Physical activity and telomere leng

Physical activity and telomere length in early stage breast cancer survivors
Measures
Primary outcome
Telomere length was determined using mean terminal restriction fragment (TRF) lengths as described by Lorenzini et al. [10] with minor modifications. Five hundred nanograms of purified DNA isolated from peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) were digested to completion with HinfI and RsaI. Digested samples and size markers (32P-end-labeled 1 Kb Plus DNA ladder and HindIII-cut lambda DNA) were separated in a 0.5% agarose gel. Within the gel, DNA was denatured under alkaline conditions, neutralized, and then hybridized with a 32P-end-labeled oligonucleotide (CCCTAA)4 probe overnight at 55°C. Blots were washed to remove non-specifically bound probe, and visualized using a PhosPhorImager (Molecular Dynamics Sunnyvale, CA). Mean TRF length was calculated as:

Σ(ODi)/Σ(ODi/Li), (1)
where ODi is the total radioactivity above background in interval i and Li is the average length of i in base pairs (bp). The genomic DNA was verified to be of high molecular weight by electrophoresing the undigested DNA samples on 0.5% agarose gels that were subsequently stained with ethidium bromide to show that >99% of the DNA ran at limit-mobility.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ความยาวกิจกรรมและ telomere ในผู้โรคมะเร็งเต้านมระยะเริ่มต้นจริงมาตรการผลหลักความยาวของ telomere ได้กำหนดใช้เทอร์มินัลจำกัดหมายถึงความยาวส่วน (สกว.) ตามที่อธิบายไว้โดย Lorenzini et al. [10] มีปรับเปลี่ยนเล็กน้อย Nanograms ห้าร้อยของดีเอ็นเอบริสุทธิ์ที่แยกต่างหากจากเลือดต่อพ่วง mononuclear เซลล์ (PBMCs) ถูกย่อยจนเสร็จสมบูรณ์ด้วย HinfI และ RsaI ต้องการตัวอย่างและขนาดของเครื่องหมาย (32P ตอนท้ายมีป้ายชื่อว่า DNA บวกฐานบันได 1 และแลมบ์ดา HindIII ตัดดีเอ็นเอ) ได้แบ่งในวุ้น agarose 0.5% ภายในเจ ดีเอ็นเอถูก denatured สภาวะด่าง neutralized แล้ว ผสมพันธุ์กับตัว P ที่ 32 สุดท้ายมีป้ายชื่อว่า oligonucleotide (CCCTAA) โพรบ 4 ค้างคืนที่ 55 องศาเซลเซียส กันบล็อทถูกล้างเอาไม่เฉพาะโพรบผูก และ visualized ใช้ PhosPhorImager (โมเลกุล Dynamics Sunnyvale, CA) คำนวณความยาวเฉลี่ยเมธีเป็น:Σ(ODi)/Σ(ODi/Li), (1)radioactivity รวมเหนือพื้นหลังในช่วงจากฉันและ Li ได้ความยาวเฉลี่ยของฉันในฐานคู่ (bp) ดีเอ็นเอ genomic ถูกตรวจสอบจะมีน้ำหนักโมเลกุลสูง โดย electrophoresing ตัวอย่างดีเอ็นเอ undigested บน 0.5% agarose gels ที่ได้มาสีกับโบรไมด์ ethidium ที่ > 99% ของดีเอ็นเอวิ่งที่เคลื่อนไหวจำกัด

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การออกกำลังกายและระยะเวลาใน telomere ในขั้นตอนการรอดชีวิตจากมะเร็งเต้านมระยะแรก
มาตรการ
หลักผล
ความยาวทาง telomeric ถูกกำหนดโดยใช้ค่าเฉลี่ยส่วนข้อ จำกัด ขั้ว (สกว) ความยาวตามที่อธิบายไว้โดย Lorenzini และคณะ [10] ที่มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย ห้าร้อยนาโนของดีเอ็นเอบริสุทธิ์ที่แยกได้จากเซลล์ในเลือดโมโนนิวเคลียร์ (PBMCs) ถูกย่อยที่จะเสร็จสิ้นกับ HinfI และ RsaI ตัวอย่างย่อยและเครื่องหมายขนาด (32P-end ที่มีสัญลักษณ์ 1 กิโลไบต์บันไดดีเอ็นเอ Plus และดีเอ็นเอแลมบ์ดา HindIII ตัด) ถูกแยกออกใน 0.5% agarose เจล ภายในเจลดีเอ็นเอเอทิลแอลกอฮอล์ภายใต้เงื่อนไขที่อัลคาไลน์, เป็นกลาง, และไฮบริดแล้วด้วย 32P-end ที่มีสัญลักษณ์ oligonucleotide (CCCTAA) 4 สอบสวนค้างคืนที่ 55 ° C บลถูกล้างเพื่อเอาสอบสวนที่ไม่ใช่เฉพาะที่ถูกผูกไว้และมองเห็นการใช้ PhosPhorImager (Molecular Dynamics ซันนีเวล, แคลิฟอร์เนีย) ความยาวสกวหมายถึงได้รับการคำนวณดังนี้Σ (ODI) / Σ (ODI / Li) (1) ที่ ODI เป็นกัมมันตภาพรังสีทั้งหมดด้านบนพื้นหลังในช่วงเวลาที่ฉันและหลี่คือความยาวเฉลี่ยของฉันในฐานคู่ (bp) ดีเอ็นเอถูกตรวจสอบว่ามีน้ำหนักโมเลกุลสูงโดย electrophoresing ตัวอย่างดีเอ็นเอไม่ได้แยกแยะบน 0.5% agarose เจลที่มีการย้อมต่อมากับโบรไมด์ ethidium แสดงให้เห็นว่า> 99% ของดีเอ็นเอวิ่งที่ขีด จำกัด การเคลื่อนไหว

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

กิจกรรมและความยาวของเทโลเมียร์ทางกายภาพในช่วงแรกผู้รอดชีวิตจากโรคมะเร็งเต้านม


ความยาว telomere ผลมาตรการการใช้วิเคราะห์ หมายถึง เทอร์มินัล จำกัด ( TRF ) ขนาดความยาวตามที่อธิบายไว้โดย lorenzini et al . [ 10 ] มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย 500 นาโนกรัมของดีเอ็นเอที่แยกได้จากเซลล์ปกติให้เม็ดเลือดขาว ( PBMCs ) ถูกย่อยให้สมบูรณ์ด้วย hinfi และ rsai .ตัวอย่างขนาดย่อยและเครื่องหมาย ( 32p จบป้าย 1 กิโลพร้อมบันไดดีเอ็นเอ - ตัดแลมบ์ดาดีเอ็นเอ ) แยกกัน เจล ( 0.5 % ภายในเจลดีเอ็นเอถูกใช้ภายใต้สภาวะด่างเป็นกลาง แล้วผสมพันธุ์กับ 32p จบข้อความ ซึ่ง ( ccctaa ) 4 โพรบค้างคืนที่ 55 องศา คือล้างเอาเฉพาะไม้ไม่ผูกพันด้วยและการมองเห็นการใช้ phosphorimager ( พลศาสตร์โมเลกุล Sunnyvale , CA ) หมายถึงความยาวของสกว. มีค่าเป็น :

Σ ( ODI ) / Σ ( ODI / หลี่ ) , ( 1 )
ที่ ODI คือรังสีทั้งหมดข้างต้นในช่วงหลัง และหลี่ มีความยาวเฉลี่ยของผมในคู่เบส ( BP ) การตรวจสอบดีเอ็นเอเป็นโมเลกุลสูง โดย electrophoresing ตัวอย่างดีเอ็นเอที่ไม่ถูกย่อยใน 0เจล ( 5% ) และย้อมด้วยคู่โบรไมด์ เพื่อแสดงให้เห็นว่า > 99% ของ ดีเอ็นเอ วิ่งที่ จำกัด การเคลื่อนไหว