้แบคทีเรีย - และ protozoanfreeวัฒนธรรมที่บริสุทธิ์ ( axenic ) ที่จะแยก อย่างไรก็ตามการแยกและคัดเลือกสายพันธุ์ท้องถิ่นลำบาก และโมโนเฉพาะวัฒนธรรมของสาหร่ายชนิดที่ใช้มากที่สุดเพาะเลี้ยงสัตว์น้ำจะพร้อมใช้งานจากห้องปฏิบัติการวิจัยโรงเพาะฟัก , พาณิชย์ และผู้ขายหุ้นวัฒนธรรมจะถูกเก็บไว้ในการบํารุงรักษาเฉพาะสื่อซึ่งอาจจะอุดม nutrientenriched น้ำทะเลหรือแผ่นวุ้น หรือ slants ภายใต้ควบคุมอย่างใกล้ชิดเงื่อนไขของอุณหภูมิและไฟส่องสว่าง พิเศษควบคุมอุณหภูมิในพื้นที่หรือห้องติดกับสาหร่ายห้องวัฒนธรรมมักจะจัดสรรเพื่อวัตถุประสงค์นี้สินค้าวัฒนธรรมเป็น inocula สำหรับปริมาณขนาดใหญ่การผลิตของแพลงก์ตอนพืชที่ใช้สำหรับการเก็บเกี่ยว หรือให้อาหารหุ้นวัฒนธรรมที่มีลักษณะสื่อสังเคราะห์จะถูกเก็บไว้ในภาชนะขนาดเล็ก , โปร่งใส , Autoclavableเช่น 25 ml หลอดทดลองหรือ 250 - borosilicate 500 มล.แก้วแบน bottomed รูปกรวย flasks , เข็มขัดผ้าฝ้ายผ้าขนสัตว์ปลั๊กในคอ ( หรือบีกเกอร์พลาสติก สามารถใช้เป็นหมวก ) พวกเขายังมีการรักษาในวุ้นน้ำทะเลปานกลางชุบที่เหมาะสมสารอาหารในจานเลี้ยงเชื้อ หรือslants ในหลอดทดสอบ ทุกความพยายามที่ควรจะทำไม่การปนเปื้อนและหุ้นเริ่มต้นวัฒนธรรมกับการแข่งขันจุลินทรีย์ เพื่อลดการปนเปื้อนที่อาจเกิดขึ้นแนบการ outfitted กับวัฒนธรรม เครื่องดูดควันเตาบุนเซนและควรใช้ไฟ UV ( ลามินาร์โฟลด์เครื่องดูดควันดีกว่าถ้ามี ) ( รูปที่ 4 )