Black rice (Longjin No.1, Oryza sat

Black rice (Longjin No.1, Oryza sativa L. Japonica). The kernels were dried at 40 °C, ground with a laboratory mill, and passed through a 60 mesh screen sieve.
Preparation of anthocyanin-rich extract from black rice (AEBR) was prepared as previously described (Prior et al., 2008). Briefly, black rice powder was extracted twice with ethanol/water/hydrochloric acid (50:50:0.5, v/v/v) of solid–liquid ratio (1:10) for 2 h at 50 °C. The filtrates were combined and subjected to vacuum evaporation (Rotavapor R 210; Büchi, Flawil, Sweden) to remove ethanol. The concentrated extracts were loaded onto AB-8 resin. The AB-8 resin was washed with distilled water, and subsequently the absorbed anthocyanins were recovered with 80% ethanol. The ethanol eluent was sprayed to yield anthocyanin-rich powders.
Instrumentation and chromatographic conditions The HPLC system consisted of two Alltech 626 HPLC pumps, an auto sampler (AS3000), and an UV6000 detector (Spectra system thermo Finnigan, San Jose, CA, USA). Compounds separation was carried out on a VP-ODS column (5 μm, 250 mm∗ 4.6 mm, Shimadzu,Japan). Mobile phases were composed of 0.1% trifluoroacetic acid (A) and acetonitrile (B) with the following gradients: isocratic 10% B for 5 min, and the linear increase to 15% B in the following 15 min, hold 15% B for 5 min, then increased from 15 to 18% B during next 5 min and from 18 to 35% B over 20 min. 520 nm was selected as the preferred wavelength. The column temperature was set at 35 °C. The flow rate was 1 mL/min, and the injection volume was 20 μL. All experiments were performed in triplicate simultaneously. Peak identification was performed with retention time as compared with the standard
Degradation studies thermal stability of each anthocyanin from black rice was studied at 80, 90 and 100 °C. Two grams of AEBR were dissolved with 1000 mL 0.2 M citrate-phosphate buffer. Aliquots of 10 mL anthocyanins solution were put into each of six plastic tubes. The sample tubes covered with aluminum foil were well capped to avoid evaporation and placed in a thermostatic water bath (Memmert WB14, Schwabach, Germany) preheated to a given temperature. At regular time intervals (0, 30, 60, 90, 120, 150, and 180 min), six tubes were randomly taken from the water bath and rapidly cooled by plunging into an ice water bath (Yue & Xu, 2008). The contents of cooled tubes were analyzed for monomeric anthocyanin content. The effect of pH on thermal stability was also studied at six different pHs (1.0, 2.0, 3.0, 4.0, 5.0 and 6.0) at each temperature. Citrate-phosphate buffers were prepared to provide the specified pH situation.
The antioxidant capacity of samples and control (without thermal treatment) was evaluated using both DPPH assay and ABTS assay. A spectrophotometer (UVMini 1240, Shimadzu, Kyoto,Japan) used in both assays was blanked using methanol. Total antioxidant capacity was reported as mg Trolox equivalents/mL. The DPPH assay was conducted according to a procedure described by Brand-Williams, Cuvelier, and Berset (1995). Sample or Trolox standard (25 lL) was added into 3.9 mL of DPPH stock solution (6 _ 10_5 M), and the reaction was lasting for two hours in dark at room temperature. At the end of the reaction, the absorbance of the mixture was measured at 515 nm using the spectrophotometer. The ABTS assay was performed following the procedure of Reet al. (1999). Briefly, ABTS radical cation (ABTS_+) was produced by reacting ABTS stock solution (7 mM) with potassium persulfate (2.45 mM) in equal volume and allowing the mixture to stand in dark for 12–16 h before use. Aliquot of 1 mL ABTS_+ solution was diluted with 60 mL methanol to an absorbance of 0.70 (}0.02) at 734 nm. The diluted ABTS_+ solution (1 mL) was mixed with 2.5 lL of sample or Trolox, and the mixture was allowed to equilibrate for 7 min before its absorbance at 734 nm was measured.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ข้าวดำ (Longjin No.1 ซา Oryza L. Japonica) เมล็ดถูกอบแห้งที่ 40 ° C ดินกับสีห้องปฏิบัติการ และผ่านตะแกรงหน้าจอเป็นตาข่าย 60 เตรียมมีโฟเลทสูงอุดมไปด้วยสารสกัดจากข้าวสีดำ (AEBR) ถูกเตรียมไว้เป็นเคยอธิบายไว้ (ก่อน et al., 2008) สั้น ๆ ผงข้าวสีดำถูกดึงสองกับกรดเอทานอล/น้ำ/ไฮโดรคลอริก (50:50:0.5, v/v/v) ของแข็งของเหลวอัตราส่วน (1:10) h 2 ที่ 50 องศาเซลเซียส Filtrates การรวม และการระเหยสุญญากาศ (Rotavapor R 210 บือ Flawil สวีเดน) การเอาเอทานอล สารสกัดเข้มข้นถูกโหลดลงในเรซิน AB-8 ยาง AB 8 ถูกล้าง ด้วยน้ำกลั่น และต่อมาได้กู้ anthocyanins ดูดซึมกับเอทานอล 80% Eluent เอทานอลถูกพ่นให้ผงรวยมีโฟเลทสูงเครื่องมือวัดและระบบ HPLC เงื่อนไข chromatographic consisted ของสองปั๊ม Alltech 626 HPLC แซมเพลอร์ที่อัตโนมัติ (AS3000), และ UV6000 เป็นเครื่องตรวจจับ (แรมสเป็คตราระบบเทอร์โม Finnigan, San Jose, CA, USA) แยกสารประกอบถูกดำเนินบนคอลัมน์ VP ODS (5 μm, 250 mm∗ 4.6 มม. Shimadzu ญี่ปุ่น) ระยะเคลื่อนประกอบด้วยกรด 0.1% trifluoroacetic (A) และ acetonitrile (B) กับต่อไปนี้ไล่ระดับสี: isocratic คิด 10% B 5 นาที และแบบเชิงเส้นเพิ่มเป็น 15% B ใน 15 นาทีต่อไปนี้ ถือ 15% B สำหรับ 5 นาที แล้วเพิ่มขึ้น จาก 15 18% B ระหว่าง 5 นาทีถัดไป และ 18 35% B มากกว่าเลือก 20 นาที 520 nm เป็นความยาวคลื่นที่ต้องการ ตั้งอุณหภูมิคอลัมน์ที่ 35 องศาเซลเซียส อัตราการไหล 1 mL/min และ 20 μL มีปริมาณฉีด ทดลองทั้งหมดถูกทำใน triplicate กัน รหัสสูงสุดทำการรักษาเวลาเมื่อเทียบกับมาตรฐาน ย่อยสลายศึกษาเสถียรภาพความร้อนของแต่ละมีโฟเลทสูงจากข้าวสีดำถูกศึกษาที่ 80, 90 และ 100 องศาเซลเซียส กรัมสองของ AEBR ได้ส่วนยุบ ด้วยบัฟเฟอร์ฟอสเฟตซิเตรต 0.2 M 1000 mL Aliquots ของ anthocyanins 10 mL ใส่ลงในแต่ละหลอดพลาสติก 6 หลอดตัวอย่างครอบคลุม ด้วยอลูมิเนียมฟอยล์ได้ดี capped เพื่อหลีกเลี่ยงการระเหย และในน้ำ thermostatic น้ำ (ความ WB14, Schwabach เยอรมนี) ต่ำอุณหภูมิที่กำหนด ในช่วงเวลาปกติ (0, 30, 60, 90, 120, 150 และ 180 นาที), ท่อหกถูกสุ่มมาจากห้องน้ำ และระบายความร้อนด้วย โดยหลั่นในการอาบน้ำ (หยูและ Xu, 2008) อย่างรวดเร็ว เนื้อหาของเย็น ๆ ท่อได้วิเคราะห์เนื้อหามีโฟเลทสูง monomeric ผลของความมั่นคงความร้อนยังถูกศึกษาที่ 6 แตกต่าง pHs (1.0, 2.0, 3.0, 4.0, 5.0 และ 6.0) ที่อุณหภูมิแต่ละ ฟอสเฟตซิเตรตบัฟเฟอร์ถูกเตรียมให้สถานการณ์ระบุค่า pHกำลังการผลิตสารต้านอนุมูลอิสระของตัวอย่างและการควบคุม (โดยไม่มีการรักษาความร้อน) ได้ถูกประเมินโดยใช้ DPPH วิเคราะห์และทดสอบรเรียน เป็นเครื่องทดสอบกรดด่าง (UVMini 1240, Shimadzu เกียวโต ญี่ปุ่น) ใช้ใน assays ทั้งถูกให้ใช้เมทานอล รายงานกำลังการผลิตรวมสารต้านอนุมูลอิสระเป็นมิลลิกรัมเทียบเท่า Trolox/mL ทดสอบ DPPH ได้ดำเนินการตามขั้นตอนที่อธิบายไว้ โดยแบรนด์วิลเลียมส์ Cuvelier และ Berset (1995) ตัวอย่างหรือมาตรฐาน Trolox (25 จะ) ถูกเพิ่มเป็น 3.9 mL ของ DPPH หุ้นโซลูชั่น (10_5 6 _ M), และปฏิกิริยายาวนานสองชั่วโมงในความมืดที่อุณหภูมิห้อง เมื่อสิ้นสุดปฏิกิริยา absorbance ของผสมมีวัดที่ 515 nm โดยใช้เครื่องทดสอบกรดด่าง ทดสอบรเรียนที่ดำเนินการตามกระบวนการของ Reet al. (1999) สั้น ๆ รเรียน cation รุนแรง (ABTS_ +) ถูกผลิต โดยปฏิกิริยารเรียนหุ้นโซลูชั่น (7 มม) กับโพแทสเซียม persulfate (2.45 มิลลิเมตร) ในปริมาณที่เท่ากัน และช่วยให้ส่วนผสมยืนในมืดสำหรับ h 12 – 16 ก่อนใช้ ส่วนลงตัวของ 1 mL ABTS_ + ถูกผสมกับเมทานอล 60 mL จะเป็น absorbance 0.70 (} 0.02) ที่ 734 nm แตกออก ABTS_ + โซลูชัน (1 mL) ถูกผสมกับ 2.5 จะตัวอย่าง หรือ Trolox และส่วนผสมได้รับอนุญาตให้ equilibrate ในนาทีที่ 7 ก่อนที่ absorbance ที่ 734 nm ที่วัด

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ข้าวสีดำ (Longjin 1, Oryza sativa L. พันธุ์ญี่ปุ่น) เมล็ดแห้งที่ 40 ° C, พื้นดินที่มีห้องปฏิบัติการโรงงานและผ่าน 60 ตาข่ายตะแกรงหน้าจอ
การเตรียมสารสกัดจาก anthocyanin ที่อุดมไปด้วยจากข้าวสีดำ (AEBR) ได้รับการจัดทำขึ้นตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (ก่อน et al., 2008) สั้น ๆ , ผงข้าวสีดำเป็นสารสกัดเอทานอลเป็นครั้งที่สองที่มี / น้ำ / กรดไฮโดรคลอริก (50: 50: 0.5, v / v / v) ของอัตราส่วนของแข็งของเหลว (1:10) เป็นเวลา 2 ชั่วโมงที่ 50 ° C filtrates มารวมกันและภายใต้สูญญากาศการระเหย (Rotavapor R 210; Büchi, Flawil, สวีเดน) ที่จะเอาเอทานอล สารสกัดเข้มข้นถูกโหลดไปยัง AB-8 เรซิน AB-8 เรซินถูกล้างด้วยน้ำกลั่นและต่อมา anthocyanins ดูดซึมหาย 80% เอทานอล ตัวชะเอทานอลที่ได้รับการฉีดพ่นเพื่อให้ anthocyanin ที่อุดมไปด้วยผง
วัดและเงื่อนไขโครมาระบบ HPLC ประกอบด้วยสองออลเทค 626 ปั๊ม HPLC, ตัวอย่างอัตโนมัติ (AS3000) และเครื่องตรวจจับ UV6000 (Spectra ระบบเทอร์โมฟินนิกัน, San Jose, CA, USA ) สารที่แยกได้รับการดำเนินการในคอลัมน์ VP-ODS (5 ไมโครเมตร 250 มิลลิเมตร * 4.6 มม Shimadzu, ญี่ปุ่น) ขั้นตอนโทรศัพท์มือถือประกอบด้วย 0.1% กรด Trifluoroacetic (A) และ acetonitrile (B) ที่มีการไล่ระดับสีต่อไปนี้: Isocratic 10% B เป็นเวลา 5 นาทีและเพิ่มขึ้นเป็นเส้นตรงถึง 15% B ดังต่อไปนี้ 15 นาทีถือ 15% B 5 นาทีจากนั้นเพิ่มขึ้น 15-18% B ในช่วงต่อเวลา 5 นาทีและ 18-35% B กว่า 20 นาที 520 นาโนเมตรได้รับเลือกเป็นความยาวคลื่นที่ต้องการ อุณหภูมิคอลัมน์นี้ถูกตั้งไว้ที่ 35 องศาเซลเซียส อัตราการไหลที่ 1 มิลลิลิตร / นาทีและปริมาณการฉีด 20 ไมโครลิตร ทุกการทดลองดำเนินการในเพิ่มขึ้นสามเท่าพร้อมกัน ประชาชนสูงสุดได้ดำเนินการกับเวลาการเก็บรักษาเมื่อเทียบกับมาตรฐาน
การศึกษาการย่อยสลายเสถียรภาพทางความร้อนของแต่ละ anthocyanin จากข้าวสีดำได้รับการศึกษาที่ 80, 90 และ 100 ° C สองกรัมของ AEBR กำลังละลายกับ 1000 ml 0.2 ซิเตรทบัฟเฟอร์ฟอสเฟต aliquots ของ 10 ml แก้ปัญหา anthocyanins ถูกใส่ลงไปในแต่ละหกหลอดพลาสติก หลอดตัวอย่างปกคลุมด้วยอลูมิเนียมฟอยล์ถูกปกคลุมดีเพื่อหลีกเลี่ยงการระเหยและวางไว้ในอ่างน้ำอุณหภูมิ (Memmert WB14, Schwabach, เยอรมนี) อุ่นที่อุณหภูมิที่กำหนด ในช่วงปกติเวลา (0, 30, 60, 90, 120, 150, และ 180 นาที) หกหลอดถูกถ่ายโดยการสุ่มจากอ่างน้ำและระบายความร้อนด้วยอย่างรวดเร็วจมดิ่งลงสู่อ่างน้ำน้ำแข็ง (Yue และ Xu 2008) เนื้อหาของท่อระบายความร้อนด้วยการวิเคราะห์เนื้อหา anthocyanin monomeric ผลของพีเอชที่ทนความร้อนได้ศึกษานอกจากนี้ยังมีที่หก PHS แตกต่างกัน (1.0, 2.0, 3.0, 4.0, 5.0 และ 6.0) ในแต่ละอุณหภูมิ บัฟเฟอร์ซิเตรตฟอสเฟตพร้อมที่จะให้สถานการณ์ค่า pH ที่ระบุ
สารต้านอนุมูลอิสระของกลุ่มตัวอย่างและการควบคุม (โดยไม่ต้องรักษาความร้อน) ได้รับการประเมินโดยใช้ทั้งสองวิธี DPPH และ ABTS ทดสอบ Spectrophotometer (UVMini 1240, Shimadzu, เกียวโต, ญี่ปุ่น) ที่ใช้ในการตรวจทั้งสองได้รับการคอมพ์โดยใช้เมทานอล ความสามารถในการต้านอนุมูลอิสระได้รับรายงานว่ามิลลิกรัมเทียบเท่า Trolox / มิลลิลิตร DPPH ทดสอบได้ดำเนินการตามขั้นตอนที่อธิบายโดยแบรนด์วิลเลียมส์ Cuvelier และ Berset (1995) ตัวอย่างหรือ Trolox มาตรฐาน (25 lL) ถูกเพิ่มเข้าไปใน 3.9 มิลลิลิตร DPPH การแก้ปัญหาสต็อก (6 _ 10_5 M) และปฏิกิริยาที่ยาวนานสำหรับสองชั่วโมงในที่มืดที่อุณหภูมิห้อง ในตอนท้ายของการเกิดปฏิกิริยาที่ดูดกลืนแสงของสารผสมวัดที่ 515 นาโนเมตรโดยใช้สเปก ABTS ทดสอบได้รับการดำเนินการตามขั้นตอนของ Reet อัล (1999) สั้น ๆ ABTS ไอออนบวกหัวรุนแรง (ABTS_ +) ที่ผลิตโดยปฏิกิริยาการแก้ปัญหาหุ้น ABTS (7 มิลลิเมตร) ที่มีโพแทสเซียมเพอร์ซัลเฟต (2.45 mm) ในปริมาณเท่ากันและช่วยให้ส่วนผสมที่จะยืนในที่มืดสำหรับ 12-16 ชั่วโมงก่อนการใช้งาน แบ่งส่วนของ 1 มิลลิลิตร ABTS_ + สารละลายเจือจางด้วยเมทานอล 60 มิลลิลิตรที่จะดูดกลืนแสง 0.70 (??} 0.02) ที่ 734 นาโนเมตร เจือจางสารละลาย ABTS_ + (1 มิลลิลิตร) ผสมกับ 2.5 lL ของตัวอย่างหรือ Trolox และส่วนผสมที่ได้รับอนุญาตให้สมดุลเป็นเวลา 7 นาทีก่อนที่จะดูดกลืนแสงที่ 734 นาโนเมตรวัด

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ข้าวดำ ( longjin No.1 , Oryza sativa L . จาป ) เมล็ดแห้งที่ 40 ° C , พื้นดินกับห้องปฏิบัติการโรงงานและผ่าน 60 หน้าจอ ตาข่ายตะแกรง การเตรียมสารสกัดแอนโธไซยานิน
รวยจากข้าวดำ ( aebr ) เตรียมตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ ( ก่อน et al . , 2008 ) สั้น ๆ , ผงข้าวดำสกัดสองครั้งด้วยเอทานอลและน้ำ ( 50:50:0.5 / กรดเกลือ ,v / v / v ) และอัตราส่วนของของแข็งของเหลว ( 1 : 10 ) 2 H 50 ° C เป็นสารละลายรวม และต้องระเหยแบบสุญญากาศ ( rotavapor R 210 ; B ü chi flawil , สวีเดน ) เพื่อเอาเอทานอล สารสกัดเข้มข้นถูกโหลดลงบน ab-8 เรซิน การ ab-8 เรซิน ล้างด้วยน้ำกลั่น และภายหลังดูดซึมแอนโทไซยานินหายด้วยเอทานอล 80%เอทานอล เพื่อผลิตผงพ่นเคลือบตัวรวย แอนโธไซยานิน
เครื่องมือและเงื่อนไขโครมระบบ HPLC ประกอบด้วย 2 เพราะ 626 HPLC ปั๊มอัตโนมัติตัวอย่าง ( as3000 ) , และ uv6000 ตรวจจับ ( ระบบเทอร์โม ฟินนิกัน Spectra , San Jose , CA , USA ) สารประกอบที่แยกได้ออกเป็นคอลัมน์ vp-ods ( 5 μ M 250 มม. ∗ 4.6 มม. Shimadzu ญี่ปุ่น )เฟสเคลื่อนที่ประกอบด้วย 0.1% กรดไตรฟลูออโรอะซิติก ( ) และไน ( B ) ด้วยการไล่ระดับสีต่อไปนี้ : Isocratic 10 % B เป็นเวลา 5 นาที และเส้นเพิ่ม 15 % B ในต่อไปนี้ 15 นาที ถือ 15 % B สำหรับ 5 นาทีแล้วเพิ่มขึ้นจาก 15 ถึง 18 % B ในอีก 5 นาที และจาก 18 ถึง 35 % B 20 กว่านาที 520 nm ได้รับเลือกเป็นความยาวคลื่นที่ต้องการ คอลัมน์ อุณหภูมิตั้งไว้ที่ 35 องศาอัตราการไหลเท่ากับ 1 มิลลิลิตรต่อนาทีและปริมาณ 20 ลิตรฉีดμทั้งหมดทดลองทั้งสามใบพร้อมกัน การทำการรักษายอดกับเวลาเมื่อเทียบกับมาตรฐานการศึกษาความเสถียรเชิงความร้อนของ
การย่อยสลายแต่ละแอนโธไซยานินจากข้าวดำ จบที่ 80 , 90 และ 100 องศา สองกรัมของ aebr ถูกละลายด้วยซิเตรทฟอสเฟตบัฟเฟอร์ 0.2M 1000 ml .เฉยๆ 10 ml แอนโทไซยานิน โซลูชั่น ใส่ลงไปในแต่ละหกหลอดพลาสติก ตัวอย่างท่อปกคลุมด้วยอลูมิเนียมอย่างดีที่สุดเพื่อหลีกเลี่ยงการระเหยและวางไว้ในอ่างน้ำ thermostatic ( MEMMERT wb14 Schwabach , เยอรมนี , ) ตั้งเพื่อให้อุณหภูมิ ในช่วงเวลาปกติ ( 0 , 30 , 60 , 90 , 120 , 150 และ 180 นาที )6 หลอด สุ่มเอาจากน้ำอาบน้ำอย่างรวดเร็วและระบายความร้อนโดยพรวดพราดในน้ำแข็ง น้ำที่อาบ ( Yue & Xu , 2008 ) เนื้อหาของเย็นท่อเกิด Anthocyanin วิเคราะห์เนื้อหา ผลของ pH ต่อความเสถียรทางความร้อนและศึกษาที่แตกต่างกันหก PHS ( 1.0 , 2.0 , 3.0 , 4.0 , 5.0 และ 6.0 ) ในแต่ละอุณหภูมิซิเตรทฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH เตรียมให้ระบุสถานการณ์ .
ความจุของสารต้านอนุมูลอิสระและตัวอย่างควบคุม ( ไม่มีการใช้ความร้อน ) ทดลองใช้ทั้งใน dpph Abbr ตามลำดับ เป็นวัสดุ ( uvmini 1240 Shimadzu , เกียวโต , ญี่ปุ่น ) ที่ใช้ในทั้ง 2 วิธีคือภาพที่ใช้เมทานอล สารต้านอนุมูลอิสระทั้งหมดถูกรายงานเป็นมิลลิกรัม / มิลลิลิตร เทียบเท่ากับสารการ dpph โดยดำเนินการตามขั้นตอนที่อธิบายโดยแบรนด์ วิลเลียมส์ คว เลอร์ และ berset ( 1995 ) ตัวอย่างและสารมาตรฐาน ( 25 จะ ) คือเพิ่มเป็น 3.9 มิลลิลิตรของสารละลาย Stock dpph ( 6 _ 10_5 M ) และปฏิกิริยาได้ถึงสองชั่วโมงในที่มืดที่อุณหภูมิห้อง ในตอนท้ายของการเกิดปฏิกิริยา , การดูดกลืนแสงของส่วนผสมที่ถูกวัดที่ 515 nm ใช้วัสดุในการทดสอบกระทำ Abbr ดังต่อไปนี้ขั้นตอนของ reet อัล ( 1999 ) สั้น ๆ , Abbr หัวรุนแรงไอออนบวก ( abts_ ) ถูกผลิตโดยปฏิกิริยาสารละลาย Stock Abbr ( 7 มม. ) กับโพแทสเซียมเพอร์ซัลเฟต ( ( มม. ) ในปริมาตรเท่ากัน และให้ส่วนผสมที่จะยืนในที่มืด 12 – 16 ชั่วโมงก่อนใช้ การเทศนาของ abts_ 1 มิลลิลิตร สารละลายเจือจางด้วย 60 ml เมทานอลกับการดูดกลืนแสงของ 0.70 ( ? } 0.02 ) ที่คุณ nm .abts_ สารละลายเจือจาง ( 1 มิลลิลิตร ) ผสมกับ 2.5 จะของตัวอย่างหรือสารและผสมได้รับอนุญาตให้สมดุลกัน 7 นาทีก่อนที่ค่าของที่คุณ nm วัด .