RESULTS AND DISCUSSIONThe protocol

RESULTS AND DISCUSSION
The protocol described was found to be suitable for the
extraction of genomic DNA from minute quantities of
mycorrhizal samples. The DNA yield was approximately
2 and 5 ng ll
±1 with the endo- and ecto-mycorrhizal fungi,
respectively. Use of the QIAquick columns (Qiagen Ltd,
Crawley, West Sussex, UK), according to the manufacturer's
instructions, is expected to yield puri®ed DNA
fragments up to 40 kb in size. Each extraction provided
template DNA suf®cient for 10±15 ampli®cation reactions
(50 ll volume). The DNA was successfully used to PCR
amplify speci®c fragments (from 650 bp to more than
2000 bp) from nearly 40 isolates representing a number of
ecto- and endo- mycorrhizal species (Table 1 and Fig. 1).
Successful ampli®cation was achieved not only with the high
copy ribosomal RNA gene block, but also the low or single
copy chitin synthase gene(s). The amplicons were used to
generate sequence data for the ITS region in more than
20 isolates (data not shown). Amplicon yield from a 50 ll
reaction was suf®cient to perform at least 2±4 sequencing
reactions, using the ABI Prism automated sequencing
technology.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ผลและการสนทนาพบโพรโทคอลอธิบายให้เหมาะสมกับการสกัดของ genomic DNA จากปริมาณนาทีmycorrhizal ตัวอย่าง ผลผลิตดีเอ็นเอได้ประมาณ2 และ 5 ng จะ±1 กับเชื้อรา endo - และ ecto-mycorrhizalตามลำดับ ใช้คอลัมน์ QIAquick (Qiagen จำกัดวิคครอวเลย์ เวสต์ซัสเซ็กซ์ UK), ตามของผู้ผลิตคำแนะนำ คาดว่าผลผลิตปู ® ed ดีเอ็นเอชิ้นส่วนถึง 40 กิโลไบต์ในขนาด แยกแต่ละให้แม่แบบดีเอ็นเอ suf ® cient สำหรับ 10±15 ampli ® cation ปฏิกิริยา(ปริมาตรจะ 50) ดีเอ็นเอสำเร็จใช้ PCRขยาย speci ® ชิ้นส่วน c (จาก 650 bp ไปมากกว่า2000 bp) จากแยกเกือบ 40 แสดงจำนวนecto - และ endo - mycorrhizal สายพันธ์ (ตารางที่ 1 และ Fig. 1)สำเร็จ ampli ® cation สำเร็จ ด้วยสูงคัดลอก ribosomal อาร์เอ็นเอยีนบล็อก แต่ยังต่ำหรือเดียวคัดลอก gene(s) synthase ไคทิน Amplicons เคยใช้สร้างลำดับข้อมูลของภูมิภาคในมากกว่า20 แยก (ข้อมูลไม่แสดง) ผลผลิต Amplicon จาก 50 จะปฏิกิริยา suf ® cient ทำน้อยลำดับ 2±4ปฏิกิริยา ใช้ปริซึม ABI อัตโนมัติลำดับเทคโนโลยี

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ผลการอภิปรายและ
อธิบายโปรโตคอลถูกพบว่าเป็นที่เหมาะสมสำหรับ
การสกัดดีเอ็นเอจากจำนวนนาทีของ
ตัวอย่าง mycorrhizal ผลผลิตดีเอ็นเอประมาณ
2 และ 5 งะ LL
± 1 กับเชื้อรา endo- และ ecto-mycorrhizal,
ตามลำดับ ใช้คอลัมน์ QIAquick (Qiagen จำกัด
รอว์ลีย์เวสต์ซัสเซ็กซ์สหราชอาณาจักร) ตามที่ผู้ผลิต
คำแนะนำที่คาดว่าจะให้ผลผลิตดีเอ็นเอpuri®ed
เศษถึง 40 กิโลไบต์ในขนาด สกัดแต่ละให้
แม่แบบsuf®cientดีเอ็นเอ 10 ± 15 ปฏิกิริยาampli®cation
(50 ปริมาณ LL) ดีเอ็นเอถูกนำมาใช้ประสบความสำเร็จใน PCR
ขยายเศษspeci®c (จาก 650 bp มากกว่า
2,000 bp) จากเกือบ 40 สายพันธุ์ที่เป็นตัวแทนของจำนวนของ
สายพันธุ์ mycorrhizal ecto- และ endo- (ตารางที่ 1 และรูปที่ 1)..
ประสบความสำเร็จampli®cation ก็ประสบความสำเร็จไม่เพียง แต่มีสูง
สำเนาโซมอลบล็อกยีน RNA แต่ยังต่ำหรือเดียว
สำเนายีนไคตินเทส (s) amplicons ถูกนำมาใช้ในการ
สร้างข้อมูลลำดับสำหรับภูมิภาคในรอบกว่า
20 สายพันธุ์ (ไม่ได้แสดงข้อมูล) อัตราผลตอบแทนจาก Amplicon 50 LL
ปฏิกิริยาsuf®cientที่จะดำเนินการอย่างน้อย 2 ± 4 ลำดับ
ปฏิกิริยาโดยใช้ปริซึม ABI ลำดับอัตโนมัติ
เทคโนโลยี

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ผลและการอภิปรายโปรโตคอลอธิบายว่าเหมาะสำหรับการสกัดดีเอ็นเอจากนาที

ตัวอย่างปริมาณไมโคไรซา . ผลผลิตดีเอ็นเอประมาณ
2 และ 5 ของ ll
± 1 กับเอ็นโด และ เอคโตไมโคไรซา รา
ตามลำดับ ใช้ของ qiaquick คอลัมน์ ( QIAGEN Ltd
Crawley , West Sussex , สหราชอาณาจักร ) , ตามคําแนะนําของ
ผู้ผลิตคาดว่าจะมีผลผลิตปุริ®เอ็ดชิ้นส่วนดีเอ็นเอ
ถึง 40 กิโลไบต์ในขนาดที่ การสกัดดีเอ็นเอแต่ละแม่แบบให้
®ซุฟ cient 10 ± 15 ampli ®บวกปฏิกิริยา
( 50 จะปริมาณ ) ดีเอ็นเอเรียบร้อยแล้ว ใช้ PCR
ขยายประเภท® C เศษ ( จาก 650 BP มากกว่า
2000 BP ) จากเกือบ 40 ไอโซเลทแทนจำนวน
ecto และ Endo - ไมโคไรซาชนิด ( ตารางที่ 1 และรูปที่ 1
)ที่ประสบความสำเร็จ ampli ®ไอออนบวกได้บรรลุไม่เพียง แต่คัดลอกสูง
ไรโบโซมอล อาร์เอ็นเอของยีนบล็อก แต่ยังต่ำหรือเดียว
คัดลอกและยีนไคติน ( s ) การใช้ amplicons

สร้างลำดับข้อมูลสำหรับภูมิภาคมากกว่า
20 ไอโซเลต ( ข้อมูลไม่แสดง ) และผลผลิตที่ได้จากปฏิกิริยา 50 จะเป็น® cient
ซุฟดำเนินการอย่างน้อย 2 ± 4
ปฏิกิริยาการใช้ปริซึมแบบอัตโนมัติลำดับ
อาบีเทคโนโลยี