2.5. Phenoloxidase assaysPhenoloxid

2.5. Phenoloxidase assays
Phenoloxidase activity was assayed spectrophotometrically in
96-well flat-bottomed microtiter plates (Sarstedt, Technology Park,
SA). Hydroquinone monomethyl ether (4HA; Sigma Aldrich, Castle
Hill, Australia) was used to measure monophenolase activity. This
assay was adapted from Aladaileh et al. (2007). One hundred microliters
of HL was added per well in triplicate for each sample. The HL
was then incubated with 100 μL 4HA (5 mM in FSW), containing
1 mM 3-methyl-2-benzothiazoline hydrazone (MBTH; Sigma Aldrich,
Castle Hill, Australia). The samples were held at room temperature (in
the dark) and the absorbance was measured at 490 nm at 0 and
60 min after addition of the substrate. Phenoloxidase activity was calculated
as a rate over time. Data were adjusted for the total protein
content (Bio-Rad Bradford assay) of each sample and the absorbance
of blanks (wells containing PO substrates without HL). Data at each
time-point are presented as fold differences relative to the mean PO
activity of the 0 min controls (no stress treatment).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.5 Phenoloxidase assaysPhenoloxidase กิจกรรมถูก assayed spectrophotometrically ในแผ่น microtiter 96 ดี flat-bottomed (Sarstedt เทคโนโลยีพาร์คSA) Hydroquinone monomethyl อีเทอร์ (4HA ซิก Aldrich ปราสาทฮิลล์ ออสเตรเลีย) ที่ใช้วัดกิจกรรม monophenolase นี้วิเคราะห์ถูกดัดแปลงจาก Aladaileh et al. (2007) หนึ่งร้อย microlitersของ HL ได้เพิ่มต่อดีใน triplicate สำหรับแต่ละตัวอย่าง HLแล้วมี incubated กับ 4HA μL 100 (5 มม.ใน FSW), ประกอบด้วย1 mM 3-methyl-2-benzothiazoline hydrazone (MBTH ซิก Aldrichคาสเซิลฮิลล์ ออสเตรเลีย) ตัวอย่างถูกจัดขึ้นที่อุณหภูมิห้อง(มืด) และมีที่วัด absorbance ที่ 490 nm ที่ 0 และ60 นาทีหลังจากนี้ของพื้นผิว มีคำนวณกิจกรรม Phenoloxidaseอัตราเวลา ข้อมูลถูกปรับปรุงสำหรับโปรตีนรวมเนื้อหา (แบรดฟอร์ด Rad ชีวภาพวิเคราะห์) ของแต่ละอย่างและ absorbance ที่ของช่องว่าง (บ่อที่ประกอบด้วยพื้นผิว PO ไม่ มี HL) ข้อมูลที่แต่ละเวลาจุดจะแสดงเป็นพับความแตกต่างเมื่อเทียบกับค่าเฉลี่ย POกิจกรรมควบคุม 0 นาที (ไม่รักษาความเครียด)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.5 การตรวจฟีนอล
ฟีนอลได้รับการวิเคราะห์กิจกรรม spectrophotometrically ใน
96 หลุมแผ่นแบนจุดต่ำสุดไมโคร (ซาร์สเต็ดท์, เทคโนโลยี Park,
SA) อีเทอร์ monomethyl Hydroquinone (4HA; Sigma ดิช, ปราสาท
ฮิลล์, ออสเตรเลีย) ถูกนำมาใช้ในการวัดกิจกรรม monophenolase นี้
การทดสอบได้รับการดัดแปลงมาจาก Aladaileh และคณะ (2007) หนึ่งร้อย microliters
ของ HL ถูกเพิ่มเข้ามาต่อกันดีในเพิ่มขึ้นสามเท่าสำหรับแต่ละตัวอย่าง HL
ถูกบ่มแล้วด้วย 100 ไมโครลิตร 4HA (5 มิลลิใน FSW) มี
1 มิลลิ 3-methyl-2-benzothiazoline hydrazone (MBTh ถือ; Sigma ดิช,
ปราสาทฮิลล์, ออสเตรเลีย) ตัวอย่างถูกจัดขึ้นที่อุณหภูมิห้อง (ใน
ที่มืด) และการดูดกลืนแสงวัดที่ 490 นาโนเมตรที่ 0 และ
60 นาทีหลังจากการเพิ่มขึ้นของสารตั้งต้น กิจกรรมฟีนอลที่คำนวณ
เป็นอัตราเมื่อเวลาผ่านไป ข้อมูลที่ได้มาปรับโปรตีนรวม
เนื้อหา (Bio-Rad ทดสอบ Bradford) ของแต่ละตัวอย่างและการดูดกลืนแสง
ของช่องว่าง (บ่อที่มีพื้นผิว PO โดยไม่ต้อง HL) ข้อมูลในแต่ละ
ครั้งที่จุดนั้นจะเป็นความแตกต่างเท่าเทียบกับค่าเฉลี่ย PO
กิจกรรมของการควบคุม 0 นาที (ไม่มีการรักษาความเครียด)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.5 ฟีนอลออกซิเดส )
ฟีนอลออกซิเดสกิจกรรมซีรั่มนี้ใน
96 ดีไมโครแบน bottomed แผ่น ( Sarstedt , เทคโนโลยี Park ,
ซา ) ไฮโดรควิโนน ซึ่งอีเทอร์ ( 4ha ; ซิกม่า Aldrich ปราสาท
ฮิลล์ , ออสเตรเลีย ) ใช้วัดกิจกรรม monophenolase . วิธีนี้
ถูกดัดแปลงจาก aladaileh et al . ( 2007 ) หนึ่งร้อยตัวเลข
ของ HL ได้เพิ่มต่อได้ทั้งสามใบสำหรับแต่ละตัวอย่าง ที่ HL
จากนั้นบ่มด้วย 100 μผม 4ha ( 5 มม. fsw ) ประกอบด้วย
1 มิลลิเมตรจาก 3-methyl-2-benzothiazoline ( mbth ; ซิกม่า Aldrich
Castle Hill , ออสเตรเลีย ) ตัวอย่างที่จัดขึ้นที่อุณหภูมิห้อง (
มืด ) และทำการวัดค่าการดูดกลืนแสงและ Spectrum ที่ 0
60 นาทีหลังจากที่เพิ่มของพื้นผิว กิจกรรมหา
ฟีนอลอ ซิเดสเป็นคะแนนตลอดเวลา ทำการปรับปริมาณโปรตีนรวม ( ไบโอ ราด Bradford assay
) ของแต่ละตัวอย่างและค่า
ตัวเปล่า ( บ่อที่มีโปพื้นผิวโดยไม่ HL ) ข้อมูลที่แต่ละจุดเวลา จะ แสดง เป็น พับ
ความแตกต่างเมื่อเทียบกับค่าเฉลี่ยของ 0 มินโป
กิจกรรมการควบคุม ( ไม่มีความเครียดการรักษา )