2.7. Bacterial challenge and antibo

2.7. Bacterial challenge and antibody titer

A frozen stock-culture of S. iniae (ARS 98-60) from an outbreak of streptococcal disease in Nile tilapia was grown in tryptic soy broth (TSB) at 25 °C with shaking at 100 rpm for 24 h.

The concentration of the culture was adjusted to an optical density of 1.0 measured on a Shimadzu UV-1601 spectrophotometer (Shimadzu Scientific Instruments, Inc., Norcross, Georgia) at 540 nm to give a S. iniae concentration of 1×109 colony forming units (CFU)/mL.

At the end of the 12-week feeding period, twenty remaining fish per aquarium were randomly selected and intra-peritoneally (IP) injected with 0.1 mL of 1×106 cfu/mL of S. iniae (1×105 cfu/fish) using a tuberculin syringe.

They continued to receive their respective diets.

Fish were monitored and mortality was recorded twice daily for 15 days following injection and dead fish were removed.

At the end of the S. iniae challenge trial, blood samples were collected from four randomly chosen surviving fish and serum was collected following centrifugation.

Agglutinating antibody titers against S. iniae in pre- and post-challenge serum samples were determined by modifying the method of Chen and Light as described in Yildirim-Aksoy et al.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.7. แบคทีเรีย titer ท้าทายและแอนติบอดีแช่แข็งหุ้นวัฒนธรรมของ S. iniae (อาอาร์ส 98-60) จากการระบาดของโรค streptococcal ในไนล์นิลถูกปลูกในซุปถั่วเหลือง tryptic (TSB) ที่ 25 ° C ด้วยการสั่นที่รอบต่อนาทีที่ 100 ใน 24 ชมความเข้มข้นของวัฒนธรรมถูกปรับปรุงให้มีความหนาแน่นแสง 1.0 บนเป็น Shimadzu UV-1601 เครื่องทดสอบกรดด่าง (เครื่องมือวิทยาศาสตร์ Shimadzu, Inc., Norcross จอร์เจีย) ที่ 540 nm เพื่อให้ขึ้นรูปหน่วยโคโลนี (CFU) เป็น S. iniae เข้มข้น 1 × 109 / mLในตอนท้ายของรอบระยะเวลา 12 สัปดาห์ให้อาหาร ปลาเหลือยี่สิบต่อสัตว์ถูกสุ่มเลือก และ intra-peritoneally (IP) ฉีด ด้วย 0.1 mL ของ 1 × 106 cfu/mL ของ S. iniae (1 × 105 cfu/ปลา) การใช้เข็ม tuberculinพวกเขายังคงได้รับอาหารของพวกเขาเกี่ยวข้องปลาถูกตรวจสอบ และการตายถูกบันทึกสองทุก 15 วันต่อการฉีด และปลาที่ตายออกในตอนท้ายของ S. iniae ท้าทายทดลอง ตัวอย่างเลือดที่เก็บจากปลารอดตายท่านสุ่มสี่ และเซรั่มรวบรวมต่อ centrifugationAgglutinating แอนติบอดี titers ต่อ S. iniae ในก่อนและหลังท้าทายตัวอย่างซีรั่มถูกกำหนด โดยการปรับเปลี่ยนวิธีการของเฉินและแสงตามที่อธิบายไว้ใน Yildirim Aksoy et al

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.7 ท้าทายแบคทีเรียและแอนติบอดีแช่แข็งหุ้นวัฒนธรรมของเชื้อ S. iniae (ARS 98-60) จากการระบาดของโรคเชื้อในปลานิลได้รับการปลูกในน้ำซุปถั่วเหลือง tryptic (TSB) ที่ 25 ° C ในการเขย่า 100 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 24 ชั่วโมง . ความเข้มข้นของวัฒนธรรมได้รับการปรับเปลี่ยนให้มีความหนาแน่นของออปติคอล 1.0 วัด Shimadzu Spectrophotometer UV-1601 (Shimadzu เครื่องมือทางวิทยาศาสตร์, Inc, แอตแลนตา, จอร์เจีย) ที่ 540 นาโนเมตรเพื่อให้เชื้อ S. iniae เข้มข้น 1 × 109 โคโลนี หน่วย (CFU) / มล. ในตอนท้ายของระยะเวลาการให้อาหาร 12 สัปดาห์ยี่สิบปลาที่เหลือต่อพิพิธภัณฑ์สัตว์น้ำได้รับการคัดเลือกแบบสุ่มและภายใน peritoneally (IP) ฉีด 0.1 มล 1 × 106 โคโลนี / มิลลิลิตรของเชื้อ S. iniae (1 × 105 cfu / ปลา) โดยใช้เข็มฉีดยาวัณโรค. พวกเขายังคงได้รับอาหารของตน. ปลาจะถูกตรวจสอบและการเสียชีวิตได้รับการบันทึกวันละสองครั้งเป็นเวลา 15 วันต่อไปนี้การฉีดและปลาที่ตายแล้วถูกถอดออก. ในตอนท้ายของเชื้อ S. iniae ทดลองท้าทาย เก็บตัวอย่างเลือดจากสี่สุ่มเลือกที่รอดตายปลาและซีรั่มที่เก็บต่อไปนี้การหมุนเหวี่ยง. Agglutinating ระดับแอนติบอดีต่อเชื้อ S. iniae ในก่อนและหลังการท้าทายตัวอย่างซีรั่มได้รับการพิจารณาโดยการปรับเปลี่ยนวิธีการของเฉินและแสงตามที่อธิบายไว้ใน Yildirim-Aksoy และ อัล

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.7 . และความท้าทายของแอนติบอดีได้

สินค้าแช่แข็งวัฒนธรรมของสหรัฐอเมริกา iniae ( ARS 98-60 ) จากการระบาดของโรคในปลานิล streptococcal ปลูกในน้ำซุปถั่วเหลืองอาหาร ( TSB ) ที่อุณหภูมิ 25 ° C สั่นที่ 100 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 24 ชั่วโมง

ความเข้มข้นของวัฒนธรรมคือปรับแสงสำหรับตรวจวัดความหนาแน่น ใน uv-1601 Shimadzu Spectrophotometer ( Shimadzu เครื่องมือวิทยาศาสตร์ )นอร์ครอส , จอร์เจีย ) 540 nm ให้เอส iniae เข้มข้น 1 × 109 อาณานิคมสร้างหน่วย ( CFU / ml )

ที่จุดสิ้นสุดของระยะเวลา 12 สัปดาห์ ยี่สิบที่เหลือต่อตู้ปลาปลาสุ่มและภายใน peritoneally ( IP ) ฉีด 0.1 มิลลิลิตร 1 × 106 cfu / ml . iniae ( 1 × 105 CFU / ปลา ) โดยใช้เข็มฉีดยาวัณโรค

ที่พวกเขายังคงได้รับตน diets .

ปลาที่ได้ตรวจสอบและอัตราการตายที่ถูกบันทึกไว้สองครั้งทุกวันเป็นเวลา 15 วัน ตามการฉีดและปลาตายถูกเอาออก

ที่ส่วนท้ายของ S . iniae ท้าทายศาล การเก็บตัวอย่างเลือดจากสี่สุ่มเลือกจากปลาและเซรั่มเพื่อปั่นต่อไป

) โดยสิงสถิตย์กับเอสiniae ใน pre - และตัวอย่างซีรั่มโพสต์ถูกท้าทายโดยการปรับเปลี่ยนวิธีการของ เฉิน และ แสงตามที่อธิบายไว้ใน ยิลดิริม aksoy et al .