NIH 3T3 cells (murine embryonic fib

NIH 3T3 cells (murine embryonic fibroblasts) and HAb2 cells (NIH
3T3 cells stably expressing HA [25]) were cultured as exponentially
growing subconfluent monolayers on 90-mm plates in DMEM
supplemented with Glutamax (Invitrogen) and 10% (v/v) fetal bovine
serum. Exponentially growing cells were dissociated with trypsin
(Invitrogen). The cells (2.5 × 105
) were plated and cultured overnight
on 30-mm plates in the presence of 2.5 mM sodium butyrate to
potentiate expression of HA [26,27]. In some experiments, we used
human erythrocyte ghosts labeled with fluorescent lipid PKH26
(Sigma, St. Louis, MO) and an aqueous dye, 6-carboxyfluorescein
(Invitrogen, Carlsbad, CA), prepared for experiments as described in
[22].

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เซลล์ 3T3 NIH (murine ตัวอ่อน fibroblasts) และเซลล์ HAb2 (NIHแสดงฮา [25] stably เซลล์ 3T3) มีอ่างที่สร้างเติบโต monolayers subconfluent บนแผ่น 90 มม.ใน DMEMเสริม ด้วย Glutamax (Invitrogen) และ 10% (v/v) ครรภ์วัวซีรั่ม สร้างการเติบโตของเซลล์ได้ถูกกับทริปซิน(Invitrogen) เซลล์ (2.5 × 105) ชุบ และอ่างค้างคืนบนแผ่น 30 มม.ในต่อหน้าของ butyrate โซเดียม 2.5 มม.เพื่อpotentiate ของฮา [26,27] ในการทดลองบางอย่าง เราใช้ผีมนุษย์ของเม็ดเลือดแดงที่ติดป้ายชื่อ ด้วยกระบวนการฟลูออเรส PKH26(ซิก St. Louis, MO) และการย้อมอควี 6 carboxyfluorescein(Invitrogen คาร์ลส CA), เตรียมพร้อมสำหรับการทดลองใน[22]

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เซลล์ NIH 3T3 (เซลล์จากตัวอ่อนหนู) และเซลล์ HAb2 (NIH
เซลล์ 3T3 เสถียรแสดง HA [25])
ได้รับการเพาะเลี้ยงเป็นชี้แจงการเติบโตmonolayers subconfluent บนจาน 90 มม DMEM
เสริมด้วย Glutamax (Invitrogen) และ 10% (v / v)
วัวของทารกในครรภ์ซีรั่ม ชี้แจงการเจริญเติบโตของเซลล์ที่ถูกแยกตัวกับ trypsin
(Invitrogen) เซลล์ (2.5 ×
105) ได้รับการชุบและค้างคืนที่เพาะเลี้ยงบนจาน 30 มมปรากฏตัวของ butyrate โซเดียม 2.5 มิลลิเพื่อ potentiate การแสดงออกของ HA [26,27] ในการทดลองบางอย่างที่เราใช้ผีเม็ดเลือดแดงของมนุษย์ที่มีข้อความที่มีไขมันเรืองแสง PKH26 (Sigma, เซนต์หลุยส์) และสีย้อมน้ำ 6 carboxyfluorescein (Invitrogen, Carlsbad, CA) ที่เตรียมไว้สำหรับการทดลองตามที่อธิบายใน[22]

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

NIH 3T3 เซลล์ตัวอ่อนและเซลล์ไฟโบรบลาสต์ ~ ) hab2 ( NIH 3T3 เซลล์เสถียรแสดงฮ่า
[ 25 ] ) เพาะเลี้ยงเป็นชี้แจง
เติบโต subconfluent monolayers 90 มม. แผ่นใน dmem
เสริมด้วย glutamax ( Invitrogen ) และ 10% ( v / v ) แม่วัว
เซรั่ม ชี้แจงการเติบโตทางใจกับเซลล์มีเอนไซม์
( Invitrogen ) เซลล์ ( 2.5 × 105

) และชุบเลี้ยงค้างคืน30 มม. แผ่นในการปรากฏตัวของโซเดียมบิว 2.5 มม. เสริมบารมี การแสดงออกของ ฮา

[ 26,27 ] ในการทดลองบางอย่าง เราใช้
มนุษย์เม็ดเลือดแดงผีเรืองแสงป้าย ด้วยไขมัน pkh26
( Sigma , St . Louis , MO ) และสารละลายสีย้อม 6-carboxyfluorescein
( Invitrogen Carlsbad , CA ) เตรียมไว้สำหรับการทดลองที่อธิบายไว้ใน
[ 22 ]