Yeast strains were isolated from different natural
sources, including flowers, fruits, wood, and soil,
obtained from the Kyoto area in Japan (approximately
100 samples in total).The samples were collected in
sterilized polypropylene bottles of 15 mL capacity (Becton
Dickinson, Franklin Lakes, NJ, USA) and suspended
in 10 mL of SX liquid medium (3% xylose and 0.67%
YNB without amino acid; Difco, Detroit, MI, USA) containing
chloramphenicol at a concentration of 100 μg/
mL.The samples were cultivated for 4 days at 30°C in
static culture with the lids slightly opened. Aliquots (200
μL) of the culture supernatants were spread onto SX
agar medium and incubated aerobically at 30°C for 3
days. Yeasts were purified using single-colony isolation.
The yeast strains were routinely maintained on YPD
agar plates (2% glucose, 2% peptone [Difco], 1% yeast extract
[Difco] and 1.5% agar) and grown at 30°C. YPX
medium (4% xylose, 2% peptone [Difco] and 1% yeast
extract [Difco]) was used for the screening of xylosefermenting
สายพันธุ์ยีสต์ที่แยกได้จากธรรมชาติที่แตกต่างกัน
แหล่งที่มารวมทั้งดอกไม้, ผลไม้, ไม้และดิน
ที่ได้จากพื้นที่ในเกียวโตประเทศญี่ปุ่น (ประมาณ
100 ตัวอย่างทั้งหมด). กลุ่มตัวอย่างที่ถูกเก็บไว้ใน
ขวดฆ่าเชื้อโพรพิลีนของความจุ 15 มิลลิลิตร (Becton
ดิกคินสัน แฟรงคลินส์, นิวเจอร์ซีย์, สหรัฐอเมริกา) และการสนับสนุน
ใน 10 มิลลิลิตร SX เหลว (ไซโล 3% และ 0.67%
YNB ไม่มีกรดอะมิโน; Difco, ดีทรอยต์, มิชิแกน, สหรัฐอเมริกา) ที่มี
chloramphenicol ที่ความเข้มข้น 100 ไมโครกรัม /
ตัวอย่าง mL.The ได้ ปลูกเป็นเวลา 4 วันที่ 30 ° C ใน
วัฒนธรรมแบบคงที่มีฝาปิดเปิดเล็กน้อย aliquots (200
ไมโครลิตร) ของ supernatants วัฒนธรรมถูกแพร่กระจายไปยัง SX
กลางวุ้นและออกซิเจนบ่มที่ 30 ° C เป็นเวลา 3
วัน ยีสต์บริสุทธิ์ถูกใช้แยกเดี่ยวอาณานิคม
ยีสต์สายพันธุ์ที่ได้รับการบำรุงรักษาเป็นประจำกับ YPD
แผ่นวุ้น (กลูโคส 2%, 2% เปปโตน [Difco], สารสกัดจากยีสต์ 1%
[Difco] และ 1.5% วุ้น) และการเจริญเติบโตที่ 30 ° C. YPX
กลาง (4% ไซโล, 2% เปปโตน [Difco] และยีสต์ 1%
สารสกัด [Difco]) ถูกนำมาใช้สำหรับการคัดกรองของ xylosefermenting
การแปล กรุณารอสักครู่..
สายพันธุ์ยีสต์ที่แยกได้จากแหล่งธรรมชาติ
ที่แตกต่างกัน ได้แก่ ดอกไม้ ผลไม้ ไม้ และดิน
ได้จากแถบเกียวโตในญี่ปุ่น ( ประมาณ
ตัวอย่าง 100 ในทั้งหมด ) โดยเก็บตัวอย่างใน
ฆ่าเชื้อโพรพิลีนขวดความจุ 15 ml ( เบคตอน
ดิกคินสัน Franklin Lakes , NJ , USA ) และระงับ
10 ml ของ SX เหลว ( ร้อยละ 3 และ 6 0.67 %
ynb โดยไม่ difco กรดอะมิโน ; ,ดีทรอยต์ , มิชิแกน , สหรัฐอเมริกา ) ที่มี chloramphenicol ความเข้มข้น 100
ตัวอย่างμกรัม / มล. เมื่อปลูก 4 วันที่ 30 ° C
วัฒนธรรมคงที่กับเปลือกตาเล็กน้อย เปิด เฉยๆ ( 200
μ L ) ของวัฒนธรรม supernatants ถูกกระจายลงบนอาหารวุ้น เ เ กซ์
aerobically บ่มที่ 30 ° C 3
วัน ยีสต์บริสุทธิ์ใช้แยกเป็นโคโลนีเดี่ยว
ยีสต์สายพันธุ์ที่ตรวจรักษา ypd
วุ้นแผ่น ( 2 % glucose 2% ตามลำดับ [ difco ] 1 % สารสกัดจากยีสต์
[ difco ] และ 1.5% วุ้น ) และโตที่ 30 องศา ypx
ขนาดกลาง ( 4 % B , 2% และ 1% ตามลำดับ difco [ ]
[ difco ยีสต์สกัด ] ) คือใช้สำหรับการ xylosefermenting
การแปล กรุณารอสักครู่..