2.4. Biochemical compositionBiochem

2.4. Biochemical composition
Biochemical composition of phyllosoma from both HD and LD treatments
were determined at instars 1, 6, 9, 12, 15, 17, and the puerulus
stage. A sample of phyllosoma (n=20) from each tank was measured
at regular intervals for TL and CW using a profile projector (Nikon 6C,
Japan) and instars were determined according to Kittaka et al. (1997)
under a dissecting microscope (AIS Optical) at 10–40× magnification
to determine intermoult periods and when biochemical samples were
taken. Phyllosoma for biochemical analyses were obtained from the initial
hatch population at instar 1 and from random culling of animals
when densities were reduced for each treatment at instars 6, 9, 12, 15,
and 17. A total of 10000, 635, 23, 15, and 9 individuals were sampled
for biochemistry in the LD treatment at instars 1, 6, 15, 17, and puerulus
stage, respectively. In the HD treatment, a total of 10000, 635, 757, 244,
61, and 12 phyllosoma were sampled for biochemistry at instars 1, 6, 9,
12, 15, and 17, respectively. The ozone toxicity event encountered in the
LD treatment during instar 9 meant no animals were available for biochemical
analyses when densities were reduced at instar 9 and only
one replicate was available at instar 12. All individuals that progressed
to the puerulus stage in the LD treatment were used for biochemical
analyses. No animals were advanced enough to progress to the puerulus
stage in the HD treatment. Prior to sampling, phyllosoma were starved
for 24 h to clear the digestive tract of food and faeces. They were then
counted and rinsed in distilled water to remove external salts and
blotted dry with paper towel. Phyllosoma and pueruli from each
tank were placed into pre-weighed aluminium foil pockets and stored
at −80 °C until further analysis. Samples were weighed to the nearest
10 μg on a precision balance (Mettler AT261 DeltaRange, Metler-Toledo,
Switzerland), freeze-dried (Dynavac FD3, Sydney), re-weighed to calculate
sample DM and then ground to a homogenous powder with a glass
mortar and pestle. Individual DM was calculated for instars 6 to 17
by dividing the sample DM by the number of phyllosoma in the
sample. Biochemical composition was determined from the mean
of all replicates in LD and HD treatments.
Total lipid was analysed using a modified Bligh and Dyer (1959)
one-phase methanol:chloroform:water extraction (10:20:8, by volume).
Each sample was extracted overnight and the phases were separated
the following day by addition of chloroform and water (final
solvent ratio, 1:1:0.9, v/v/v, methanol/chloroform/water). The total
solvent extract was concentrated using rotary evaporation at 40 °C
and lipid content was determined by mass.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.4 การองค์ประกอบที่ชีวเคมีองค์ประกอบชีวเคมี phyllosoma จาก HD และ LDได้กำหนดที่ instars 1, 6, 9, 12, 15, 17 และ puerulusขั้นตอนการ ตัวอย่างของ phyllosoma (n = 20) จากแต่ละถังถูกวัดในช่วงเวลาปกติสำหรับ TL และตามน้ำหนักจริงโดยใช้โปรเจคเตอร์โพรไฟล์ (Nikon 6Cญี่ปุ่น และ instars ถูกกำหนดตาม Kittaka et al. (1997)ภายใต้กล้องจุลทรรศน์ dissecting (แสงเอไอเอส) ที่ขยาย× 10 – 40การกำหนดรอบระยะเวลา และชีวเคมี intermoult ตัวอย่างดีดำเนินการ Phyllosoma สำหรับวิเคราะห์ชีวเคมีได้รับมาจากต้นประชากรขณะ ที่ instar 1 และสุ่ม culling สัตว์เมื่อมีลดความหนาแน่นใน แต่ละทรีทเม้นต์ที่ instars 6, 9, 12, 15และ 17 จำนวน 10000, 635, 23, 15 และ 9 บุคคลมีความสำหรับวิชาชีวเคมีใน LD รักษาที่ instars 1, 6, 15, 17 และ puerulusขั้นตอน ตามลำดับ ในการรักษา HD จำนวน 10000, 635, 757, 24461 และ 12 phyllosoma มีตัวอย่างสำหรับวิชาชีวเคมีที่ instars 1, 6, 912, 15 และ 17 ตามลำดับ เหตุการณ์ความเป็นพิษของโอโซนที่พบในการรักษา LD ระหว่าง instar 9 หมายถึง สัตว์ไม่มีสำหรับชีวเคมีวิเคราะห์เมื่อความหนาแน่นก็ลดลงที่ instar 9 เท่านั้น และจำลองแบบหนึ่งถูก instar 12 บุคคลทั้งหมดที่หน้าไปเพียงใดการ puerulus การ ใช้ขั้นตอนในการบำบัดรักษา LD สำหรับชีวเคมีวิเคราะห์ สัตว์ไม่มีขั้นสูงพอที่จะไป puerulusขั้นตอนในการรักษา HD มี starved phyllosoma ก่อนสุ่มตัวอย่างสำหรับ 24 ชมเพื่อล้างทางเดินอาหารและ faeces พวกเขาแล้วตรวจนับ และ rinsed ในน้ำกลั่นเอาเกลือภายนอก และblotted แห้ง ด้วยกระดาษ Phyllosoma และ pueruli จากถังอยู่ในกระเป๋าก่อนชั่งน้ำหนักอลูมิเนียมฟอยล์ และเก็บที่ −80 ° C จนกว่าจะวิเคราะห์ต่อไป ตัวอย่างมีน้ำหนักเพื่อการΜg 10 ดุลความแม่นยำ (Mettler AT261 DeltaRange, Metler-โทเลโดสวิสเซอร์แลนด์), อบแห้ง (Dynavac FD3 ซิดนีย์), ชั่งน้ำหนักเพื่อคำนวณใหม่ตัวอย่าง DM แล้วพื้นดินผงให้กับแก้วโกร่งบด แต่ละ DM ถูกคำนวณสำหรับ instars 6-17โดยการแบ่งตัวอย่าง DM ตามจำนวน phyllosoma ในการตัวอย่างการ องค์ประกอบชีวเคมีถูกกำหนดจากค่าเฉลี่ยของทั้งหมดเหมือนกับใน LD และ HDไขมันทั้งหมดถูก analysed โดยใช้ Bligh แก้ไขและทัน (1959)ระยะหนึ่งเมทานอล: คลอโรฟอร์ม: น้ำสกัด (10:20:8 โดยปริมาตร)มีสกัดตัวอย่างแต่ละค้างคืน และมีแบ่งระยะวันต่อไป โดยเพิ่มเติมคลอโรฟอร์มและน้ำ (สุดท้ายตัวทำละลายอัตราส่วน 1:1:0.9, v/v/v เมทานอล/คลอโรฟอร์ม/น้ำ) ผลรวมสารสกัดจากตัวทำละลายเข้มข้นใช้ระเหยโรตารี่ที่ 40 ° Cและไขมันเนื้อหาถูกกำหนด โดยมวล

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.4 องค์ประกอบทางชีวเคมีองค์ประกอบทางชีวเคมีของ phyllosoma จากทั้ง HD และการรักษา LD ได้รับการพิจารณาในวัย 1, 6, 9, 12, 15, 17, และ puerulus เวที ตัวอย่างของ phyllosoma (n = 20) จากแต่ละถังวัดในช่วงเวลาปกติสำหรับTL และ CW ใช้รายละเอียดโปรเจ็ (Nikon 6C, ญี่ปุ่น) และวัยได้รับการพิจารณาตาม Kittaka et al, (1997) ภายใต้กล้องจุลทรรศน์ (เอไอเอสออปติคอล) ที่ 10-40 ×ขยายในการกำหนดระยะเวลาintermoult และเมื่อตัวอย่างทางชีวเคมีที่ถูกนำมา Phyllosoma สำหรับการวิเคราะห์ทางชีวเคมีที่ได้รับจากเริ่มต้นประชากรวัยฟักที่1 และจากการสุ่มฆ่าสัตว์เมื่อความหนาแน่นลดลงสำหรับการรักษาแต่ละวัย 6, 9, 12, 15 และ 17 รวม 10000 A, 635, 23, 15 และ 9 บุคคลที่ได้รับการเก็บตัวอย่างสำหรับชีวเคมีในการรักษาLD วัยที่ 1, 6, 15, 17 และ puerulus ขั้นตอนตามลำดับ ในการรักษาแบบ HD รวมเป็น 10,000, 635, 757, 244, 61, และ 12 phyllosoma เก็บตัวอย่างสำหรับชีวเคมีในวัย 1, 6, 9, 12, 15, และ 17 ตามลำดับ เหตุการณ์พิษโอโซนพบในการรักษา LD ในช่วงวัยที่ 9 หมายถึงสัตว์ที่ไม่ได้สำหรับทางชีวเคมีวิเคราะห์เมื่อความหนาแน่นลดลงในวัย9 และเพียงหนึ่งซ้ำที่มีอยู่ในวัย12 บุคคลทั้งหมดที่ก้าวหน้าไปยังขั้นตอนpuerulus ในการรักษาที่เป็น LD ใช้สำหรับทางชีวเคมีวิเคราะห์ ไม่มีสัตว์ที่ถูกขั้นสูงพอที่จะพัฒนาไปสู่ ​​puerulus ขั้นตอนในการรักษาแบบ HD ก่อนที่จะมีการสุ่มตัวอย่าง phyllosoma ถูกอดอาหารเป็นเวลา24 ชั่วโมงเพื่อล้างระบบทางเดินอาหารของอาหารและอุจจาระ พวกเขาได้รับแล้วนับและล้างในน้ำกลั่นที่จะเอาเกลือภายนอกและเปื้อนแห้งด้วยผ้าขนหนูกระดาษ Phyllosoma และ pueruli จากแต่ละถังถูกวางลงในอลูมิเนียมก่อนชั่งน้ำหนักกระเป๋าฟอยล์และเก็บไว้ที่-80 องศาเซลเซียสจนถึงการวิเคราะห์ต่อไป ตัวอย่างชั่งที่ใกล้ที่สุด10 ไมโครกรัมในความแม่นยำสมดุล (Mettler AT261 DeltaRange, Metler-Toledo วิตเซอร์แลนด์), แช่แข็งแห้ง (Dynavac fd3 ซิดนีย์) อีกครั้งชั่งน้ำหนักในการคำนวณตัวอย่างDM แล้วพื้นดินไปยังเนื้อผงด้วย แก้วโกร่งบดยา DM บุคคลที่คำนวณได้สำหรับวัย 6-17 โดยการหาร DM ตัวอย่างจากจำนวน phyllosoma ในตัวอย่าง องค์ประกอบทางชีวเคมีถูกกำหนดจากค่าเฉลี่ยของซ้ำทั้งหมดใน LD และการรักษา HD. ไขมันทั้งหมดได้รับการวิเคราะห์โดยใช้ไบลห์แก้ไขและ Dyer (1959) เมทานอลหนึ่งเฟส: คลอโรฟอร์ม: การสกัดน้ำ. (10: 20: 8 โดยปริมาตร) แต่ละ ตัวอย่างถูกสกัดในชั่วข้ามคืนและขั้นตอนที่ถูกแยกออกจากกันในวันรุ่งขึ้นโดยนอกเหนือจากคลอโรฟอร์มและน้ำ(สุดท้ายอัตราส่วนตัวทำละลาย 1: 1: 0.9 v / v / V, เมทานอล / คลอโรฟอร์ม / น้ำ) รวมสารสกัดด้วยตัวทำละลายเข้มข้นโดยใช้การระเหยแบบหมุนที่ 40 องศาเซลเซียสและเนื้อหาไขมันถูกกำหนดโดยมวล

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.4 . องค์ประกอบทางชีวเคมีชีวเคมี
องค์ประกอบของ phyllosoma ทั้ง HD และ LD
ถูกกำหนดโดยการรักษาที่ 1 , 6 , 9 , 12 , 15 , 17 และเวที puerulus

ตัวอย่างของ phyllosoma ( n = 20 ) จากถังแต่ละวัด
ในช่วงเวลาปกติสำหรับ TL CW ใช้และโปรไฟล์โปรเจคเตอร์ ( Nikon 6
, ญี่ปุ่น ) และ โดยคำนวณตาม kittaka et al . ( 1997 )
ภายใต้กล้องจุลทรรศน์ชำแหละ ( เอไอเอส แสง ) ที่ 10 – 40 ×ขยายกำหนดระยะเวลา intermoult
และเมื่อตัวอย่างทางชีวเคมีเป็น
ถ่าย phyllosoma การวิเคราะห์ทางชีวเคมีที่ได้จากประชากรเริ่มต้นที่ 1 และ ระยะฟัก
จากสุ่มคัดสัตว์
เมื่อความหนาแน่นลดลง การรักษาในแต่ละวัย 6 , 9 , 12 , 15 และ 17
. รวม 10 , 000 , 635 , 23 , 15และ 9 บุคคลทั่วไปจำนวน
สำหรับชีวเคมีใน LD โดยการรักษาที่ 1 , 6 , 15 , 17 และ puerulus
ขั้นตอนตามลำดับ ในการรักษาตัว รวม 10 , 000 , 635 757 , 244 ,
, 61 , และ 12 phyllosoma จำนวนสำหรับชีวเคมีในวัย
1 , 6 , 9 , 12 , 15 และ 17 ตามลำดับ โอโซนพิษที่พบใน
เหตุการณ์การรักษาในช่วงระยะ 9 หมายถึง LD ไม่มีสัตว์ที่มีอยู่สำหรับการวิเคราะห์ทางชีวเคมี
เมื่อความหนาแน่นลดลง และในวัยเพียง 9
1 ทำซ้ำมีวัย 12 บุคคลทั้งหมดที่ก้าวหน้า
ไปยังขั้นตอนในการรักษา puerulus LD วิเคราะห์ข้อมูลใช้งาน

ไม่มีสัตว์สูงเพียงพอเพื่อความคืบหน้าไปขั้นตอน puerulus
ในการรักษา HD ก่อนตัวอย่างphyllosoma หิวซะอีก
24 h เพื่อล้างทางเดินอาหารอาหารและอุจจาระ จากนั้น
นับและล้างในน้ำกลั่นเอาเกลือภายนอก
เปื้อนแห้งด้วยผ้าขนหนูกระดาษ . และ phyllosoma pueruli จากแต่ละ
ถังวางไว้ก่อนชั่งน้ำหนักกระเป๋าอลูมิเนียมฟอยล์และเก็บไว้
ที่− 80 °องศาเซลเซียสจนถึงการวิเคราะห์ต่อไป จำนวนน้ำหนักที่ใกล้ที่สุด
10 μ g บนความสมดุล ( เม็ตเลอร์ at261 deltarange metler Toledo ,
, สวิตเซอร์แลนด์ ) , แช่แข็ง ( dynavac fd3 ซิดนีย์ ) , re หนักคำนวณ
ตัวอย่าง DM แล้วดินผงเนื้อเดียวแก้ว
กับครกและสาก DM บุคคลถูกคำนวณสำหรับวัย 6 ถึง 17
โดยแบ่งกลุ่มตัวอย่างตามจำนวน phyllosoma DM ใน
ตัวอย่าง องค์ประกอบทางชีวเคมี พิจารณาจากค่าเฉลี่ย
ของซ้ำใน LD และรักษา HD .
ไขมันรวมจำนวนการแก้ไขการประเมิน Dyer ( 1959 )
: คลอโรฟอร์ม : เมทานอลระยะหนึ่งสกัดด้วยน้ำ ( 10:20:8 โดยปริมาตร
แต่ละตัวอย่างถูกสกัดในชั่วข้ามคืนและระยะจากกัน
วันต่อไปนี้ โดยนอกเหนือจากคลอโรฟอร์มและน้ำสุดท้าย (
. ส่วน 1:1:0.9 , V / V / V , เมทานอลคลอโรฟอร์ม / น้ำ )
รวมสารสกัดเข้มข้นด้วยการระเหยตัวทำละลายเป็นโรตารี่ 40 ° C
และไขมันเนื้อหาถูกกำหนดโดยมวล