Rubisco activity was determined spe

Rubisco activity was determined spectrophotometrically by coupling 3-phosphoglyceric acid formation with NADH oxidation at 25 ◦C according to Nakano et al. [26] with some modifications.
The total activity was assayed after the crude extract was activated in a 0.2 mL activation mixture containing 50 mM HEPES–NaOH, pH 8.0, 0.67 mM EDTA, 33 mM MgCl2, and 10 mM NaHCO3 for 10 min.
Initial Rubisco activity measurements were carried out in a 0.9 mL reaction medium containing 50 mM HEPES–NaOH (pH 8.0),
10 mM NaHCO3, 20 mM MgCl2, 2.5 mM dithiothreitol, 1 mM EDTA, 10 U creatine phosphokinase, 10 U 3-phosphoglyceric phosphokinase, 10 U glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase, 5 mM ATP,
0.15 mM NADH, 5 mM phosphocreatine, 0.6 mM RuBP, and 0.1 mL extract. The change in absorbance at 340 nm was monitored for
90 s.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

กิจกรรม Rubisco ถูกกำหนด spectrophotometrically โดยการแต่งงานการสร้างกรด 3 phosphoglyceric กับ NADH ออกซิเดชันที่อุณหภูมิ 25 ◦Cตาม Nakano และคณะ [26] ด้วยการปรับเปลี่ยนบาง
กิจกรรมทั้งหมดได้รับการวิเคราะห์หลังจากที่สารสกัดหยาบที่ถูกเปิดใช้งานในส่วนผสม 0.2 มิลลิลิตรยืนยันการใช้งานที่มีขนาด 50 มม HEPES-NaOH พีเอช 8.0, 0.67 มิลลิ EDTA, 33 มิลลิเมตร MgCl2 และ 10 มิลลิ NaHCO3 เป็นเวลา 10 นาที
เริ่มต้น Rubisco วัดกิจกรรมได้ดำเนินการในกลาง 0.9 มิลลิลิตรปฏิกิริยาที่มีขนาด 50 มม HEPES-NaOH (pH 8.0),
10 MM NaHCO3, 20 มิลลิ MgCl2, 2.5 มิลลิ dithiothreitol, 1 มิลลิ EDTA, 10 U phosphokinase Creatine, 10 U 3 phosphoglyceric phosphokinase, 10 U dehydrogenase glyceraldehyde-3-ฟอสเฟต 5 มิลลิเอทีพี
0.15 มิลลิ NADH, 5 มิลลิ phosphocreatine, 0.6 มิลลิ RuBP และสารสกัดจาก 0.1 มิลลิลิตร การเปลี่ยนแปลงในการดูดกลืนแสงที่ 340 นาโนเมตรได้รับการตรวจสอบสำหรับ
90 S

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

กิจกรรม rubisco ตั้งใจนี้ควบคู่ 3-phosphoglyceric กรดเกิดกับการออกซิเดชันที่อุณหภูมิ 25 C ตาม◦นากา et al . [ 26 ] กับการปรับเปลี่ยนบางอย่าง .
กิจกรรมทั้งหมดถูก assayed หลังจากสกัดถูกใช้งานในการกระตุ้น 0.2 มล. ผสมที่ประกอบด้วย 50 มิลฮีเปส ( NaOH , pH 8.0 , 0.67 มม. EDTA , MgCl2 33 มม. และ 10 มม. 10 นาที
โซเดียมไบคาร์บอเนตการวัดกิจกรรม rubisco เริ่มต้นดำเนินการใน 0.9 ml ปฏิกิริยาปานกลาง ประกอบด้วย 50 mm ฮีเปส ( NaOH ( pH 8.0 )
โซเดี่ยม 10 มม. ชุด 20 มม. บัตรแข็ง 2.5 มม. 1 mM EDTA 10 U U 3-phosphoglyceric Creatine phosphokinase 10 5 , 10 และ glyceraldehyde-3-phosphate เอนไซม์ ATP , NADH 0.15 mm
5 มิลลิเมตร phosphocreatine , 5 มม. rubp 0.6 มิลลิเมตร และ 0.1 มิลลิลิตร สารสกัดการเปลี่ยนแปลงในการดูดกลืนแสงที่ 340 nm คือการตรวจสอบ
90 s