After this period of time, samples

After this period of time, samples were removed and allowed to cool to room temperature. A pH-value of about 7.4 was adjusted by addition of 12.5 ml of 0.1 M aqueous dipotassium hydrogen phosphate and 1.25 ml of 0.8 M aqueous sodium hydroxide. After this step, 100 μl of a freshly prepared solution of the internal standard 4-nitrobenzaldehyde semicarbazone (20 μg ml−1 in DMSO) were added. The homogenised sample solution (about 24 ml) was filtered through a type 589 paper filter (Schleicher & Schüll, Dassel, Germany) and afterwards washed with 3 ml of water. The filtrate was applied to a 200-mg LiChrolut® EN SPE column (Merck, Darmstadt, Germany) preconditioned with 3 ml of ethyl acetate, followed by 3 ml of methanol and 5 ml of water. After sample loading the column was washed with 2.5 ml of water and dried by sucking through air until the sorbent completely changed its colour from brown to orange. Elution of the analytes was achieved with 3 ml of ethyl acetate. The eluate was evaporated under a stream of nitrogen and the residue redissolved in 250 μl of mobile phase. A 50-μl volume of this solution was injected into the LC–MS–MS system. During the whole procedure, direct exposure of the sample solutions to light was avoided to prevent any photodegradation.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

หลังจากนี้ระยะเวลา ตัวอย่างถูกเอาออก และอนุญาตให้เย็นอุณหภูมิห้อง ค่า pH ประมาณ 7.4 ของถูกปรับปรุง โดยเพิ่ม 12.5 ml 0.1 M dipotassium อควีไฮโดรเจนฟอสเฟต และ 1.25 ml ของ 0.8 M อควีโซเดียมไฮดรอกไซด์ หลังจากขั้นตอนนี้ μl 100 ของโซลูชันลิ้มของ semicarbazone ภายในมาตรฐาน 4-nitrobenzaldehyde (μg ml−1 20 ใน DMSO) เพิ่มขึ้น โซลูชันตัวอย่าง homogenised (ประมาณ 24 ml) กรองผ่านชนิด 589 กระดาษกรอง (Schleicher & Schüll, Dassel เยอรมนี) และหลังจากนั้น ล้าง ด้วย 3 ml ของน้ำ สารกรองที่ใช้ 200 mg LiChrolut ®น้ำ SPE คอลัมน์ (เมอร์ค ดาร์มส เยอรมนี) preconditioned กับ 3 ml ของเอทิล acetate ตาม ด้วย 3 ml ของเมทานอล และ 5 ml ของน้ำ หลังจากตัวอย่าง การโหลดคอลัมน์ล้าง ด้วย 2.5 ml น้ำ และแห้ง โดยการดูดผ่านอากาศจนกว่าจะดูดซับทั้งหมดเปลี่ยนสีของมันจากสีน้ำตาลกับสีส้ม Elution ของ analytes ที่สำเร็จ ด้วย 3 ml ของเอทิล acetate Eluate ถูกหายไปภายใต้กระแสของไนโตรเจนและสารตกค้าง redissolved ใน μl 250 ระยะเคลื่อนที่ของ ปริมาตร 50-μl ของโซลูชันนี้ถูกฉีดเข้าไปในระบบ LC – MS – MS ในระหว่างขั้นตอนทั้งหมด บันทึกภาพโดยตรงของโซลูชั่นอย่างแสงถูกหลีกเลี่ยงเพื่อป้องกัน photodegradation ใด ๆ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

หลังจากระยะเวลานี้ตัวอย่างที่ถูกถอดออกและได้รับอนุญาตให้เย็นที่อุณหภูมิห้อง ค่าพีเอชประมาณ 7.4 มีการปรับโดยนอกเหนือจาก 12.5 มิลลิลิตร 0.1 M น้ำ dipotassium ฟอสเฟตไฮโดรเจนและ 1.25 มล. 0.8 M โซดาไฟน้ำ หลังจากขั้นตอนนี้ 100 ไมโครลิตรของการแก้ปัญหาที่ปรุงสดใหม่ของมาตรฐานภายใน 4 nitrobenzaldehyde เชิงซ้อน (20 ไมโครกรัมต่อมิลลิลิตร-1 ใน DMSO) ถูกเพิ่ม สารละลายตัวอย่างปั่น (ประมาณ 24 มล.) ได้รับการกรองผ่าน 589 ชนิดกระดาษกรอง (Schleicher & Schull, Dassel, เยอรมนี) และล้างหลังจากนั้น 3 ml ของน้ำ กรองถูกนำไปใช้กับคอลัมน์ 200 มิลลิกรัมLiChrolut® EN SPE (เมอร์ค, Darmstadt, เยอรมนี) preconditioned 3 มิลลิลิตรเอทิลอะซิเตตามด้วย 3 มลเมทานอลและ 5 ml ของน้ำ หลังจากที่ตัวอย่างโหลดคอลัมน์ถูกล้างด้วย 2.5 ml ของน้ำและแห้งโดยการดูดผ่านอากาศจนตัวดูดซับสมบูรณ์เปลี่ยนสีจากสีน้ำตาลเป็นสีส้ม elution ของวิเคราะห์ก็ประสบความสำเร็จด้วย 3 มลของเอทิลอะซีเต eluate ถูกระเหยภายใต้กระแสของไนโตรเจนและสารตกค้าง redissolved ใน 250 ไมโครลิตรของเฟสเคลื่อนที่ ปริมาณ 50 ไมโครลิตรของการแก้ปัญหานี้ได้รับการฉีดเข้าไปในระบบ LC-MS-MS ในระหว่างขั้นตอนทั้งหมด, การสัมผัสโดยตรงของการแก้ปัญหาตัวอย่างกับแสงหลีกเลี่ยงเพื่อป้องกันการสลายใด ๆ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

หลังจากช่วงเวลานี้ ตัวอย่างที่ถูกเอาออก และได้รับอนุญาตให้เย็นที่อุณหภูมิห้อง เป็นค่า pH 7.4 จะปรับเพิ่มประมาณ 12.5 มิลลิลิตรของสารละลาย 0.1 M ไดไฮโดรเจนฟอสเฟตและ 1.25 มล. 0.8 m สารละลายโซเดียม ไฮดรอกไซด์ หลังจากขั้นตอนนี้ 100 μ L ของเตรียมสดโซลูชั่นของภายในการเกิด 4-nitrobenzaldehyde มาตรฐาน ( 20 μกรัมต่อมิลลิลิตร− 1 ใน DMSO ) มีการเพิ่มการ homogenised ตัวอย่างสารละลาย ( ประมาณ 24 กรัม ) ถูกกรองผ่านกระดาษกรองชนิดแล้ว ( ไชลเคอร์& Sch ü ll dassel , เยอรมนี ) และหลังจากนั้นล้างด้วย 3 มล. ของน้ำ หนักใช้ 200 มก. lichrolut ® en คอลัมน์ SPE ( เมอร์คดาร์มสตัดท์ , เยอรมนี ) preconditioned 3 มล. ของเอทิลอะซิเตท ตามด้วย 3 มล. ของเมทานอลและ 5 มิลลิลิตรของน้ำหลังจากโหลดตัวอย่างคอลัมน์ซัก 2.5 มิลลิลิตรของน้ำและแห้ง โดยดูดผ่านอากาศจนดูดซับอย่างสมบูรณ์เปลี่ยนสีจากสีน้ำตาลส้ม ชนิดของสารทำ 3 มล. ของเอทิลอะซิเทต ในสารละลาย ( eluate ) คือระเหยภายใต้กระแสของไนโตรเจนและกาก redissolved 250 μ L ของเฟสเคลื่อนที่ .50 - μลิตร ปริมาตรของสารละลายนี้ถูกฉีดเข้าไปใน LC MS MS ) และระบบ ในระหว่างขั้นตอนทั้งหมด , การสัมผัสโดยตรงของตัวอย่างแก้ไขแสงคือหลีกเลี่ยงเพื่อป้องกันการย่อยสลายด้วยแสง .