2.4. Immobilization of HbFunctional

2.4. Immobilization of Hb
Functionalized SPIONs at the particle concentration range of
2.5–25 mg mL−1 were mixed with 1 mg mL−1 of hemoglobin (Hb) in
2 mL of 20 mM × Tris–HCl (pH 7.4, in 150 mM NaCl) for 2 h at 4 °C
[13]. Hb immobilized GPTS–SPIONs were separated magnetically from
the supernatant. Then, Hb immobilized particles were washed with
20 mM × Tris–HCl (pH 7.4) twice. The supernatant was kept at 4 °C
for the analysis of protein concentration. The amount of immobilized
Hb was measured by using fluorescence spectroscopy. For this aim,
the intrinsic fluorescence of the protein was recorded at 280 and
342 nm of excitation and emission wavelengths [16]. Protein concentration
after immobilization was determined from the regression equation
of the calibration curve.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.4 การตรึงโป HbSPIONs functionalized ที่ช่วงความเข้มข้นของอนุภาคของ2.5 mL−1-25 มิลลิกรัมถูกผสมกับ mL−1 1 มิลลิกรัมของฮีโมโกลบิน (Hb)2 mL ของทริสเรทติ้ง – HCl (pH 7.4, 150 มม. NaCl) × 20 มม.สำหรับ h 2 ที่ 4 ° C[13] เอนไซม์ GPTS – SPIONs ได้แยกชำระจาก Hbsupernatant แล้ว Hb หาอนุภาคถูกล้างด้วย20 มม.×ตรี – HCl (pH 7.4) สองครั้ง Supernatant ถูกเก็บไว้ที่ 4 ° Cสำหรับการวิเคราะห์ความเข้มข้นของโปรตีน หาจำนวนHb ถูกวัด โดยใช้ fluorescence ก สำหรับเป้าหมายนี้fluorescence intrinsic ของโปรตีนถูกบันทึกไว้ที่ 280 และ342 nm ในการกระตุ้นและปล่อยก๊าซความยาวคลื่น [16] ความเข้มข้นของโปรตีนหลังจากตรึงโปถูกกำหนดจากสมการถดถอยเส้นโค้งของการปรับเทียบ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.4 การตรึง Hb
ฟังก์ชัน SPIONs ที่ช่วงความเข้มข้นของอนุภาค
2.5-25 มิลลิกรัม mL-1 ได้รับการผสมกับ 1 มิลลิกรัม-1 มิลลิลิตรของเม็ดเลือดแดง (Hb) ใน
2 มิลลิลิตร 20 มิลลิ× Tris-HCl (pH 7.4 ใน 150 มิลลิโซเดียมคลอไรด์) 2 ชั่วโมงที่ 4 ° C
[13] Hb ตรึง GPTS-SPIONs
ถูกแยกออกจากสนามแม่เหล็กใส จากนั้น Hb ตรึงอนุภาคถูกล้างด้วย
20 มม× Tris-HCl (pH 7.4) สองครั้ง สารละลายถูกเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 4
องศาเซลเซียสสำหรับการวิเคราะห์ของความเข้มข้นของโปรตีน จำนวนเงินของการตรึง
Hb วัดโดยใช้สเปคโทรเรืองแสง สำหรับจุดมุ่งหมายนี้เรืองแสงที่แท้จริงของโปรตีนที่ถูกบันทึกไว้ที่ 280 และ 342 นาโนเมตรของการกระตุ้นและการปล่อยความยาวคลื่น [16] ความเข้มข้นของโปรตีนหลังจากตรึงถูกกำหนดจากสมการถดถอยของเส้นโค้งการสอบเทียบ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.4 . การตรึง Hb
spions ที่มีความเข้มข้นของอนุภาคในช่วง 2.5 - 25 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร
− 1 ผสม 1 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร− 1 ของฮีโมโกลบิน ( Hb )
2 มล. 20 มม. ×ทริส– HCl ( pH 7.4 ใน 150 mM NaCl ) 2 H 4 ° C
[ 13 ] . HB ตรึง gpts – spions แยกแม่เหล็กจาก
น่าน . แล้ว HB ตรึงอนุภาคถูกล้างด้วย
20 มิลลิเมตร×ทริส– HCl ( pH 7.4 ) สองครั้งและน่านถูกเก็บไว้ที่ 4 ° C
เพื่อวิเคราะห์ความเข้มข้นของโปรตีน ปริมาณของฮีโมโกลบิน (
ถูกวัดโดยใช้ฟลูออเรสเซนซ์สเปกโทรสโกปี สำหรับจุดมุ่งหมายนี้
เรืองแสงในโปรตีนเท่ากับ 280 nm ของความตื่นเต้นและ
342 และการปล่อยความยาวคลื่น [ 16 ] โปรตีน
หลังจากการตรึงตั้งใจจากสมการถดถอย
ของรูปโค้ง .