Materials and methodsMosquito larva

Materials and methods
Mosquito larvae
The Ae. albopictus larvae used in this study were kindly provided by
the Insect Physiology Laboratory of Chonbuk National University, Korea.
The mosquito larvae were kept at 28±1 °C, 65±5% of relative humidity
(RH) with a photoperiod of 16:8 (L:D) and feed with artificial diet in
the laboratory (Shin and Lee, 2014).

Isolation and identification of entomopathogenic fungi
Entomopathogenic fungal isolates were collected from soil by placing
Tenebrio molitor (mealworm) larvae on the soil for two weeks and
isolating the out-grown fungi from the surfaces of cadavers. The collection
of soil samples are summarized in Table 1. The fungal isolates were
identified by sequencing the internal transcribed spacer (ITS) region
and examining the morphological characteristics. The newly identified
and recorded isolates in Korea were firstly stored at Inset Molecular
and Biotechnological Laboratory (IMBL) of Chonbuk National University
as conidial suspensions in 20% glycerol at −80 °C (Humber, 1997) and
then deposited at the National Institute of Biological Resources (NIBR;
www.nibr.go.kr) (Incheon, Korea).

Table 1
Fungal species isolated from soil samples in Korea in 2012–2103.
Fungal species Isolate
code
Sample locations
Beauveria bassiana JEF-006 Gangwon-do (N 37.29.30.05 E 127.59.05.66)
B. bassiana JEF-007 Gangwon-do (N 37.29.30.05 E 127.59.05.66)
B. brongniartii KJS-004 Jeju island (N 33.21.27.35 E 126.27.47.25)
Cordyceps brongniartii KJS-008 Ulleung island (N 37.30.22.89 E 130.51.25.78)
Metarhizium anisopliae JEF-003 Gangwon-do (N 37.29.30.05 E 127.59.05.66)
M. anisopliae JEF-004 Gangwon-do (N 37.29.30.05 E 127.59.05.66)
Paecilomyces carneus KJS-010 Ulleung island (N 37.30.22.89 E 130.51.25.78)
Pa. javanicus KJS-005 Jeju island (N 33.21.27.35 E 126.27.47.25)
Pa. spinulosum KJS-006 Jeju island (N 33.21.27.35 E 126.27.47.25)
Purpureocillium lilacinum KJS-003 Jeollabuk-do (N 35.50.48.33 E 127.07.45.85)
Pu. lilacinum KJS-011 Ulleung island (N 37.30.22.89 E 130.51.25.78)
Verticillium leptobactrum KJS-012 Ulleung island (N 37.30.22.89 E 130.51.25.78)

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วัสดุและวิธีการตัวอ่อนของยุงแอะ albopictus ตัวอ่อนที่ใช้ในการศึกษานี้ได้กรุณาให้ห้องปฏิบัติการสรีรวิทยาของแมลงของมหาวิทยาลัยแห่งชาติ Chonbuk เกาหลีตัวอ่อนของยุงที่ถูกเก็บไว้ที่ 28±1 ° C, 65±5% ของความชื้นสัมพัทธ์(RH) กับช่วงแสง 16:8 (L:D) และอาหาร ด้วยอาหารเทียมในห้องปฏิบัติการ (ชินและลี 2014)แยกและรหัสของเชื้อรา entomopathogenicเชื้อราที่แยกได้ถูกรวบรวมจากดินด้วย Entomopathogenicตัวอ่อน (หนอนนก) โมลิเตอร์ Tenebrio บนดินสำหรับสองสัปดาห์ และแยกเชื้อราเข้าปลูกจากพื้นผิวของ cadavers คอลเลกชันของดิน ตัวอย่างจะสรุปในตารางที่ 1 แยกเชื้อราได้ระบุลำดับเบสภูมิภาคเป็นตัวเว้นวรรคใช้ทับภายใน (ของ)และตรวจสอบลักษณะสัณฐาน ระบุใหม่และแยกบันทึกในเกาหลีถูกเก็บไว้ก่อนที่แทรกโมเลกุลและปฏิบัติ Biotechnological (IMBL) ของมหาวิทยาลัยแห่งชาติ Chonbukเป็นบริการ conidial ใน 20% กลีเซอรที่ −80 ° C (Humber, 1997) และแล้ว ฝากที่ชาติสถาบันของชีวภาพทรัพยากร (NIBRwww.nibr.go.kr) (อินชอน เกาหลี)ตารางที่ 1สายพันธุ์เชื้อราที่แยกต่างหากจากตัวอย่างดินในเกาหลีใน 2012-2103แยกชนิดเชื้อรารหัสสถานที่เก็บตัวอย่างBeauveria bassiana JEF-006 กังวอนโด (N 37.29.30.05 E 127.59.05.66)เกิด bassiana JEF 007 กังวอนโด (N 37.29.30.05 E 127.59.05.66)เกาะเชจู KJS-004 brongniartii เกิด (N 33.21.27.35 E 126.27.47.25)Cordyceps เกาะ KJS-008 Ulleung brongniartii (N 37.30.22.89 E 130.51.25.78)Metarhizium anisopliae JEF-003 กังวอนโด (N 37.29.30.05 E 127.59.05.66)M. anisopliae JEF-004 กังวอนโด (N 37.29.30.05 E 127.59.05.66)เกาะ Ulleung KJS-010 carneus Paecilomyces (N 37.30.22.89 E 130.51.25.78)เกาะเชจู KJS-005 javanicus Pa. (N 33.21.27.35 E 126.27.47.25)เกาะเชจู KJS-006 spinulosum Pa. (N 33.21.27.35 E 126.27.47.25)Purpureocillium lilacinum KJS-003 Jeollabuk-โด (N 35.50.48.33 E 127.07.45.85)ปู เกาะ Ulleung KJS-011 lilacinum (N 37.30.22.89 E 130.51.25.78)Verticillium เกาะ KJS-012 Ulleung leptobactrum (N 37.30.22.89 E 130.51.25.78)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วัสดุและวิธีการ
ยุงตัวอ่อน
แอะ ตัวอ่อน albopictus ใช้ในการศึกษาครั้งนี้ได้ให้ความกรุณาโดย
. ห้องปฏิบัติการสรีรวิทยาแมลง Chonbuk มหาวิทยาลัยแห่งชาติเกาหลี
ลูกน้ำยุงถูกเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 28 ± 1 ° C, 65 ± 5% ของความชื้นสัมพัทธ์
(RH) กับช่วงแสง 16: 8 (L: D) และอาหารที่มีอาหารเทียมใน
ห้องปฏิบัติการ (ชินและลี, 2014). การแยกและจำแนกของเชื้อราแมลงสายพันธุ์เชื้อราแมลงที่ถูกเก็บรวบรวมจากดินโดยการวางTenebrio molitor (mealworm) ตัวอ่อนบนพื้นดินเป็นเวลาสองสัปดาห์และแยก เชื้อราออกเติบโตขึ้นจากพื้นผิวของศพ คอลเลกชันของตัวอย่างดินได้สรุปไว้ในตารางที่ 1 สายพันธุ์เชื้อราถูกระบุลำดับ spacer คัดลอกภายใน (ITS) ภูมิภาคและการตรวจสอบลักษณะทางสัณฐานวิทยา ระบุใหม่สายพันธุ์และมีการบันทึกในเกาหลีถูกเก็บไว้ในตอนแรกที่ภาพประกอบโมเลกุลและเทคโนโลยีชีวภาพทางห้องปฏิบัติการ (IMBL) ของ Chonbuk มหาวิทยาลัยแห่งชาติเป็นสารแขวนลอยเชื้อราในกลีเซอรอล 20% ที่ -80 ° C (ซังกะตาย 1997) และแล้วฝากที่สถาบันแห่งชาติของทางชีวภาพ ทรัพยากร (NIBR; www.nibr.go.kr). (อินชอนประเทศเกาหลี) ตารางที่ 1 . เชื้อราสายพันธุ์ที่แยกได้จากตัวอย่างดินในประเทศเกาหลีใน 2012-2103 สายพันธุ์เชื้อราแยกรหัสสถานที่ตัวอย่างBeauveria bassiana JEF-006 พยองชาง (ยังไม่มี 37.29 .30.05 E 127.59.05.66) B. bassiana JEF-007 พยองชาง (ยังไม่มี 37.29.30.05 E 127.59.05.66) B. brongniartii KJS-004 เกาะเชจู (ยังไม่มี 33.21.27.35 E 126.27.47.25) Cordyceps brongniartii KJS-008 Ulleung เกาะ (ยังไม่มี 37.30.22.89 E 130.51.25.78) Metarhizium anisopliae JEF-003 พยองชาง (ยังไม่มี 37.29.30.05 E 127.59.05.66 ) M. anisopliae JEF-004 พยองชาง (ยังไม่มี 37.29.30.05 E 127.59.05.66) Paecilomyces carneus KJS-010 Ulleung เกาะ (ยังไม่มี 37.30.22.89 E 130.51.25.78) ป่า javanicus KJS-005 เกาะเชจู (ยังไม่มี 33.21.27.35 E 126.27.47.25) ป่า spinulosum KJS-006 เกาะเชจู (ยังไม่มี 33.21.27.35 E 126.27.47.25) Purpureocillium lilacinum KJS-003 Jeollabuk-do (ยังไม่มี 35.50.48.33 E 127.07.45.85) ปู่ lilacinum KJS-011 Ulleung เกาะ (ยังไม่มี 37.30.22.89 E 130.51.25.78) Verticillium leptobactrum KJS-012 Ulleung เกาะ (ยังไม่มี 37.30.22.89 E 130.51.25.78)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

วัสดุและวิธีการ ลูกน้ำ

เอ จากตัวอ่อนที่ใช้ในการศึกษาได้แก่ กรุณาให้
แมลงสรีรวิทยาห้องปฏิบัติการของมหาวิทยาลัยแห่งชาติ ชนบุค เกาหลี
ลูกน้ำไว้ที่ 28 ± 1 ° C 65 ± 5 % ความชื้นสัมพัทธ์ ( RH )
ที่มีต่อ 16 : 8 ( L : D ) และเลี้ยงด้วยอาหารเทียมใน
ห้องปฏิบัติการ ( ชิน และ ลี ปี 2014

)การแยกและการแยกเชื้อรา แมลงที่ตายของแมลงที่ตายเชื้อรา
เก็บจากดิน โดยวาง
tenebrio โมลิเตอร์ ( หนอนนก ) หนอนในดินสำหรับสองสัปดาห์และ
แยกปลูกเชื้อราจากพื้นผิวของท่าน คอลเลกชันของตัวอย่างดิน
สรุปในตารางที่ 1 ส่วนเชื้อราไอโซเลท
ระบุลำดับการถ่ายทอด spacer ( ITS ) และศึกษาลักษณะทางภูมิภาค
. ระบุและบันทึกสายพันธุ์ใหม่

แรกในเกาหลีที่สอดแทรกเทคโนโลยีชีวภาพโมเลกุลและเก็บไว้ในห้องปฏิบัติการ ( imbl ) ของมหาวิทยาลัยแห่งชาติชนบุค
เป็น 20% จากสารแขวนลอยในกลีเซอรอลที่− 80 ° C ( Humber , 1997 ) และ
งั้นฝากไว้ที่สถาบันทรัพยากรชีวภาพ ( nibr ;
www.nibr ไป เคอาร์ ) ( อินชอน เกาหลี


ชนิดของเชื้อราที่แยกได้จากตารางที่ 1 ตัวอย่างดินในเกาหลีใน 2012 – 2103 .
3

ตัวอย่างชนิดแยกรหัสที่ตั้ง
บิวเวอเรียบาเซียน่า jef-006 กังวอนโด ( N 37.29.30.05 E 127.59.05.66 )
B bassiana jef-007 กังวอนโด ( N 37.29.30.05 E 127.59.05.66 )
. brongniartii kjs-004 เกาะเจจู ( 3321.27.35 e )
126.27.47.25 Cordyceps brongniartii kjs-008 ulleung เกาะ ( N 37.30.22.89 E 130.51.25.78 )
Metarhizium anisopliae jef-003 กังวอนโด ( N 37.29.30.05 E 127.59.05.66 )
M . anisopliae jef-004 กังวอนโด ( N 37.29.30.05 E 127.59.05.66 )
Paecilomyces carneus kjs-010 ulleung เกาะ ( N 37.30.22.89 E 130.51.25.78 )
. javanicus kjs-005 เกาะเชจู ( N 33.21.27.35 E 126.27.47.25 )
.spinulosum kjs-006 เกาะเชจู ( N 33.21.27.35 E 126.27.47.25 )
purpureocillium lilacinum kjs-003 จังหวัดชอลลาบุค แห่งทำได้ ( N 35.50.48.33 E 127.07.45.85 )
PU lilacinum kjs-011 ulleung เกาะ ( N 37.30.22.89 E 130.51.25.78 )
kjs-012 จำแนกชนิด leptobactrum ulleung เกาะ ( N 37.30.22.89 E 130.51.25.78 )