2. Materials and methods2.1. Field

2. Materials and methods
2.1. Field experiment
A field plot experiment was conducted in 2012–2013 at the University
of Minnesota's Southwest Research and Outreach Center in
Lamberton, MN, and two cooperating farm sites in Farmington and
Madison, MN. Soil classification at the Farmington site was a Wadena
loam (fine-loamy over sandy or sandy-skeletal, mixed, superactive,
mesic Typic Hapludolls); at the Lamberton site a Webster clay loam
(Fine-loamy, mixed, superactive, mesic Typic Endoaquolls), and at the
Madison site a Normania loam (fine-loamy, mixed, superactive, mesic
Aquic Hapludolls). All sites were certified organic for at least seven
950 A.L. Fernandez et al. / Science of the Total Environment 566–567 (2016) 949–959
years and under organic management for at least 15 years. At each site, a
randomized complete block experimental design was used with four
replicates. Eight experimental treatments were applied consisting
of four cover crops, three organic fertilizer additions, and a noamendment
control. Cover crops were hairy vetch (Vicia villosa), winter
rye (Secale cereale), oilseed radish (Raphanus sativus), and buckwheat
(Fagopyrum esculentum). Fertilizers were beef manure, pelleted poultry
manure (Chickety Doo Doos™, Unlimited Renewables, Onalaska, WI),
and Sustane® 8-2-4 (Sustane®, Cannon Falls, MN). Cover crops were
planted in August 2012 and fertilizers were applied and incorporated
in October 2012. Treatment details are shown in Supplementary
Table S1. The sites were tilled May 15–22, 2013 and planted to corn
May 25–30, 2013.
2.2. Sample collection
Corn yields were determined by collecting ears from a 6-foot length
of two rows of corn at three locations per plot at corn maturity October
12–20, 2013. Kernels were removed from cobs and dried before
weighing. Yields were adjusted to 15% moisture content.
Soil samples were collected in August 2012 prior to treatment application,
in May 2013 at first tillage, and between July 20–30, 2013 at the
V13 (late vegetative) stage. Sampling structure is outlined in Supplementary
Fig. S2. Bulk and corn rhizosphere soil samples were collected
from each plot in July 2013. Corn rhizosphere soil was obtained by shaking
corn roots in a solution of 0.1 M (NH4)3PO4 and 0.1% gelatin for
30 min to elutriate adhering soil (Kingsley and Bohlool, 1981). The recovered
suspension was centrifuged at 10,000 × g for 20 min to obtain
a pellet of rhizosphere soil and associated microbes. Bulk soil was sampled
with a hand probe to a depth of 10 cm. Two sets of bulk soil samples
were collected from each plot. One set was frozen at \20C
immediately upon arrival in the laboratory, and was subsequently
used for DNA extraction. The other set was placed in refrigerated storage
and submitted for chemical analysis at the University of MN Research
Analytical Laboratory (St. Paul, MN). All measured variables are
summarized in Table 1. Experimental sites, plot layout, and timing and
protocols for cover crop and fertilizer application and soil sampling
are described in detail elsewhere (Fernandez et al., unpublished, manuscript,
submitted).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2. วัสดุและวิธีการ2.1. การทดลองฟิลด์ดำเนินการทดลองพล็อตฟิลด์ใน 2555 – 2556 ที่มหาวิทยาลัยของศูนย์โครงการพัฒนาและวิจัยตะวันตกเฉียงใต้ของรัฐมินนิโซตาคลิน MN และเว็บไซต์ฟาร์มสองที่ให้ความร่วมมือในฟาร์มิงตัน และเมดิสัน MN การจำแนกดินที่ไซต์ฟาร์มิงตันได้ Wadenaloam (ไฟน์ loamy มากกว่าทราย หรือทรายโครงกระดูก ผสม superactivemesic Typic Hapludolls); ที่เว็บไซต์คลิน loam ดินเว็บสเตอร์(Fine loamy ผสม superactive, mesic Typic Endoaquolls), และการเว็บไซต์เมดิสันเป็น loam Normania (loamy ไฟน์ ผสม superactive, mesicAquic Hapludolls) เว็บไซต์ทั้งหมดได้รับการรับรองอินทรีย์น้อยเจ็ด950 A.L. เฟอร์นันเดร้อยเอ็ด / วิทยาศาสตร์สิ่งแวดล้อมรวม 566-567 (2016) 949-959ปี และภาย ใต้การจัดการอินทรีย์อย่างน้อย 15 ปี ที่แต่ละไซต์ การออกแบบการทดลองสุ่มสมบูรณ์บล็อกใช้กับสี่เหมือนกับ ใช้ทรีทเมนท์ทดลองแปดประกอบด้วยพืชปกคลุมสี่ สามเพิ่มปุ๋ยอินทรีย์ และ noamendment เป็นการควบคุม พืชปกคลุมมีขน vetch (Vicia villosa), ฤดูหนาวข้าวไรย์ (Secale cereale), หัวไชเท้า oilseed (Raphanus sativus), และโซบะ(Fagopyrum esculentum) ปุ๋ยได้ปุ๋ยเนื้อ สัตว์ปีกปุ๋ย (Chickety Doo Doos™ พลังงานทดแทนจำกัด Onalaska, WI),และ Sustane® 8-2-4 (Sustane® แคนนอนน้ำตก MN) มีพืชปกคลุมปลูกในเดือน 2012 สิงหาคม และปุ๋ยที่ใช้ และจดทะเบียนในเดือนตุลาคม รายละเอียดการรักษาแสดงในตีนจกS1 ตาราง ไซต์ถูกไถ 15 พฤษภาคม – 22, 2556 และปลูกข้าวโพด25 พฤษภาคม – 30, 20132.2. เก็บตัวอย่างกำหนดผลผลิตข้าวโพด โดยการเก็บหูจากความยาว 6 ฟุตของสองแถวของข้าวโพด 3 แห่งต่อพล็อตที่ข้าวโพดอายุตุลาคม12 – 20, 2013 เมล็ดถูกลบออกจากอินทรีย์แพ็ค และแห้งก่อนชั่งน้ำหนัก อัตราผลตอบแทนที่ปรับถึง 15% ความชื้นตัวอย่างดินที่ถูกเก็บรวบรวมในเดือน 2012 สิงหาคมก่อนที่โปรแกรมการรักษาพฤษภาคมพ.ศ. 2556 tillage แรก และ ระหว่าง 20 – 30 กรกฎาคม 2013 ที่การV13 (สายพืช) ขั้นตอนนี้ โครงสร้างการสุ่มตัวอย่างอธิบายในตีนจกรูป S2 ได้เก็บตัวอย่างดินไรโซสเฟียร์จำนวนมากและข้าวโพดจากพล็อตแต่ละเดือนกรกฎาคม 2013 ดินไรโซสเฟียร์ข้าวโพดได้รับ โดยการเขย่ารากข้าวโพดในสารละลาย 0.1 M (NH4) 3PO4 และ 0.1% วุ้นสำหรับ30 นาทีเพื่อ elutriate เกาะติดดิน (คิงสลีย์และ Bohlool, 1981) การกู้คืนระบบกันสะเทือนถูกจากที่ 10,000 × g 20 นาทีจะได้รับมีเม็ดไรโซสเฟียร์ดินและจุลินทรีย์ที่เกี่ยวข้อง ดินจำนวนมากเป็นตัวอย่างพร้อมโพรบมือได้ลึกถึง 10 ซม. สองชุดของจำนวนมากของดินตัวอย่างถูกรวบรวมจากพล็อตแต่ละ ชุดหนึ่งถูกแช่แข็งที่ \20Cทันทีที่มาถึงในห้องปฏิบัติการ และต่อมาใช้สำหรับการสกัดดีเอ็นเอ ชุดถูกวางไว้ในตู้เย็นเก็บและส่งเคมีวิเคราะห์ที่สถาบันวิจัยมหาวิทยาลัยของ MNห้องปฏิบัติการวิเคราะห์ (St. Paul, MN) มีตัวแปรที่วัดได้ทั้งหมดสรุปในตารางที่ 1 เว็บไซต์ทดลอง เค้าโครงพล็อต และการกำหนดเวลา และโพรโทคอลสำหรับฝาครอบตัด และการใส่ปุ๋ย และเก็บตัวอย่างดินอธิบายในรายละเอียดอื่น ๆ (เฟอร์นานเดซ et al. ยกเลิกประกาศ การเขียนส่ง)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. วัสดุและวิธีการ
2.1 ทดลอง
การทดลองวางแผนการทดลองได้ดำเนินการใน 2012-2013 ที่มหาวิทยาลัย
มินนิโซตาตะวันตกเฉียงใต้ของงานวิจัยและศูนย์บริการวิชาการใน
Lamberton, MN, และสองร่วมมือเว็บไซต์ฟาร์มในฟาร์และ
เมดิสัน, มินนิโซตา การจำแนกประเภทของดินที่เว็บไซต์ฟาร์วาดีนาเป็น
ดินร่วนปน (ดีกว่าดินร่วนปนทรายหรือทรายโครงผสม superactive,
Mesic Typic Hapludolls); ที่เว็บไซต์ Lamberton ดินดินร่วนปนเว็บสเตอร์
(ปรับดินร่วนผสม superactive, Mesic Typic Endoaquolls) และที่
เว็บไซต์แมดิสันดินร่วนปน Normania (ปรับดินร่วนผสม superactive, Mesic
Aquic Hapludolls) เว็บไซต์ทั้งหมดได้รับการรับรองอินทรีย์อย่างน้อยเจ็ด
950 อัลเฟอร์นันเด et al, / วิทยาศาสตร์สิ่งแวดล้อมรวม 566-567 (2016) 949-959
ปีและภายใต้การบริหารอินทรีย์อย่างน้อย 15 ปี ที่แต่ละเว็บไซต์มี
การออกแบบการทดลองแบบ RCB ถูกนำมาใช้กับสี่
ซ้ำ แปดรักษาทดลองใช้ซึ่งประกอบด้วย
สี่พืชคลุมสามเพิ่มเติมปุ๋ยอินทรีย์และ noamendment
ควบคุม พืชคลุมเป็นเถามีขนดก (ปาก villosa) ฤดูหนาว
ข้าว (cereale Secale) oilseed หัวไชเท้า (Raphanus sativus) และโซบะ
(Fagopyrum esculentum) ปุ๋ยเป็นเนื้อปุ๋ยเม็ดสัตว์ปีก
ปุ๋ยคอก (Chickety Doo Doos ™, Unlimited พลังงานทดแทน, โอนาแลสกา WI)
และSustane® 8-2-4 (Sustane®, Cannon Falls, MN) พืชคลุมถูก
ปลูกในเดือนสิงหาคมปี 2012 และถูกนำไปใช้ปุ๋ยและ บริษัท
ในเดือนตุลาคม 2012 รายละเอียดการรักษาจะแสดงในเสริม
ตาราง S1 เว็บไซต์ที่ถูกไถ 15-22 พฤษภาคม 2013 และปลูกข้าวโพด
25-30 พฤษภาคม 2013
2.2 การเก็บตัวอย่าง
อัตราผลตอบแทนข้าวโพดได้รับการพิจารณาโดยการเก็บรวบรวมหูจากความยาว 6 ฟุต
สองแถวของข้าวโพดที่สามสถานที่พล็อตต่อเมื่อครบกำหนดข้าวโพดเดือนตุลาคม
12-20 2013 เมล็ดออกจากซังและแห้งก่อนที่จะ
ชั่งน้ำหนัก อัตราผลตอบแทนที่ได้รับการปรับให้มีความชื้น 15%.
เก็บตัวอย่างดินในเดือนสิงหาคม 2012 ก่อนที่จะมีการประยุกต์ใช้การรักษา
พฤษภาคม 2013 ที่เตรียมดินก่อนและระหว่าง 20-30 กรกฎาคม 2013 ที่
V13 (พืชดึก) เวที โครงสร้างการสุ่มตัวอย่างถูกระบุไว้ในเสริม
รูป S2 จำนวนมากและบริเวณรากข้าวโพดเก็บตัวอย่างดิน
จากแต่ละล็อตในเดือนกรกฎาคม 2013 ข้าวโพดบริเวณรากของดินที่ได้รับโดยการเขย่า
รากข้าวโพดในสารละลาย 0.1 M (NH4) 3PO4 และเจลาติน 0.1% สำหรับ
30 นาทีถึง elutriate ยึดมั่นในดิน (คิงสลีย์และ Bohlool, 1981) หาย
ระงับถูกหมุนเหวี่ยงที่ 10,000 ×กรัมเป็นเวลา 20 นาทีเพื่อให้ได้
เม็ดของดินบริเวณรากและจุลินทรีย์ที่เกี่ยวข้อง ดินเป็นกลุ่มเป็นตัวอย่าง
ที่มีการสอบสวนมือเพื่อความลึก 10 เซนติเมตร สองชุดของตัวอย่างดินจำนวนมาก
ถูกเก็บรวบรวมจากแต่ละล็อต หนึ่งชุดที่ถูกแช่แข็ง \ 20C
ทันทีเมื่อเดินทางมาถึงในห้องปฏิบัติการและต่อมา
ใช้สำหรับการสกัดดีเอ็นเอ ชุดอื่น ๆ ที่อยู่ในการจัดเก็บในตู้เย็น
และส่งสำหรับการวิเคราะห์ทางเคมีที่มหาวิทยาลัยมินนิโซตาวิจัย
วิเคราะห์ทางห้องปฏิบัติการ ( St. Paul, MN) ตัวแปรที่วัดทั้งหมดจะ
สรุปในตารางที่ 1 เว็บไซต์ทดลองรูปแบบการพล็อตและการกำหนดเวลาและ
โปรโตคอลสำหรับพืชคลุมดินและใส่ปุ๋ยและการสุ่มตัวอย่างดิน
จะมีการอธิบายในรายละเอียดอื่น ๆ (เฟอร์นันเด et al., ไม่ได้ตีพิมพ์ต้นฉบับ
ส่ง)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2 . วัสดุและวิธีการ2.1 . สนามทดลองเป็นแปลงปลูกทดลองใน 2012 – 2013 ที่มหาวิทยาลัยมินนิโซตาทิศตะวันตกเฉียงใต้ของการวิจัยและเผยแพร่ ศูนย์ในแลมเบอร์เติ้น , MN , และสองร่วมมือฟาร์มเว็บไซต์ในฟาร์มิงตันและเมดิสัน , ) การจำแนกดินใน ฟาร์มิงตันเว็บไซต์เป็น Wadenaดินร่วนทราย หรือดินร่วนทราย ( ที่ดีกว่าการผสม superactive , , ,เมสิก typic hapludolls ) ; ที่เว็บไซต์เป็นดินร่วนดินเหนียวเว็บสเตอร์ แลมเบอร์เติ้น( ปรับอัตราการผสม superactive เมสิก , typic endoaquolls ) และที่เมดิสันเว็บไซต์ normania ดินร่วน ( ปรับอัตราการผสม superactive เมสิก ,aquic hapludolls ) เว็บไซต์ทั้งหมดได้รับการรับรองอินทรีย์สำหรับอย่างน้อยเจ็ด950 a.l. Fernandez et al . วิทยาศาสตร์สิ่งแวดล้อม ( จากทั้งหมด 566 567 ( 2016 ) 949 - 959ปี และภายใต้การจัดการเกษตรอินทรีย์อย่างน้อย 15 ปี ในแต่ละเว็บไซต์แผนการทดลองแบบ Randomized Complete Block Design ทดลองใช้กับสี่ได้แก่ การรักษาแปดทดลองใช้ประกอบด้วย4 พืชคลุม สามเพิ่มปุ๋ยอินทรีย์ และ noamendmentควบคุม พืชคลุมดินมีขนดกเวช ( วิเซีย ventricosa ) , ฤดูหนาวไรย์ ( secale ธัญพืช ) , oilseed หัวไชเท้า ( ผักกาดหัว ) และโซบะ( fagopyrum มะเขือเทศ ) ปุ๋ยมูลไก่อัดเม็ดมีเนื้อปุ๋ยคอก ( chickety Doo doos ™ไม่จํากัด , พลังงานทดแทน , โอนาวี )และ sustane ® 8-2-4 ( sustane ® แคนนอนฟอลส์ , มินนิโซตา ) ครอบคลุมพืชปลูกในเดือนสิงหาคม 2012 และปุ๋ยถูกประยุกต์และรวมในตุลาคม 2012 รายละเอียดการรักษาจะแสดงเพิ่มเติมตาราง S1 . เว็บไซต์ที่ถูกเพาะปลูก – 15 พฤษภาคม 22 , 2013 และการปลูกข้าวโพด25 พฤษภาคม– 30 , 20132.2 . ตัวอย่างคอลเลกชันผลผลิตข้าวโพดถูกกำหนดโดยเก็บหูจากความยาว 6 ฟุต2 แถวของข้าวโพดที่ 3 สถานที่ที่วุฒิภาวะต่อแปลงข้าวโพด ตุลาคม12 – 20 , 2013 เมล็ดออกจากฝักแห้งก่อนเครื่องชั่ง . ผลผลิตได้ปรับความชื้น 15 %เก็บตัวอย่างดินในเดือนสิงหาคม 2012 ก่อนการรักษาในเดือนพฤษภาคม 2013 ที่ไถพรวนก่อนและระหว่างวันที่ 20 – 30 , 2013 ที่v13 ( สายขาว ) เวที ตัวอย่างโครงสร้างที่ระบุไว้ใน เพิ่มเติมรูปที่ S2 . กลุ่มและตัวอย่างดินบริเวณรากข้าวโพดที่ศึกษาจากแต่ละจุดในเดือนกรกฎาคม 2013 ข้าวโพดในดินรอบรากพืชได้ โดยเขย่ารากข้าวโพดในสารละลาย 0.1 M ( NH4 ) 3po4 และ 0.1% เจลาติน30 นาทีเพื่อ elutriate ดินและคุณธรรม - bohlool , 1981 ) กู้คืนระงับคือระดับที่ 10 × G สำหรับ 20 นาที ที่จะได้รับเม็ดดินบริเวณรากและจุลินทรีย์ที่เกี่ยวข้อง เป็นกลุ่มตัวอย่างดินกับมือสอบสวนให้ลึก 10 ซม. สองชุดของตัวอย่างดินขนาดใหญ่รวบรวมจากแต่ละแปลง ชุดหนึ่งถูกแช่แข็งที่ 20Cทันทีเมื่อมาถึงในห้องปฏิบัติการ และต่อมาใช้สำหรับการสกัดดีเอ็นเอ ชุดอื่น ๆที่ถูกวางไว้ในตู้เก็บและการแสดงความคิดเห็นสำหรับการวิเคราะห์ทางเคมีที่มหาวิทยาลัยวิจัย MNห้องปฏิบัติการวิเคราะห์ ( St . Paul , MN ) วัดจากตัวแปรทั้งหมดสรุปได้ในตารางที่ 1 เว็บไซต์รูปแบบแปลงทดลอง และ เวลา และโปรโตคอลสำหรับพืชคลุมดินและปุ๋ยและดิน )จะอธิบายในรายละเอียดอื่น ๆ ( Fernandez et al . , พิมพ์ , เลข ,ส่ง )