To construct the neighbor-joining tree, UGT sequences
from individual plant were obtained from GenBank and
aligned using ClustalX (Thompson et al., 1997). The tree
was constructed using the neighbor-joining method
(Saitou and Nei, 1987) using parsimony (PAUP* 4.0b10;
Swofford, 2002).
Total RNA was isolated from root, leaf, stem, and seed
of rice at 15 days after flowering using the Plant RNeasy
extraction kit (Qiagen, Germany). Residual genomic DNA
present in the preparation was eliminated by treating
with RNAse-free DNAse I (Boehringer Mannheim/Roche,
USA). cDNA was synthesized as described in Kim et al.
(2003). Primers that used were listed in Table 1. The PCR
was performed by incubating at 95 1C for 15 min to active
the hot start Taq DNA polymerase, followed by 30 cycles
of 1 min at 95 1C, 1 min at 60 1C, and 1 min at 72 1C.
เพื่อสร้างต้นไม้เพื่อนบ้านเข้าลำดับ UGT
จากแต่ละโรงงานที่ได้รับจาก GenBank และ
สอดคล้องใช้ ClustalX ( ธ อมป์สัน et al., 1997) ต้นไม้ที่
ถูกสร้างขึ้นโดยใช้วิธีเพื่อนบ้านเข้า
(Saitou และ Nei, 1987) โดยใช้ความตระหนี่ (PAUP * 4.0b10;
. Swofford, 2002)
รวม RNA ที่แยกได้จากรากใบลำต้นและเมล็ด
ข้าวที่ 15 วันหลังดอกบาน โดยใช้พืช RNeasy
ชุดสกัด (Qiagen, เยอรมนี) ที่เหลือ DNA ของยีน
ในปัจจุบันในการเตรียมการถูกกำจัดโดยการรักษา
ด้วย RNase ฟรี DNase ฉัน (Boehringer Mannheim / Roche,
USA) ยีนสังเคราะห์ที่อธิบายไว้ในคิม et al.
(2003) ไพรเมอร์ที่เคยมีการระบุไว้ในตารางที่ 1 PCR
ได้ดำเนินการโดยการบ่มที่ 95 1C นาน 15 นาทีในการใช้งาน
เริ่มต้นร้อน Taq DNA Polymerase ตามด้วย 30 รอบ
ที่ 1 นาทีที่ 95 1C, 1 นาทีที่ 60 1C และ 1 นาที ที่ 72 1C
การแปล กรุณารอสักครู่..