The isolated PBMC (3 × 106/ml) were

The isolated PBMC (3 × 106/ml) were seeded in a 24-well flat bottom microplate and incubated with various concentrations (200–800 μg/ml) of selected fractions for 72 h. The cells were resuspended with cold PBS and were blocked with 1% bovine serum albumin in PBS for 5 min at room temperature. Then the cells were incubated with fluorescein isothiocyanate (FITC)-conjugated mouse anti-human CD4 and CD14, phycoerythrin-conjugated CD8, mouse IgG1 isotype for 30 min at 4 °C in the dark. After washing with PBS supplemented with 1% bovine serum albumin and 0.05% sodium azide, the cells were subjected to flow analysis. Expressions of CD4, CD8 and CD14 on 20,000 viable cells were then gated and analyzed by flow cytometry (Becton Dickinson FACSCanto II, USA).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การแยก PBMC (3 × 106/มิลลิลิตร) ใน microplate มีด้านล่างแบน 24 ดี และรับการ (200 – 800 μ/มิลลิลิตร) ความเข้มข้นต่าง ๆ ของประโยคเลือกสำหรับ 72 h กก เซลล์ถูก resuspended กับ PBS เย็น และได้ถูกบล็อก ด้วย 1% ที่วัว serum albumin ใน PBS 5 นาทีที่อุณหภูมิห้อง แล้วเซลล์ได้รับการกกกับ fluorescein isothiocyanate (FITC) -ผันเมาส์ต่อต้านมนุษย์ CD4 และ CD14 ผัน phycoerythrin เซลล์ CD8 เมาส์ IgG1 isotype 30 นาทีที่อุณหภูมิ 4 ° C ในมืด หลังจากล้าง ด้วย PBS เสริม ด้วย 1% วัว serum albumin และ 0.05% โซเดียม azide เซลล์ถูกแยกวิเคราะห์การไหล นิพจน์ของ CD4 เซลล์ CD8 และ CD14 บนเซลล์ทำงานได้ 20,000 แล้ว gated และวิเคราะห์ โดยการตรวจวิเคราะห์เซลล์ไหล (Becton สัน FACSCanto II สหรัฐอเมริกา)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ที่แยก PBMC (3 × 106 / ml) เมล็ดใน microplate ด้านล่างแบน 24 หลุมและบ่มด้วยความเข้มข้นต่างๆ (200-800 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร) เศษส่วนเลือกสำหรับ 72 ชั่วโมง เซลล์ที่ถูก resuspended กับพีบีเอสที่หนาวเย็นและถูกปิดกั้นด้วย 1% อัลบูมิวัวซีรั่มในพีบีเอสเป็นเวลา 5 นาทีที่อุณหภูมิห้อง จากนั้นเซลล์ที่ถูกบ่มกับ fluorescein isothiocyanate (FITC) เมาส์ -conjugated ต่อต้านมนุษย์ CD4 และ CD14, phycoerythrin-ผัน CD8 เมาส์ isotype IgG1 เป็นเวลา 30 นาทีที่ 4 ° C ในที่มืด หลังจากล้างด้วยพีบีเอสเสริมด้วย 1% โปรตีนชนิดหนึ่งในซีรั่มวัวและโซเดียม azide 0.05% เซลล์ถูกยัดเยียดให้การวิเคราะห์การไหล การแสดงออกของ CD4, CD8 และ CD14 ใน 20,000 เซลล์ที่มีชีวิตถูกรั้วรอบขอบชิดแล้วและวิเคราะห์โดย cytometry ไหล (Becton Dickinson FACSCanto II, สหรัฐอเมริกา)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

แยก 2 ( 3 × 106 / มิลลิลิตรเมล็ดใน 24 ดีด้านล่างแบนพื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทยโดยมีความเข้มข้นต่างๆ ( 200 – 800 μ g / ml ) คัดเลือกเศษส่วนสำหรับ 72 ชั่วโมง เซลล์ก็ resuspended กับ PBS เย็นและถูกบล็อกด้วย 1% อัลบูมินใน PBS สำหรับ 5 นาทีที่อุณหภูมิห้อง แล้วเซลล์ก็แยกี่ไอโซไทโอไซยาเนต ( fitc ) - ผลิตภัณฑ์ป้องกันมนุษย์และเมาส์ cd14 CD4 , CD8 ( ไฟโคอิริทริท conjugated , เมาส์และ 30 นาทีที่ 4 ° C ในที่มืด หลังจากล้างด้วย pbs เสริม 1% อัลบูมินและ 0.05 % โซเดียมไซด์ เซลล์กลุ่มนี้ได้รับการไหลของข้อมูล การแสดงออกของ CD4 , CD8 และ cd14 บน 20 , 000 ได้เซลล์แล้วเซลล์ gated และวิเคราะห์โดยการไหล ( เบคตอนดิกคินสัน facscanto II , USA )