The cold set WPI microbeads were manufactured as described
by Egan, Jacquier, Rosenberg, and Rosenberg (2013b). The WPI
was rehydrated in deionised water (containing 0.02% sodium
azide) under magnetic stirring to 10% w/w on a protein basis,
and left to stand overnight at 4 C to allow hydration of the proteins.
The solution was denatured by heating to 80 C and holding
for 30 min in a shaking water bath (model DMS360, Fisher Scientific,
Dublin, Ireland) and subsequently cooled to 25 C in ice water.
The heat denatured WPI (pH 6.8, 15 ml) was dispensed at 20 C
through a 10 ll pipette tip using a variable speed transfer pump
(Gilson minipuls 2, Villiers-le-Bel, France) at a rate of 0.6 ml per
minute into 100 ml of 100 mM calcium chloride cross-linking solution
to produce microbeads. Microbeads were 1.8 mm in diameter
with a pI of 4.7. These beads were stored in the calcium chloride for
24 h at 4 C followed by multiple rinses with deionised water.
The cold set WPI microbeads were manufactured as describedby Egan, Jacquier, Rosenberg, and Rosenberg (2013b). The WPIwas rehydrated in deionised water (containing 0.02% sodiumazide) under magnetic stirring to 10% w/w on a protein basis,and left to stand overnight at 4 C to allow hydration of the proteins.The solution was denatured by heating to 80 C and holdingfor 30 min in a shaking water bath (model DMS360, Fisher Scientific,Dublin, Ireland) and subsequently cooled to 25 C in ice water.The heat denatured WPI (pH 6.8, 15 ml) was dispensed at 20 Cthrough a 10 ll pipette tip using a variable speed transfer pump(Gilson minipuls 2, Villiers-le-Bel, France) at a rate of 0.6 ml perminute into 100 ml of 100 mM calcium chloride cross-linking solutionto produce microbeads. Microbeads were 1.8 mm in diameterwith a pI of 4.7. These beads were stored in the calcium chloride for24 h at 4 C followed by multiple rinses with deionised water.
การแปล กรุณารอสักครู่..
ชุดเย็น Microbeads WPI กำลังการผลิตตามที่อธิบายไว้
โดย Egan, Jacquier, โรเซนเบิร์กและโรเซ็นเบิร์ก (2013b) WPI
ได้รับการคืนรูปในน้ำ deionised (ที่มี 0.02% โซเดียม
azide) ภายใต้กวนแม่เหล็กถึง 10% w / w ในการพื้นฐานโปรตีน
และทิ้งให้ยืนค้างคืนที่ 4 องศาเซลเซียสเพื่อให้ความชุ่มชื้นของโปรตีน.
แก้ปัญหาถูกเอทิลแอลกอฮอล์ด้วยความร้อน ถึง 80 องศาเซลเซียสและถือ
เป็นเวลา 30 นาทีในอ่างน้ำสั่น (รุ่น DMS360, Fisher Scientific,
ดับลิน, ไอร์แลนด์) และต่อมาระบายความร้อนถึง 25 องศาเซลเซียสในน้ำน้ำแข็ง.
ความร้อนเอทิลแอลกอฮอล์ WPI (pH 6.8, 15 มล.) ได้รับการจ่ายที่ 20 องศาเซลเซียส
ผ่าน 10 LL ปลายปิเปตโดยใช้ปั๊มโอนความเร็วตัวแปร
(Gilson minipuls 2 Villiers-le-Bel, ฝรั่งเศส) ในอัตรา 0.6 มิลลิลิตรต่อ
นาทีเป็น 100 มล. 100 แคลเซียมคลอไรด์มิลลิแก้ปัญหาข้ามการเชื่อมโยง
การผลิต Microbeads Microbeads เป็น 1.8 มม
กับ pI 4.7 ลูกปัดเหล่านี้ถูกเก็บไว้ในแคลเซียมคลอไรด์สำหรับ
24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียสตามด้วยการล้างด้วยน้ำสะอาดหลาย deionised
การแปล กรุณารอสักครู่..