2.3. Total FAMEs in rice bran
A Soxhlet extractor, equipped with a condenser system was
employed in this study. Rice bran (10 g) was wrapped with filter
paper and was placed inside the Soxhlet extractor. Neutral lipids,
such as fatty acids and acylglycerols, were extracted from the bran
with hexane (350 mL) as the solvent. Hexane was put in a 500mL
round-bottom flask and was heated. After predetermined time, the
extraction process was stopped, the flask that contained the desired
extract was removed and replaced immediately by another flask
that contained 350mL fresh hexane so that the total amount of
solvent remained the same as in the beginning of the run. The first
fraction, which was designated as the crude rice bran oil, CRBO, was
obtained by extracting with hexane for 4 h. Neutral lipids were not
detected in the next fraction, which was obtained after extracting
with solvent for another 4 h. The lipid content in rice bran was
calculated by the following equation:
Lipid content =
weight of hexane extract (g)
weight of rice bran (g)
× 100% (1)
CRBO was added to a 50mL tube with a Teflon-lined screw
cap as described by Shiu et al. (2010). Potassium hydroxide solution
(10 mL; 2 N) was added under nitrogen, and the tube was
closed with screw cap. The tube was then heated at 60 ◦C until
the saponification reaction was completed (overnight), as verified
by analytical TLC (silica gel; eluted with a mixture solvent,
hexane/ethyl-acetate/acetic-acid = 90:10:1, v/v/v). The mixture
containing saponified matter was acidified to pH 2 by using sulfuric
acid and the reaction was completed in about 1 day. Water was then
added to the mixture to stop the reaction, and unsaponifiable matter
was separated by extraction using n-hexane/water. The hexane
extract, which contains fatty acids, was collected and the hexane
was removed.
The fatty acids were then converted into their corresponding
fatty acid methyl esters (FAMEs) by heating with sulfuric acid
in methanol at 60 ◦C and the reaction was completed in about 1
day, as verified by analytical TLC (silica gel; eluted with a mixture
solvent, hexane/ethyl-acetate/acetic-acid = 90:10:1, v/v/v). FAMEs
were separated by extraction using n-hexane/water. The hexane
extract, which contains FAMEs, was collected. After the hexane was
removed, the remaining substance was referred to as the reaction
product. The product was analyzed by TLC and gas chromatography
(GC).
2.3 รวมสารใน
น้ำมันรำข้าวเป็น Soxhlet Extractor , ติดตั้งระบบคอนเดนเซอร์เป็น
ที่ใช้ในการศึกษาครั้งนี้ น้ำมันรำข้าว ( 10 กรัม ) ถูกห่อด้วยไส้กรอง
กระดาษและวางไว้ใน Soxhlet Extractor . ไขมันที่เป็นกลาง
เช่นกรดไขมันและ acylglycerols ถูกสกัดจากรำข้าว
ด้วยเฮกเซน ( 350 ml ) เป็นตัวทำละลาย เฮกเซนถูกวางในขวด 500ml
ก้นกลมและอุ่นหลังจากกำหนดเวลา
กระบวนการสกัดหยุดรถ ขวดที่บรรจุสารที่ต้องการถูกถอดออกและแทนที่ทันที
อีกขวดที่อยู่สดฤทธิ์ 350ml ดังนั้นจำนวน
ตัวทำละลายยังคงเหมือนในช่วงแรก ๆของรัน ส่วนแรก
ซึ่งเป็นเขตที่สกัดน้ํามันรําข้าว crbo
, ,ได้มาจากการสกัดด้วยเฮกเซนเป็นเวลา 4 ชั่วโมง เป็นกลาง ไขมันไม่ได้
ที่ตรวจพบในส่วนถัดไป ซึ่งได้รับหลังจากการสกัดด้วยตัวทำละลาย
อีก 4 ชั่วโมง ปริมาณไขมันในรำข้าวคือ
คำนวณโดยสมการต่อไปนี้ :
=
ไขมันน้ำหนักของเฮกเซนสกัด ( G )
น้ำหนักของน้ำมันรำข้าว ( G )
× 100 % ( 1 )
crbo คือเพิ่มหลอด 50ml ด้วย Teflon เรียงรายสกรู
หมวกตามที่อธิบายไว้โดยชิว et al . ( 2010 ) สารละลายโพแทสเซียมไฮดรอกไซด์ ( 10 ml ;
2 n ) คือเพิ่มภายใต้ไนโตรเจน และท่อ
ปิดด้วยฝาเกลียว . หลอดให้ความร้อนที่ 60 องศาเซลเซียส จึง◦
ปฏิกิริยาสปอนนิฟิเคชั่นจนแล้วเสร็จ ( ค้างคืน ) , ตรวจสอบวิเคราะห์
โดย TLC ( ซิลิกาเจล ; ตัวอย่างผสมกับตัวทำละลาย เฮกเซน เอทิลอะซิเตท
/ / กรด 90:10:1 = V / V / V ) ส่วนผสม
ที่มีการดูดซึมเป็นเรื่องปรับพีเอชเป็น 2 โดยใช้กรดซัลฟูริก
และปฏิกิริยาที่เสร็จใน 1 วัน น้ำแล้ว
เพิ่มส่วนผสมเพื่อหยุดปฏิกิริยา และ unsaponifiable เรื่อง
แยกด้วยการสกัดบีบ / น้ำ ส่วนสกัดเฮกเซน
ซึ่งประกอบด้วยกรดไขมันที่ถูกรวบรวมและเฮกเซน
ถูกลบออกกรดไขมันถูกแปลงแล้วลงในที่สอดคล้องกัน
กรดไขมันเมทิลเอสเทอร์ ( FAMEs ) โดยความร้อนกับ
กรดกำมะถันในเมทานอลที่ 60 ◦ C และปฏิกิริยาแล้วเสร็จประมาณ 1 วัน
เป็น โดยการ วิเคราะห์ TLC ซิลิกาเจล ; ตัวอย่างที่มีส่วนผสม
ตัวทำละลาย เฮกเซน เอทิลอะซิเตท = / / กรดส้ม 90:10:1 , V / V / V ) แยกได้จากการสกัดสาร
บีบ / น้ำ ส่วนสกัดเฮกเซน
,ซึ่งประกอบด้วยสาร , รวบรวม หลังจากที่เฮกเซนถูก
ลบออก สารที่เหลืออยู่ถูกเรียกว่าผลิตภัณฑ์ปฏิกิริยา
ผลิตภัณฑ์และวิเคราะห์โดยแก๊สโครมาโตกราฟี
( GC )
การแปล กรุณารอสักครู่..
