Neutrophils (2 106 cells/mL) were suspended in an
RPMI culture medium, supplemented with gentamicin
(100 mg/mL), L-glutamine (2 mM) and 10% fetal bovine
serum. Then the cells were incubated in duplicate in 96-
well plates with BbV at concentrations of 1.5, 3, 6, 12.5,
25, 50 e 100 mg/mL or RPMI (control) for 2 and 15 h, at 37 C
in a humid atmosphere (5% CO2). Next, 10 mL of MTT (5 mg/
mL) was added and incubated for 2 h. After centrifugation
at 400 g for 5 min, the supernatant was removed and
100 mL of DMSO was added to dissolve the crystals that
formed. Subsequently, the plates were kept for 18 h at room
temperature. The crystals of formazam formed were evaluated
in a spectrophotometer at 540 nm. The results were
expressed in terms of optical density compared to the
control.
นิวโทรฟิล (2 106 เซลล์/มิลลิลิตร) ถูกหยุดชั่วคราวในการสื่อวัฒนธรรม RPMI เสริมกับ gentamicin(100 มิลลิกรัม/มิลลิลิตร), L-กลูตา (2 มม.) และ 10% ทารกวัวซีรั่ม แล้ว เซลล์ได้รับการกกในซ้ำใน 96-จานดี BbV ที่ความเข้มข้น 1.5, 3, 6, 12.525, 50 e 100 mg/mL หรือ RPMI (ควบคุม) 2 และ h, c เป็น 37 15ในบรรยากาศชื้น (5% CO2) ถัดไป 10 mL ของ MTT (5 มิลลิกรัม /มิลลิลิตร) ถูกเพิ่ม และรับการกก 2 ชม หลังจากหมุนเหวี่ยงเอา supernatant ที่เวลา 5 นาที 400 กรัม และ100 มิลลิลิตรของ DMSO ถูกละลายผลึกที่รูปแบบที่ ต่อมา แผ่นจะถูกเก็บไว้สำหรับ 18 h ห้องอุณหภูมิ ผลึกของ formazam ที่เกิดขึ้นถูกประเมินในสเปคที่ 540 nm ผลได้แสดงในแง่เปรียบเทียบกับความหนาแน่นออปติคอลการการควบคุม
การแปล กรุณารอสักครู่..
Neutrophils (2? 106 เซลล์ / มิลลิลิตร) ถูกระงับใน
อาหารเลี้ยง RPMI เสริมด้วย gentamicin
(100 mg / ml), L-Glutamine (2 มิลลิเมตร) และ 10% ของทารกในครรภ์วัว
ซีรั่ม จากนั้นเซลล์ถูกบ่มในที่ซ้ำกันใน 96
แผ่นได้ดีกับ BBV ที่ระดับความเข้มข้น 1.5, 3, 6, 12.5,
25, 50 E 100 mg / ml หรือ RPMI (Control) สำหรับ 2 และ 15 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส
ใน บรรยากาศชื้น (5% CO2) ถัดไป 10 มล MTT (5 มิลลิกรัม /
มิลลิลิตร) ถูกบันทึกและบ่มเป็นเวลา 2 ชั่วโมง หลังจากการหมุนเหวี่ยง
ที่ 400? กรัมเป็นเวลา 5 นาที, สารละลายจะถูกลบออกและ
100 มล DMSO ถูกเพิ่มเข้ามาในการละลายผลึกที่
เกิดขึ้น ต่อมาแผ่นที่ถูกเก็บไว้เป็นเวลา 18 ชั่วโมงที่ห้อง
อุณหภูมิ ผลึกของ formazam รูปแบบที่ได้รับการประเมิน
ในสเปกที่ 540 นาโนเมตร ผลการวิจัยที่
แสดงในแง่ของความหนาแน่นของแสงเมื่อเทียบกับ
การควบคุม
การแปล กรุณารอสักครู่..
นิวโทรฟิล ( 2 106 เซลล์ / มิลลิลิตร ) ถูกระงับในอาหารเลี้ยงเชื้อ RPMI เสริมด้วยยาเจนตาไมซิน( 100 mg / ml ) , Glutamine ( 2 มม. ) และ 10% fetal bovineเซรั่ม แล้วเซลล์ก็บ่มในซ้ำใน 96 -แต่จานกับ bbv ที่ความเข้มข้น 1 , 3 , 6 , 12.5 ,25 , 100 mg / ml หรือ RPMI 50 E ( ควบคุม ) 2 และ 15 ชั่วโมง ที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสในบรรยากาศชื้น ( คาร์บอนไดออกไซด์ 5 เปอร์เซ็นต์ ) ถัดไป 10 ml ของ MTT ( 5 มิลลิกรัม ต่อลิตรมิลลิลิตร ) คือการเพิ่มและบ่มเป็นเวลา 2 ชั่วโมง หลังการปั่นเหวี่ยงที่ 400 กรัม เป็นเวลา 5 นาที นำออก และ100 มิลลิลิตรของ DMSO ถูกเพิ่มเพื่อละลายผลึกนั้นรูปแบบ ต่อมาจานเก็บ 18 H ที่ห้องอุณหภูมิ ผลึกของ formazam เกิดขึ้น ได้แก่ในเครื่อง 540 นาโนเมตร ผลคือแสดงออกในแง่ของความหนาแน่นของแสงเมื่อเทียบกับควบคุม
การแปล กรุณารอสักครู่..