The yeast strains W. anomalus (stra

The yeast strains W. anomalus (strain 422) and M. guilliermondii
(strain 443) were cultured in assay tubes with 20 mL of YEPD
medium (10 g/L yeast extract, 20 g/L peptone, 20 g/L glucose) at
28
◦
C for 24 h. Subsequently, the cultures were filtered through a
0.22 m membrane and the cell-free filtrated was used to measure
chitinase and -1,3-glucanase activities.
-1,3-Glucanase (GLU) activity was determined by the rate
of glucose production from the degradation of laminarin
(Sigma–Aldrich) used as substrate (Boller, 1992). Laminarin was
dissolved in ultrapure water (Milli-Q), heated to 60
◦
C for 10 min,
and dialyzed exhaustively against ultrapure water (Milli-Q) for
removal of free glucose. In the assay, 0.1 mL of the sample was
incubated with 0.9 mL of laminarin (2.0 mg/mL) at 50
◦
C for 30 min.
After adding the appropriate reagents to the reaction mixture,
absorbance readings were taken at 520 nm. The quantity of glucose
monomers released was determined using a d-glucose standard
curve (3–30 g/mL). The -1,3-glucanase activity was expressed
in nanokatal per milligram of protein (nkatGlu/mg P). One nkat is
equivalent to 1.0 nmol glucose released/mL/s

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ยีสต์ปริมาณ M. guilliermondii และ anomalus (ต้องใช้ 422)(สายพันธุ์ 443) มีอ่างในหลอดทดสอบมี 20 mL ของ YEPDปานกลาง (10 g/L ยีสต์สกัด peptone 20 g/L กลูโคส 20 g/L) ที่28◦C ใน 24 ชม ในเวลาต่อมา มีวัฒนธรรมที่ถูกกรองผ่านเมมเบรน 0.22 เมตรและเซลล์ฟรี filtrated ใช้ในการวัดchitinase และ - 1,3-กิจกรรมคัด-1,3-กิจกรรมคัด (GLU) ถูกกำหนด โดยอัตราการผลิตน้ำตาลกลูโคสจากการย่อยสลายของ laminarin(ซิก-Aldrich) ใช้เป็นพื้นผิว (Boller, 1992) Laminarin ถูกละลายใน ultrapure น้ำ (-Q), อุณหภูมิ 60◦C สำหรับ 10 นาทีและ dialyzed ลมกับน้ำ ultrapure (-Q) สำหรับเอาของฟรีกลูโคส ในทดสอบ 0.1 มล.ของตัวอย่างได้incubated กับ 0.9 mL ของ laminarin (2.0 mg/mL) ที่ 50◦C สำหรับ 30 นาทีหลังจากเพิ่ม reagents ที่เหมาะสมผสมปฏิกิริยาอ่าน absorbance ที่ถ่ายที่ 520 nm ปริมาณของน้ำตาลกลูโคสmonomers ออกได้กำหนดใช้มาตรฐาน d-กลูโคสเส้นโค้ง (3-30 g/mL) 1,3--กิจกรรมคัดได้แสดงใน nanokatal ต่อ milligram โปรตีน (nkatGlu/mg P) เป็น nkat หนึ่งเทียบเท่ากับ 1.0 nmol กลูโคส ออก/mL/s

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ยีสต์สายพันธุ์ดับเบิลยู anomalus (422 สายพันธุ์) และเอ็ม guilliermondii
(443 สายพันธุ์) มีการเพาะเลี้ยงในหลอดทดสอบที่มี 20 มล YEPD
กลาง (10 กรัม / ลิตรสารสกัดจากยีสต์ 20 กรัม / ลิตรเปปโตน 20 กรัม / ลิตรกลูโคส) ที่
28
◦
C เป็นเวลา 24 ชั่วโมง ต่อมาวัฒนธรรมถูกกรองผ่าน
0.22? เมตรและเยื่อหุ้มเซลล์ฟรีกรองที่ใช้ในการวัด
และไคติเนส? กิจกรรม -1,3-glucanase.
? -1,3-glucanase (GLU) กิจกรรมที่ถูกกำหนดโดยอัตรา
ของ การผลิตกลูโคสจากการย่อยสลายของ laminarin
(Sigma-Aldrich) ใช้เป็นสารตั้งต้น (บอลเลอร์, 1992) laminarin ถูก
ละลายในน้ำบริสุทธิ์ (Milli-Q) ความร้อนถึง 60
◦
C เป็นเวลา 10 นาที
และ dialyzed ละเอียดถี่ถ้วนกับน้ำบริสุทธิ์ (Milli-Q) สำหรับ
การกำจัดของน้ำตาลกลูโคสฟรี ในการทดสอบ 0.1 มิลลิลิตรของกลุ่มตัวอย่างที่ได้รับการ
บ่มกับ 0.9 มิลลิลิตร laminarin (2.0 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร) ที่ 50
◦
C เป็นเวลา 30 นาที.
หลังจากเพิ่มสารเคมีที่เหมาะสมในการผสมปฏิกิริยา,
การอ่านการดูดกลืนแสงที่ถูกนำมาที่ 520 นาโนเมตร ปริมาณของน้ำตาลกลูโคส
โมโนเมอร์ที่ปล่อยออกมาถูกกำหนดโดยใช้ D-กลูโคสมาตรฐาน
เส้นโค้ง (3-30? g / มิลลิลิตร) ? กิจกรรม -1,3-glucanase ได้แสดงออก
ใน nanokatal ต่อมิลลิกรัมโปรตีน (nkatGlu / mg P) หนึ่ง nkat เป็น
เทียบเท่ากับ 1.0 nmol กลูโคสปล่อยออก / มิลลิลิตร / วินาที

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ยีสต์สายพันธุ์ ( สายพันธุ์ . anomalus 422 ) และ guilliermondii
( สายพันธุ์ 443 ) เพาะเลี้ยงในอาหารเลี้ยงเชื้อที่มี 20 มิลลิลิตรต่อหลอด
ขนาด ( 10 กรัม / ลิตรสารสกัดยีสต์ 20 g / l ตามลำดับ 20 กรัมต่อลิตรและกลูโคส )

ที่ 28 ◦
C เป็นเวลา 24 ชั่วโมง ภายหลัง , วัฒนธรรมคือ กรองผ่านเมมเบรนและ 0.22 m
 การสังเคราะห์ใช้มาตรการผลิตไคติเนส และ  - กิจกรรม 1
.
 - 1เนส ( GLU ) กิจกรรมที่ถูกกำหนดโดยอัตรา
การผลิตกลูโคสจากการย่อยสลายของลามินาริน
( Sigma ) ดิช ) ใช้เป็นวัตถุดิบ ( บอลเลอร์ , 1992 ) ลามินารินถูก
ละลายในน้ำบริสุทธิ์มาก ( milli-q ) อุ่น 60

◦เป็นเวลา 10 นาที และละเอียดถี่ถ้วนกับน้ำบริสุทธิ์มากซิ

( milli-q ) สำหรับการกำจัดกลูโคสฟรี ในการทดสอบของตัวอย่าง 0.1 ml บ่มด้วย
09 ml ของลามินาริน ( 2.0 มก. / มล. ) ที่ 50


◦ C เป็นเวลา 30 นาที หลังจากเพิ่มสารเคมีที่เหมาะสมกับปฏิกิริยาที่ผสม
อ่านค่าถ่ายที่ 520 nm . ปริมาณกลูโคส
เมอร์ออกตั้งใจใช้ดี กูลโคสมาตรฐาน
โค้ง ( 3 – 30  g / ml ) - กิจกรรมที่ 1  แสดงออก
ใน nanokatal ต่อมิลลิกรัมโปรตีน ( nkatglu / mg P ) เป็นหนึ่ง nkat
เท่ากับ 10 ? กลูโคสออก / ML / s