2.5. Measurement of total phenolics
The concentration of total phenolics in the extracts was
determined using the Folin–Ciocalteu colorimetric method described
by Negi and Jayaprakasha, with some modifications and
the results are expressed as catechin equivalents (Negi et al., 2003).
Briefly, 10 g of lyophilized fruit juice of each replicate of individual
treatment was extracted exhaustively with 500 mL of methanol in
Soxhlet type apparatus for 8 h. The extract was concentrated by
roto-evaporation (Buchi Rotavapor; Bu¨ chi Labortechnik, Flawil,
Switzerland) and lyophilized in a freeze dryer (Labconco Freezone
4.5; Labconco Corp., Kansas City, MO, USA). The freeze-dried
methanol extract was dissolved in a solvent mixture of methanol
and water (80:20, v/v) to obtain a concentration of 5 mg/mL.
Calibration curves were prepared for the working solutions of
catechin (10, 20, 30, 40, 50, 75 and 100 mg) of standard by diluted
in solvent mixture of methanol and water (80:20). Briefly, the
dissolved sample extracts (100 mL) and standard concentrations of
catechin were taken in test tubes and the volume was adjusted to
10 mL by addition of distilled water. One milliliter of 1-fold diluted
Folin–Ciocalteu reagent and 1 mL of 7.5% sodium carbonate
solution were added to all the tubes. The resultant samples were
incubated for 30 min at room temperature, and the absorbance
measured at l760 nm using a spectrophotometer. The estimation of
total phenolics in all the extracts was carried out in triplicate and
the mean results presented as a relative measure of catechin
2.5 การวัดรวม phenolicsความเข้มข้นของ phenolics รวมในสารสกัดได้กำหนดโดยใช้วิธีเทียบเคียง Folin-Ciocalteu อธิบายไว้โดย Negi และ Jayaprakasha มีการปรับเปลี่ยนบางอย่าง และผลลัพธ์จะแสดงเป็นเทียบเท่าสารสกัดจาก (Negi et al., 2003)สั้น ๆ 10 g ของ lyophilized ผลไม้ของแต่ละซ้ำของแต่ละบุคคลรักษาถูกสกัดลม ด้วย 500 mL ของเมทานอลในเครื่องมือชนิด Soxhlet สำหรับ 8 h การดึงข้อมูลเข้มข้นด้วยroto-ระเหย (Buchi Rotavapor ชี Bu¨ Labortechnik, Flawilสวิสเซอร์แลนด์) และ lyophilized ในการหยุดเครื่องเป่า (Labconco Freezone4.5 Labconco Corp. แคนซัสซิตี้ MO สหรัฐอเมริกา) ที่กรอบสารสกัดเมทานอลถูกละลายในตัวทำละลายผสมระหว่างเมทานอลน้ำ (80:20, v/v) เพื่อให้ได้ความเข้มข้น 5 mg/mLเส้นโค้งเทียบได้เตรียมการแก้ไขปัญหาการทำงานของโดยผสมสารสกัดจาก (10, 20, 30, 40, 50, 75 และ 100 mg) มาตรฐานในส่วนผสมของตัวทำละลายเมทานอลและน้ำ (80:20) สั้น ๆ การส่วนยุบตัวอย่างสารสกัดจาก (100 มล.) และมาตรฐานความเข้มข้นของสารสกัดจากได้รับการทดสอบท่อ และไดรฟ์ข้อมูลถูกปรับปรุงmL 10 โดยเพิ่มน้ำกลั่น หนึ่ง milliliter ของ 1-fold ทำให้เจือจาง1 mL ของ 7.5% โซเดียมคาร์บอเนตและรีเอเจนต์ Folin-Ciocalteuโซลูชันที่ถูกเพิ่มลงท่อทั้งหมด ตัวอย่างผลแก่ได้incubated ใน 30 นาทีที่อุณหภูมิห้อง และ absorbance ที่วัดที่ l760 nm โดยใช้เป็นเครื่องทดสอบกรดด่าง การประเมินของphenolics รวมในสารสกัดทั้งหมดถูกดำเนินการใน triplicate และผลหมายถึงการนำเสนอเป็นการวัดแบบสัมพัทธ์ของสารสกัดจาก
การแปล กรุณารอสักครู่..
2.5 วัดฟีนอลรวมความเข้มข้นของฟีนอลรวมในสารสกัดที่ถูกกำหนดโดยใช้Folin-Ciocalteu วิธีการสีที่อธิบายไว้โดยเนกิและJayaprakasha ด้วยการปรับเปลี่ยนบางอย่างและผลจะแสดงเป็นรายการเทียบเท่าcatechin (เนกิ et al., 2003). สั้น ๆ , 10 กรัมของน้ำผลไม้แห้งของซ้ำของแต่ละคนรักษาถูกสกัดอย่างละเอียดถี่ถ้วน500 มิลลิลิตรของเมทานอลในอุปกรณ์ประเภทวิธีการสกัดแบบเป็นเวลา8 ชั่วโมง สารสกัดเข้มข้นจากRoto-ระเหย (Buchi Rotavapor; BU ไค Labortechnik, Flawil, วิตเซอร์แลนด์) และแห้งในตู้แช่แข็ง (Labconco Freezone 4.5; Labconco คอร์ป, แคนซัสซิตี, สหรัฐอเมริกา) แช่แข็งแห้งสารสกัดเมทานอลถูกละลายในตัวทำละลายที่มีส่วนผสมของเมทานอลและน้ำ(80:20, v / v) เพื่อให้ได้ความเข้มข้น 5 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร. เส้นโค้งการสอบเทียบที่ถูกเตรียมไว้สำหรับการแก้ปัญหาในการทำงานของcatechin (10, 20, 30, 40, 50, 75 และ 100 มก.) ตามมาตรฐานโดยปรับลดในส่วนผสมตัวทำละลายเมทานอลและน้ำ(80:20) สั้น ๆ ที่สารสกัดจากตัวอย่างที่ละลายในน้ำ(100 มิลลิลิตร) และความเข้มข้นของมาตรฐานของcatechin ถูกถ่ายในหลอดทดลองและปริมาณที่ถูกปรับให้10 มิลลิลิตรโดยการเติมน้ำกลั่น หนึ่งมิลลิลิตร 1 เท่าเจือจางน้ำยาFolin-Ciocalteu 1 มิลลิลิตรและ 7.5% โซเดียมคาร์บอเนตแก้ปัญหาที่ถูกเพิ่มเข้าไปในท่อทั้งหมด กลุ่มตัวอย่างผลลัพธ์ที่ถูกบ่มเป็นเวลา 30 นาทีที่อุณหภูมิห้องและดูดกลืนแสงที่วัดL760 นาโนเมตรโดยใช้สเปก การประมาณของฟีนอลรวมในสารสกัดจากทั้งหมดที่ได้ดำเนินการในเพิ่มขึ้นสามเท่าและผลเฉลี่ยที่นำเสนอเป็นมาตรการญาติของcatechin
การแปล กรุณารอสักครู่..
2.5 การวัดผลรวม
ความเข้มข้นของปริมาณ total phenolics ในการสกัดคือ
กำหนดใช้ folin – ciocalteu 7.4 วิธีอธิบาย
โดยเนกิ jayaprakasha และมีการปรับเปลี่ยนและ
ผลลัพธ์แสดงเป็น Catechin เทียบเท่า ( เนกิ et al . , 2003 ) .
สั้น 10 กรัมของโปรตีนผลไม้ของแต่ละเลียนแบบของ บุคคล
การรักษาที่ถูกสกัดด้วยเมทานอลในอย่างละเอียด 500 มิลลิลิตร 1 เครื่อง 8 .
ชนิดสารสกัดข้นโดย
Roto การระเหย ( บูชิชิบู rotavapor ; ตั้ง labortechnik flawil
, , สวิตเซอร์แลนด์ ) และแห้งแช่แข็งไว้ในเครื่อง ( แล็บคอนโก้ freezone
4.5 ; แล็บคอนโก้คอร์ป , Kansas City , โม , USA ) แห้งแช่แข็ง
ละลายในเมทานอลผสมตัวทำละลายเมทานอลและน้ำ ( 80 :
20 , v / v ) เพื่อให้ได้ความเข้มข้น 5 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร
เส้นโค้งสอบเทียบเตรียมสำหรับโซลูชั่นการทำงานของ
catechin ( 10 , 20 , 30 , 40 , 50 , 75 และ 100 มก. ) ของมาตรฐานโดยเจือจาง
ผสมตัวทำละลายของเมทานอลในน้ำ ( 80 ) สั้น ๆ ,
ละลายตัวอย่างสารสกัด ( 100 มล. ) และความเข้มข้นมาตรฐานของ
Catechin ถ่ายในหลอดทดลองและปรับปริมาณ
10 มิลลิลิตร โดยเติมน้ำกลั่น หนึ่งมิลลิลิตรของ 1-fold เจือจาง
folin – ciocalteu รีเอเจนต์ 1 ml 7.5 โซเดียมคาร์บอเนต
โซลูชั่นมีการเพิ่มหลอดทั้งหมด ตัวอย่างผลลัพธ์ถูก
บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 30 นาที และวัดที่ค่า
l760 nm ใช้วัสดุ ประมาณ
ผลทั้งหมดในสารสกัดจากทั้งหมดที่พบว่าทั้งสามใบและ
ค่าเฉลี่ยผลเสนอเป็นมาตรการญาติของแคเทชิน
การแปล กรุณารอสักครู่..