Freezing and thawing of sorted sper

Freezing and thawing of sorted sperm was done as
described [8], but only in experiment IV. Approximately
5
106 bulk (both X- and Y-bearing sperm) sorted sperm
were collected into tubes containing catch fluid composed
of TRIS buffer with egg yolk [8]. Collection tubes were
placed in a cold room at 5 C for at least 90 minutes before
addition of an equal amount of TRIS buffer with 12%
glycerol added in two aliquots, 15 minutes apart (final
concentration, 6% glycerol). After addition of the second
aliquot, tubes were centrifuged for 20 minutes at 850
g.
The supernatant, composed of the accumulated fluids of
seminal plasma, TALP, catch fluid, and sheath fluid was
decanted, and sperm concentration of the remaining pellet
was determined using a nucleocounter. TRIS buffer with 6%
glycerol and 20% egg yolk was then added to create a final
sperm concentration of 107 sperm per mL for packaging
into 0.25 mL straws. Straws were placed on racks in liquid
nitrogen vapor (120 C) for 25 minutes, and then plunged
into liquid nitrogen (196 C) for storage. The total time
sperm were at 5 C before freezing ranged from 3 to
4 hours.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

แช่แข็ง และละลายของสเปิร์มเรียงทำเป็นอธิบาย [8], แต่เฉพาะในทดลอง IV ประมาณ5 106 จำนวนมาก (ทั้งอสุจิ X และ Y-แบริ่ง) เรียงสเปิร์มเก็บรวบรวมลงในหลอดที่ประกอบด้วยน้ำยาจับประกอบด้วยทริสเรทติ้งบัฟเฟอร์ด้วยไข่แดง [8] หลอดคอลเลกชันวางไว้ในห้องเย็นที่ 5 C อย่างน้อย 90 นาทีก่อนนอกจากนี้ของทั้งทริสเรทติ้งบัฟเฟอร์มี 12%กลีเซอรอลเพิ่มในสอง aliquots, 15 นาทีที่ออกจากกัน (รอบสุดท้ายความเข้มข้น กลีเซอรอล 6%) หลังจากที่สองทั้ง ท่อได้จาก 20 นาทีที่ 850 กรัมประกอบด้วยของเหลวสะสมของ supernatantจับพลาสม่าบรรลุ TALP ของเหลว และก็น้ำฝักการดีแคนติ้ง และความเข้มข้นของตัวอสุจิของเม็ดที่เหลือพิจารณาใช้เป็น nucleocounter ทริสเรทติ้งบัฟเฟอร์กับ 6%กลีเซอรอลและ 20% ไข่แดงจากนั้นถูกสร้างเป็นครั้งสุดท้ายความเข้มข้นของตัวอสุจิของสเปิร์ม 107 ต่อ mL สำหรับบรรจุภัณฑ์ลงในหลอด 0.25 mL หลอดที่อยู่บนชั้นในของเหลวไนโตรเจนไอ (120 C) 25 นาที และกระโจนแล้วลงในไนโตรเจนเหลว (196 C) สำหรับการจัดเก็บ เวลาทั้งหมดสเปิร์มได้ที่ 5 C ก่อนแช่แข็ง ranged จาก 3 เพื่อ4 ชั่วโมง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

แช่แข็งและละลายของตัวอสุจิเรียงได้ทำตามที่
อธิบายไว้ [8] แต่ในการทดลอง IV ประมาณ
5? 106 กลุ่ม (ทั้ง X และ Y แบริ่งสเปิร์ม) เรียงตัวอสุจิ
ที่ถูกเก็บลงในท่อที่มีการจับของเหลวประกอบด้วย
ของทริสเรทติ้งบัฟเฟอร์กับไข่แดง [8] หลอดเก็บถูก
วางไว้ในห้องเย็นที่อุณหภูมิ 5 องศาเซลเซียสเป็นเวลาอย่างน้อย 90 นาทีก่อนที่
การเพิ่มขึ้นของจำนวนเงินที่เท่ากันของทริสเรทติ้งบัฟเฟอร์กับ 12%
กลีเซอรอลเพิ่มในสอง aliquots 15 นาทีออกจากกัน (สุดท้าย
เข้มข้น 6% กลีเซอรอล) หลังจากที่นอกเหนือจากที่สอง
หารหลอดถูกปั่นเป็นเวลา 20 นาทีที่ 850? G.
ใสประกอบด้วยของเหลวสะสมของ
พลาสม่าน้ำเชื้อ TALP ของเหลวจับและของเหลวฝักถูก
decanted และความเข้มข้นของสเปิร์มของเม็ดที่เหลือ
ได้รับการพิจารณาโดยใช้ nucleocounter ทริสเรทติ้งบัฟเฟอร์กับ 6%
กลีเซอรอลและไข่แดง 20% ถูกเพิ่มเข้ามาแล้วจะสร้างเป็นครั้งสุดท้าย
ความเข้มข้นของสเปิร์มของสเปิร์มต่อ 107 มิลลิลิตรสำหรับบรรจุภัณฑ์
เข้า 0.25 มลหลอด หลอดถูกวางไว้บนชั้นวางในของเหลว
ไอไนโตรเจน (? 120? C) เป็นเวลา 25 นาทีแล้วกระโจน
ลงไปในไนโตรเจนเหลว (? 196? C) สำหรับการจัดเก็บ รวมเวลาที่
สเปิร์มอยู่ที่ 5 องศาเซลเซียสก่อนที่จะแช่แข็งตั้งแต่ 3 ที่จะ
4 ชั่วโมง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การแช่แข็งและละลายของสเปิร์มเป็นเรียงอธิบาย [ 8 ] , แต่ในการทดลองประมาณ IV5 106 กลุ่ม ( ทั้ง X และ y-bearing สเปิร์มสเปิร์ม ) เรียงถูกเก็บลงในหลอดที่มีจับของเหลว ประกอบด้วยของ บริษัท บัฟเฟอร์กับไข่แดง [ 8 ] หลอดคอลเลกชันคือวางไว้ในห้องเย็นที่ 5 องศาเซลเซียสเป็นเวลาอย่างน้อย 90 นาที ก่อนเพิ่มจํานวนเท่าของทริสบัฟเฟอร์กับ 12 เปอร์เซ็นต์กลีเซอรอลเพิ่มสองเฉยๆ ห่างกัน 15 นาที สุดท้ายความเข้มข้นร้อยละ 6 กลีเซอรอล ) หลังจากเพิ่มสองส่วนลงตัว หลอดอยู่ที่ระดับ 20 นาทีที่ 850 กรัมส่วนนำ ประกอบด้วยการสะสมของเหลวของtalp จับน้ำอสุจิ , ของเหลว , ของเหลว , และปลอกริน และความเข้มข้นของอสุจิของเม็ดที่เหลือตั้งใจใช้ nucleocounter . บริษัทเฟอร์กับ 6 เปอร์เซ็นต์กลีเซอรอลและ 20% ไข่แดงก็เพิ่มสร้างสุดท้ายความเข้มข้นของสเปิร์มสเปิร์ม 107 ต่อมิลลิลิตรสำหรับบรรจุภัณฑ์ลง 0.25 ml . หลอด หลอดที่ถูกวางไว้บนชั้นวาง ในของเหลวไอไนโตรเจน ( 120 องศาเซลเซียส ประมาณ 25 นาที แล้วกระโจนในไนโตรเจนเหลว ( 196 C ) สำหรับการจัดเก็บ เวลาทั้งหมดสเปิร์มที่ 5 C ก่อนการแช่แข็งตั้งแต่ 34 ชั่วโมง