2.7. Antimicrobial activity determination and inhibition spectrum
The spot-on-lawn method (Fujita et al., 2007) was used to
determine the inhibitory spectrum of culture supernatant, whereas
the microplate assay method (Floriano, Ruiz-Barba, & Jimenez-
Diaz, 1998) was used to determine the antimicrobial activity of
purified antimicrobial agents. For the spot-on-lawn method, 10 ml
of each indicator culture (109 CFU/ml) was seeded in 10 ml soft agar
and was poured onto basal tryptose agar. Culture supernatants
(10 ml, each), which presumably contain antimicrobial agents, were
then spotted onto these indicator lawns. Inoculated plates were
incubated at 37 _C overnight to manifest any antimicrobial activity.
For antifungal test, Rhizopus arrhizuswas inoculated in the centre of
antibiotic-containing plate count agar (APCA; Table 1) and held at
25 _C for 48 h. Culture supernatant (10 ml) was spotted at the edge
of the fungal mycelium and the plate was held at 25 _C for one day
before the antifungal activity was observed. For microplate assay,
L. innocua was diluted to 106 CFU/ml and an aliquot of 100 ml was
dispensed into each well of the microplate. Purified antimicrobial
agents were then added into the wells to a final volume of 200 ml,
whereas distilled water was used as negative control. The microplate
was incubated at 37 _C for 8 h and cell density was recorded
by a spectrophotometric microplate reader (Vmax Kinetic Microplate
Reader, Molecular Devices Corp., Menlo Park, CA) at wavelength
of 600 nm. Fractions producing lower cell density, compared
to negative control, were considered inhibitory. The activity was
presented in arbitrary unit per millilitre (AU/ml) which is the
reciprocal of the highest dilution exhibiting antimicrobial activity corresponding to 1 ml of non-diluted supernatant.
2.7 ความมุ่งมั่นฤทธิ์ต้านจุลชีพและสเปกตรัมยับยั้งจุดบนสนามหญ้าวิธี (ฟูจิ et al., 2007) ถูกใช้ในการตรวจสอบคลื่นใสยับยั้งของวัฒนธรรมในขณะที่วิธีการทดสอบไมโคร(ที่ Floriano, รุยซ์-Barba และ Jimenez- Diaz, 1998 ) ถูกนำมาใช้เพื่อตรวจสอบฤทธิ์ต้านจุลชีพของยาต้านจุลชีพบริสุทธิ์ สำหรับวิธีการจุดบนสนามหญ้า 10 มล. ของวัฒนธรรมแต่ละตัวบ่งชี้ (109 CFU / ml) เป็นเมล็ดในอาหารเลี้ยงเชื้ออ่อน 10 มล. และถูกเทลงบนอาหารเลี้ยงเชื้อ tryptose ฐาน supernatants วัฒนธรรม(10 มล. แต่ละ) ซึ่งน่าจะมียาต้านจุลชีพได้เห็นแล้วบนสนามหญ้าตัวบ่งชี้เหล่านี้ แผ่น Inoculated ถูกบ่มที่ 37 _C ค้างคืนจะประจักษ์ฤทธิ์ต้านจุลชีพใด ๆ . สำหรับการทดสอบเชื้อรา Rhizopus arrhizuswas เชื้อในใจกลางของยาปฏิชีวนะที่มีแผ่นวุ้นนับ(APCA; ตารางที่ 1) และจัดขึ้นที่25 _C เป็นเวลา 48 ชั่วโมง วัฒนธรรมใส (10 มล.) เป็นด่างที่ขอบของเส้นใยเชื้อราและแผ่นถูกจัดขึ้นที่25 _C หนึ่งวันก่อนที่กิจกรรมต้านเชื้อราได้สังเกต สำหรับการทดสอบไมโคร, แอล innocua ถูกเจือจาง 106 CFU / ml และหาร 100 มล. เป็นการจ่ายในแต่ละดีmicroplate ยาต้านจุลชีพบริสุทธิ์ตัวแทนแล้วถูกเพิ่มเข้าไปในหลุมปริมาณสุดท้ายของ 200 มล, ในขณะที่น้ำกลั่นถูกนำมาใช้เป็นตัวควบคุมเชิงลบ microplate ถูกบ่มที่ 37 _C เป็นเวลา 8 ชั่วโมงและความหนาแน่นของเซลล์ได้รับการบันทึกโดยผู้อ่านmicroplate สเปก (Vmax Kinetic ไมโครReader, อุปกรณ์โมเลกุลคอร์ป Menlo Park, CA) ที่ความยาวคลื่น600 นาโนเมตร เศษส่วนความหนาแน่นของเซลล์ผลิตที่ต่ำกว่าเมื่อเทียบกับการควบคุมเชิงลบได้รับการพิจารณาในการยับยั้ง กิจกรรมที่ถูกนำเสนอโดยพลในหน่วยต่อมิลลิลิตร (AU / ml) ซึ่งเป็นซึ่งกันและกันของการลดสัดส่วนที่สูงที่สุดแสดงฤทธิ์ต้านจุลชีพที่สอดคล้องกับ1 มิลลิลิตรของสารละลายที่ไม่เจือจาง
การแปล กรุณารอสักครู่..

2.7 . กิจกรรมการยับยั้งการเกิดสเปกตรัม
จุดบนสนามหญ้าวิธี ( ฟูจิตะ et al . , 2007 ) ใช้ศึกษาสเปกตรัมอาหาร
นำวัฒนธรรม ส่วนพื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทยโดยวิธี ( floriano รุยซ์ , บาร์บา& Jimenez , -
Diaz , 1998 ) ถูกใช้เพื่อศึกษากิจกรรมการต้านจุลชีพของยาต้านจุลชีพ
บริสุทธิ์ . สำหรับจุดบนวิธีการที่สนามหญ้า , 10 ml
ของแต่ละตัวบ่งชี้วัฒนธรรม ( 109 CFU / ml ) คือเมล็ดใน 10 ml นุ่มวุ้น
และเทลงบนฐาน tryptose วุ้น วัฒนธรรม supernatants
( 10 ml แต่ละ ) ซึ่งสันนิษฐานว่าประกอบด้วยสารต่อต้านจุลชีพเป็นด่างบนสนามหญ้า
แล้วตัวบ่งชี้เหล่านี้ ที่ใส่แผ่นอยู่
บ่มที่ 37 _c ค้างคืนเพื่อแสดงฤทธิ์ต้านจุลชีพใด ๆ .
ทดสอบเชื้อราarrhizuswas เชื้อ Rhizopus ในศูนย์ของ
ยาปฏิชีวนะที่มี Planetmath reference ( apca ตารางที่ 1 ) และคณะ
25 _c 48 ชั่วโมง ( 10 ml ) วัฒนธรรมนำตัวที่ขอบ
ของเส้นใยของเชื้อราและจานที่จัดขึ้นที่ 25 _c หนึ่งวัน
ก่อนกิจกรรมการเจริญของเชื้อรา ) สำหรับพื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทยโดย
L innocua เจือจาง 106 cfu / ml และเป็นส่วนลงตัวของถูก
100 มล.จ่ายในแต่ละดีของพื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทย . บริสุทธิ์ต้าน
ตัวแทนแล้วเพิ่มลงในบ่อเป็นเล่มสุดท้ายของ 200 ml
ส่วนน้ำกลั่นที่ใช้ควบคุมลบ ในพื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทย
ถูกบ่มที่ 37 _c 8 H และความหนาแน่นเซลล์ถูกบันทึก
โดยพื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทย ( 4 ) อ่านถึงพื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทย
อ่านโมเลกุล , อุปกรณ์ Corp . , เมนโล พาร์ค ( CA ) ที่ความยาวคลื่น
600 นาโนเมตร ส่วนการผลิต ลดปริมาณความหนาแน่นเซลล์เทียบ
ควบคุมลบ ถูกพิจารณาว่า . กิจกรรมที่นำเสนอในหน่วยต่อมิลลิลิตร
พล ( AU / ml ) ซึ่งเป็นส่วนกลับของ dilution สูงสุด
จัดแสดงกิจกรรมที่สอดคล้องกับ 1 มิลลิลิตร ไม่เจือจาง นำยา
การแปล กรุณารอสักครู่..
