2.3. Polyphenol oxidase (PPO) assay

2.3. Polyphenol oxidase (PPO) assay and protein determination
Peel (3.0 g) from six fruits was homogenized in 10 ml of 0.02 M phosphate buffer (pH 6.8) at 4 ᵒC. The homogenate was centrifuged at 19 000 g (Beckman J20- 2) for 20 min and then supernatant was collected to assay PPO activity according to the method of Jiang (1999a), by measuring the oxidation of 4-methylca- techol. The increase in absorbance at 410 nm at 25ᵒC. was automatically recorded for 3 min, using a spectro- photometer (Beckman, DU-7), One unit of enzyme activity was defined as the amount which caused a change of 0.001 in absorbance per minute. The protein content was determined according to the dye-binding method of Bradford (1976) with albumin bovine serum as the standard.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.3. Polyphenol oxidase (PPO) วิเคราะห์และโปรตีนกำหนด เปลือก (3.0 g) จากผลไม้หกถูก homogenized เป็นกลุ่มใน 10 มล.ของ 0.02 M ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 6.8) ที่ 4 ᵒC Homogenate ถูก centrifuged ที่ g 19 000 (Beckman J20 - 2) สำหรับ 20 นาทีแล้ว supernatant ถูกรวบรวมเพื่อ assay PPO กิจกรรมตามวิธีการของเจียง (1999a), โดยวัดการเกิดออกซิเดชันของ 4-methylca-techol เพิ่ม absorbance ที่ 410 nm ที่ 25ᵒC ถูกบันทึกโดยอัตโนมัติใน 3 นาที ใช้ตัว spectro-เครื่องวัดความสว่าง (Beckman, DU-7), หน่วยหนึ่งของเอนไซม์ถูกกำหนดเป็นยอดที่ทำให้เกิดการเปลี่ยนแปลงของ 0.001 absorbance ต่อนาที โปรตีนที่ถูกกำหนดตามวิธีผูกย้อมของแบรดฟอร์ด (1976) กับซีรั่มวัว albumin เป็นมาตรฐาน

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.3 polyphenol oxidase (PPO) การทดสอบและความมุ่งมั่นโปรตีน
เปลือก (3.0 กรัม) จากหกผลไม้ทำให้เป็นเนื้อเดียวกันใน 10 มิลลิลิตร 0.02 M ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 6.8) 4 ᵒC homogenate ถูกหมุนเหวี่ยงที่ 19 000 กรัม (เบคค์ J20- 2) เป็นเวลา 20 นาทีและจากนั้นใสถูกเก็บรวบรวมเพื่อการวิเคราะห์กิจกรรม PPO ตามวิธีการของเจียง (1999a) โดยการวัดการเกิดออกซิเดชันของ 4 methylca- techol การเพิ่มขึ้นของการดูดกลืนแสงที่ 410 นาโนเมตรที่25ᵒC ได้รับการบันทึกโดยอัตโนมัติเป็นเวลา 3 นาทีโดยใช้มาตรวัด spectro- (เบคค์, DU-7) หนึ่งหน่วยของเอนไซม์ถูกกำหนดเป็นจำนวนเงินที่ก่อให้เกิดการเปลี่ยนแปลงในการดูดกลืนแสง 0.001 ต่อนาที ปริมาณโปรตีนที่ถูกกำหนดให้เป็นไปตามวิธีการย้อมผูกพันของแบรดฟอ (1976) กับซีรั่มอัลบูมิวัวเป็นมาตรฐาน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.3 polyphenol oxidase ( PPO ) ในการหาโปรตีนเปลือก ( 3.0 G )
6 ผลไม้บดใน 10 ml 0.02 M ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 6.8 ) ที่ 4 ᵒ C แยกเป็นระดับที่ 19 000 กรัม ( แบคแมน j20 - 2 ) สำหรับ 20 นาทีและจากนั้นนำรวบรวมเพื่อวิเคราะห์กิจกรรมของเอนไซม์ PPO ตาม วิธีการของเจียง ( 1999a ) โดยการวัดการเกิดออกซิเดชันของ 4-methylca - techol .การเพิ่มค่าการดูดกลืนแสงที่ 410 nm ที่ 25 ᵒ C ถูกบันทึกไว้โดยอัตโนมัติสำหรับ 3 นาทีโดยใช้ Spectro - โฟโตมิเตอร์ ( แบคแมน du-7 ) หนึ่งหน่วยของเอนไซม์ถูกกำหนดเป็นปริมาณซึ่งเกิดจากการเปลี่ยนแปลงของระดับในการดูดกลืนแสง ต่อ นาที ปริมาณโปรตีนถูกกำหนดตามวิธีการผูกสีย้อมของแบรดฟอร์ด ( 1976 ) ซีรั่มอัลบูมิวัว

เป็นมาตรฐาน