once and the weighed samples were transferred to the
analysis port [8].
2.6. Effect of pore size on adsorption of Escherichia coli
O157:H7 via in vitro pharmacodynamic modeling
This experiment was conducted using a modification
of the in vitro model previously described [1,14,15]. Six
concentration time kill curve were used as a representation
of the adsorptive effect of activated charcoal on
Escherichia coli O157:H7 exposed to 200 mg metronidazole,
metronidazole–AC combination, PB1, PB2, PB3, and PB3 -
met or AC for 24 hours. A growth control experiment was
conducted in triplicate.
Escherichia coli O157:H7ATCC 43895 strain was utilized.
Several colonies of each isolate were incubated aerobically
overnight in 50 mL LB broth. The overnight culture was
diluted 1 in 10 in fresh warm LB broth ∼30 minutes before
the experiment, to allow the bacteria to attain exponential
growth. The initial bacterial inoculum was 106 CFU/mL for
all the experiments.
A 1-mL inoculum of Escherichia coli followed by bolus
injection of metronidazole alone, metronidazole–AC, PB1,
PB2, PB3, or PB3–metronidazole was introduced into each
anaerobic chemostat chamber. Utilizing the desired concentration
for 24 hours, each experiment and the growth
control was run in triplicate. The desired half-life of metronidazole,
that is, 8 hours, was achieved via simulation of
a monoexponential pharmacokinetic process. This process
was obtained via simultaneous introduction of antibioticfree
LB broth being introduced via a peristaltic pump
with an equal volume of drug-containing broth being displaced
from the chemostats into a waste reservoir at a
predetermined rate.
Antimicrobial susceptibility testing using metronidazole
was performed in triplicate for each isolate Escherichia
coli O157:H7 ATCC 43895 prior to the concentration
time–kill experiments as previously described previously
[1]. The 96-well plates inoculated with Escherichia coli
were incubated for 16–20 hours at 36 ◦C in ambient air.
Minimum inhibitory concentrations (MICs) were reported
as the concentration in the first clear well (no growth).
Colonies present at 24 hours were frozen at –20 ◦C in sterile
defibrinated sheep blood until they were needed and
were then subcultured onto fresh agar plates for at least 2
consecutive days prior to susceptibility testing.
2.6.1. LC-tandem MS
The actual concentrations of metronidazole in batched
samples stored in LB broth (frozen at –20 ◦C) were determined
via LC-tandem MS [16], which were linear over a
range of 50–500 ng/L (R2 ≥ 0.9998) with the inter- and
intraday precision being 3.68% and 8.75%, respectively.
2.6.2. Pharmacodynamics and antibiotic carryover
At 0 hours, 1 hour, 2 hours, 3 hours, 4 hours, 6 hours,
12 hours and 24 hours, 1-mL samples were removed
from the model for quantification of the bacterial density
by serial dilution techniques. The possibility of
antibiotic carryover was evaluated for each antimicrobial
agent–bacterium combination using saline dilution
หนึ่งครั้งและตัวอย่างที่ชั่งน้ำหนักถูกโอนย้ายไปการวิเคราะห์พอร์ต [8]2.6. ผลของขนาดของรูพรุนในการดูดซับของ Escherichia coliO157:H7 ผ่านโมเดลเภสัชในหลอดทดลองดำเนินการทดลองนี้ใช้การเปลี่ยนแปลงของรูปแบบในหลอดทดลองก่อนหน้านี้อธิบาย [1,14,15] หกความเข้มข้นเวลาฆ่าโค้งถูกใช้เป็นตัวแทนผลกระทบของถ่านบน adsorptiveEscherichia coli O157:H7 สัมผัสกับ metronidazole 200 mgชุด metronidazole – AC, PB1, PB2, PB3 และ PB3-พบ หรือ AC 24 ชั่วโมง ทดลองควบคุมการเจริญเติบโตเป็นดำเนินการในลข้อสายพันธุ์ Escherichia coli O157:H7ATCC 43895 ถูกนำมาใช้อาณานิคมต่าง ๆ ของโปรตีนแต่ละได้รับการกก aerobicallyพักค้างคืนในน้ำซุป 50 มล.ปอนด์ วัฒนธรรมข้ามคืนเจือจาง 1 ใน 10 ในสดที่อบอุ่นปอนด์นาที ∼30 น้ำซุปก่อนทดลอง อนุญาตให้แบคทีเรียบรรลุเนนเจริญเติบโต 106 CFU/mL สำหรับแก้ไข inoculum ของเชื้อแบคทีเรียเริ่มต้นการทดลองทั้งหมดInoculum ใน 1 มิลลิลิตรของ Escherichia coli ตาม ด้วย bolusฉีด metronidazole คนเดียว metronidazole – AC, PB1PB2, PB3 หรือ PB3 – metronidazole ถูกนำมาใช้ในแต่ละหอการค้า chemostat ไม่ใช้ออกซิเจน ใช้ความเข้มข้นที่ต้องการ24 ชั่วโมง แต่ละการทดลอง และการเจริญเติบโตเรียกใช้การควบคุมลข้อ ครึ่งชีวิตที่ต้องการของ metronidazoleนั่นคือ 8 ชั่วโมง สำเร็จผ่านการจำลองการกระบวนการทางเภสัชจลนศาสตร์ monoexponential กระบวนการนี้ได้รับผ่านทาง antibioticfree แนะนำกันการแนะนำผ่านปั๊ม peristaltic ซุปปอนด์ด้วยปริมาณเท่ากับยาที่ประกอบด้วยน้ำซุปที่ถูกพลัดถิ่นจาก chemostats ลงในอ่างเก็บน้ำเสียที่มีกำหนดอัตราทดสอบความไวต่อยาต้านจุลชีพโดยใช้ metronidazoleดำเนินการสำหรับแต่ละ isolate Escherichia ลข้อcoli ATCC O157:H7 43895 ก่อนความเข้มข้นเวลา – ฆ่าการทดลองตามที่เคย อธิบายไว้ก่อนหน้านี้[1] . inoculated แผ่น 96 หลุม ด้วย Escherichia coliได้รับการกก 16 – 20 ชั่วโมงที่ 36 ◦C ในอากาศแวดล้อมรายงานความเข้มข้นที่ยับยั้งขั้นต่ำ (ไมโครโฟน)เป็นความเข้มข้นในแรกล้างบ่อ (ไม่โต)อาณานิคม 24 ชั่วโมงถูกแช่แข็งที่ –20 ◦C ในปลอดเชื้อdefibrinated แกะเลือดจนกว่าพวกเขาจำเป็น และแล้วก็ subcultured ลงบนแผ่นวุ้นสดอย่างน้อย 2วันติดต่อกันก่อนทดสอบความไวต่อ2.6.1 LC-ควบคู่ MSความเข้มข้นที่แท้จริงของ metronidazole ในข้อกำหนดตัวอย่างที่เก็บไว้ในปอนด์ซุปแช่แข็งที่ –20 ◦C)ทาง MS ควบคู่ LC [16], ซึ่งเป็นเส้นตรงที่ผ่านการช่วง 50-500 ng/l (R2 ≥ 0.9998) ด้วยอินเตอร์ - และความแม่นยำระหว่างการ 3.68% และ 8.75% ตามลำดับ2.6.2. carryover เภสัชและยาปฏิชีวนะที่ 0 ชั่วโมง 1 ชั่วโมง 2 ชั่วโมง 3 ชั่วโมง 4 ชั่วโมง 6 ชั่วโมง12 ชั่วโมงและ 24 ชั่วโมง ตัวอย่าง 1 มิลลิลิตรถูกเอาออกจากแบบจำลองสำหรับนับจำนวนความหนาแน่นของเชื้อแบคทีเรียโดยเทคนิคการเจือจาง serial เป็นไปได้ของยาปฏิชีวนะ carryover ถูกประเมินสำหรับแต่ละสารต้านจุลชีพใช้น้ำเกลือเจือจางผสมแทน – แบคทีเรีย
การแปล กรุณารอสักครู่..

ครั้งเดียวและชั่งน้ำหนักตัวอย่างที่ถูกถ่ายโอนไปยัง
พอร์ตการวิเคราะห์ [8].
2.6 ผลของขนาดรูขุมขนในการดูดซับของเชื้อ Escherichia coli
O157: H7 ผ่านในหลอดทดลองสร้างแบบจำลองเภสัช
ทดลองนี้ดำเนินการโดยใช้การปรับเปลี่ยน
รูปแบบในหลอดทดลองอธิบายไว้ก่อนหน้า [1,14,15] หก
เข้มข้นฆ่าเวลาโค้งถูกนำมาใช้เป็นตัวแทน
ของผลกระทบที่ดูดซับของถ่านกัมมันใน
Escherichia coli O157: H7 สัมผัสกับ 200 metronidazole มิลลิกรัม
รวมกัน metronidazole-AC, Pb1, PB2, PB3 และ PB3 -
พบหรือ AC 24 ชั่วโมง การทดลองการควบคุมการเจริญเติบโตของ
การดำเนินการในเพิ่มขึ้นสามเท่า.
O157 Escherichia coli: H7ATCC 43,895 สายพันธุ์ที่ถูกนำมาใช้.
หลายอาณานิคมของแต่ละแยกได้ถูกบ่มออกซิเจน
ค้างคืนใน 50 มล LB น้ำซุป วัฒนธรรมค้างคืนถูก
เจือจาง 1 ใน 10 ในผลไม้สดน้ำซุปอุ่น LB ~30 นาทีก่อน
การทดลองเพื่อให้แบคทีเรียที่จะบรรลุชี้แจง
การเจริญเติบโต เชื้อแบคทีเรียเริ่มต้น 106 CFU / มิลลิลิตรสำหรับ
การทดลองทั้งหมด.
เชื้อ 1 มิลลิลิตรของ Escherichia coli ตามด้วยยาลูกกลอน
ฉีด metronidazole คนเดียว metronidazole-AC, Pb1,
PB2, PB3 หรือ PB3-metronidazole ถูกนำเข้าสู่แต่ละ
chemostat แบบไม่ใช้ออกซิเจน ห้อง. ใช้ความเข้มข้นที่ต้องการ
24 ชั่วโมงการทดสอบแต่ละครั้งและการเจริญเติบโต
ควบคุมทำงานในเพิ่มขึ้นสามเท่า ครึ่งชีวิตที่ต้องการของ metronidazole,
ที่อยู่, 8 ชั่วโมงก็ประสบความสำเร็จผ่านการจำลองของ
กระบวนการทางเภสัชจลนศาสตร์ monoexponential กระบวนการนี้จะ
ได้รับผ่านการแนะนำพร้อมกันของ antibioticfree
LB น้ำซุปที่ถูกนำผ่านปั๊ม peristaltic
กับปริมาตรที่เท่ากันของยาเสพติดที่มีส่วนผสมของน้ำซุปที่ถูกย้าย
จาก chemostats เป็นอ่างเก็บน้ำของเสียที่เป็น
อัตราที่กำหนดไว้.
ความไวต่อยาต้านจุลชีพทดสอบการใช้ metronidazole
กำลังดำเนินการเพิ่มขึ้นสามเท่าสำหรับ แต่ละแยกเชื้อ Escherichia
coli O157: H7 ATCC 43895 ก่อนที่จะมีความเข้มข้น
เวลาฆ่าทดลองตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ก่อนหน้านี้
[1] แผ่น 96 หลุมเชื้อ Escherichia coli
ถูกบ่มเป็นเวลา 16-20 ชั่วโมงที่ 36 ◦Cในอากาศแวดล้อม.
ความเข้มข้นของการยับยั้งขั้นต่ำ (MICs) ได้รับรายงาน
เป็นความเข้มข้นในครั้งแรกที่ชัดเจนดี (ไม่มีการเจริญเติบโต) ได้.
อาณานิคมในปัจจุบันที่ 24 ชั่วโมง ถูกแช่แข็งที่อุณหภูมิ -20 ◦Cในการฆ่าเชื้อ
ในเลือดแกะ defibrinated จนกว่าพวกเขาจะเป็นสิ่งที่จำเป็นและ
ถูกเลี้ยงแล้วใส่ลงในจานอาหารเลี้ยงเชื้อสดอย่างน้อย 2
วันติดต่อกันก่อนที่จะมีการทดสอบความไวต่อ.
2.6.1 LC-MS ควบคู่
ความเข้มข้นที่แท้จริงของ metronidazole ใน batched
ตัวอย่างที่เก็บไว้ในน้ำซุป LB (แช่แข็งที่อุณหภูมิ -20 ◦C) ได้รับการพิจารณา
ผ่าน LC-MS ควบคู่ [16] ซึ่งเป็นเชิงเส้นมากกว่า
ช่วงของ 50-500 ng / L (R2 ≥ 0.9998) กับระหว่างและ
แม่นยำ intraday เป็น 3.68% และ 8.75% ตามลำดับ.
2.6.2 เภสัชและยกยอดยาปฏิชีวนะ
ที่ 0 ชั่วโมง 1 ชั่วโมง 2 ชั่วโมง 3 ชั่วโมง 4 ชั่วโมง 6 ชั่วโมง,
12 ชั่วโมงและ 24 ชั่วโมง 1 มิลลิลิตรตัวอย่างที่ถูกถอดออก
จากแบบจำลองสำหรับปริมาณความหนาแน่นของแบคทีเรีย
โดยใช้เทคนิคการเจือจางอนุกรม ความเป็นไปได้ของการ
ยกยอดยาปฏิชีวนะที่ถูกประเมินสำหรับแต่ละต้านจุลชีพ
รวมกันตัวแทนแบคทีเรียโดยใช้น้ำเกลือเจือจาง
การแปล กรุณารอสักครู่..

เพียงครั้งเดียว และชั่งน้ำหนักตัวอย่างถูกย้ายไปพอร์ตการวิเคราะห์ [ 8 ]2.6 อิทธิพลของขนาดรูพรุนในการดูดซับของเชื้อ Escherichia coliเป็นสมาชิก : H7 ผ่านทัศนคติแบบในหลอดทดลองการทดลองนี้มีวัตถุประสงค์ใช้ดัดแปลงของการอธิบายรูปแบบก่อนหน้านี้ [ 1,14,15 ] หกสมาธิเวลาฆ่าโค้งซึ่งใช้เป็นตัวแทนผลของถ่านที่นำมาEscherichia coli เป็นสมาชิก ) สัมผัสกับโซล 200 มิลลิกรัมโซล– AC รวมกัน , PB1 , pb3 แบบเคลื่อนที่ และ pb3 - ,ได้ AC สำหรับ 24 ชั่วโมง การควบคุมการเจริญเติบโตของการทดลองการดำเนินการทั้งสามใบเป็นสมาชิก : h7atcc 43895 Escherichia coli สายพันธุ์มาตรฐานหลายอาณานิคมของแต่ละแยกถูกแยก aerobicallyพักค้างคืนใน 50 ml lb broth . วัฒนธรรมในชั่วข้ามคืน คือซึ่ง 1 ใน 10 ในสดอุ่นซุป∼ปอนด์ก่อน 30 นาทีการทดลองเพื่อให้แบคทีเรียที่จะบรรลุเอกซ์โพเนนเชียลการเจริญเติบโต เชื้อจุลินทรีย์เริ่มต้นที่ 106 cfu / mlการทดลองทั้งหมดเป็น 1-ml เชื้อ Escherichia coli โดยเพิ่มตามฉีดของเมโทรนิดาโซลคนเดียว เมโทรนิดาโซล ( AC , PB1 ,แบบเคลื่อนที่ pb3 , หรือ pb3 –โซลถูกใส่เข้าไปในแต่ละห้องเพาะเลี้ยงแบบต่อเนื่อง แบบไม่ใช้ออกซิเจน ใช้ความเข้มข้นที่ต้องการ24 ชั่วโมง แต่ละ การทดลองและการเจริญควบคุมงานทั้งสามใบ ที่ต้องการครึ่งชีวิตของโซลนั่นคือ 8 ชั่วโมง คือความผ่านการจำลองเป็น monoexponential ) กระบวนการ กระบวนการนี้ได้ผ่านการ antibioticfree พร้อมกันLB broth ถูกแนะนำผ่านปั๊ม peristalticด้วยปริมาณเท่ากันของยาที่มีน้ำซุปที่ถูกพลัดจาก chemostats เป็นอ่างเก็บน้ำที่เสียกำหนดอัตราการทดสอบโดยใช้จุลชีพใช้เมโทรนิดาโซลแสดงทั้งสามใบแต่ละแยก Escherichiaจากการเป็นสมาชิก : H7 ATCC 43895 ก่อนสมาธิเวลา–ฆ่าการทดลองก่อนหน้านี้อธิบายก่อนหน้านี้[ 1 ] 96 ด้วยจานที่ใส่เชื้อ Escherichia coliเป็นเชื้อที่ 16 – 20 ชั่วโมง 36 ◦ C ในอากาศ .ความเข้มข้นต่ำสุดที่ยับยั้ง ( R ) มีรายงานว่าเป็นสมาธิในแรกชัดเจนดี ( ไม่โต )อาณานิคม ปัจจุบัน 24 ชั่วโมงถูกแช่แข็งที่ 20 –◦ C ในการเป็นหมันหัวใจโตจากการอุดตันจนต้องแกะและแล้ว subcultured บนจานวุ้นสดอย่างน้อย 2วันติดต่อกัน ก่อนการทดสอบความไว .ดูแล . LC ตีคู่นางสาวจริง batched ความเข้มข้นของเมโทรนิดาโซลตัวอย่างที่เก็บไว้ในน้ำซุปปอนด์ ( แช่แข็ง ) 20 ◦ C ) สารละลายผ่าน LC ตีคู่นางสาว [ 16 ] ซึ่งเป็นเส้นตรงมากกว่าช่วง 50 - 500 กรัม / ลิตร ( R2 ≥ 0.9998 ) กับ อินเตอร์ และความแม่นยำ intraday เป็น 3.68 % และ 8.75 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับดาวน์โหลด . เภสัชพลศาสตร์ และคงไปยาปฏิชีวนะที่ 0 ชั่วโมง , 1 ชั่วโมง 2 ชั่วโมง 3 ชั่วโมง , 4 ชั่วโมง , 6 ชั่วโมง12 ชั่วโมงและ 24 ชั่วโมง ตัวอย่าง 1-ml ถูกลบออกจากแบบจำลองปริมาณความหนาแน่นของแบคทีเรียโดยเทคนิคการเจือจางแบบต่อเนื่อง ความเป็นไปได้ของยาปฏิชีวนะคงไปประเมินแต่ละจุลชีพการใช้น้ำเกลือเจือจางแบคทีเรีย–เจ้าหน้าที่
การแปล กรุณารอสักครู่..
