2.2.3. Test solutionTest solutions

2.2.3. Test solution
Test solutions (1%) of amino acids were prepared in double
distilled water.
2.2.4. Detector
A 0.3% ninhydrin solution in acetone was used to detect all
the amino acids.
2.2.5. Stationary phase
Code Stationary phase
S1 Silica gel ‘G’
S2 Silica gel impregnated with SDS (0.1 M)
S3 Silica gel impregnated with SDS (0.01 M)
S4 Silica gel impregnated with SDS (0.008 M)
S5 Silica gel impregnated with SDS (0.001 M)
S6 Silica gel impregnated with SDS (0.0001 M)
S7 Silica gel impregnated with CPC (0.1 M)
S8 Silica gel impregnated with CPC (0.00003 M)
S9 Silica gel impregnated with CTAB (0.1 M)
S10 Silica gel impregnated with CTAB (0.0001 M)
S11 Silica gel impregnated with TX-100 (0.01 M)
S12 Silica gel impregnated with TX-100 (0.0001 M)
S13 Silica gel 60 F254 HPTLC plate impregnated with 0.001 M SDS
S14 Silica gel 60 F254 HPTLC plate impregnated with 0.00003 M CPC
S15 Silica gel 60 F254 HPTLC plate impregnated with 0.0001 M CTAB
S16 Silica gel 60 F254 HPTLC plate impregnated with 0.0001 M TX-100
2.2.6. Mobile phase
Following borate–phosphate buffer systems prepared from
various combinations of boric acid (0.04 M), phosphoric acid
(0.04 M) and sodium hydroxide (0.24 M) were used as mobile
phase.
Code Mobile phase (v/v) Composition pH
M1 Boric acid + phosphoric acid 50:50 2.3
M2 Boric acid + phosphoric acid + sodium
hydroxide
50:50:8.6 5.38
M3 Boric acid + phosphoric acid + sodium
hydroxide
50:50:23 9.04
2.2.7. Preparation of TLC plates
(a) Plain silica gel thin layer plates:
TLC plates were prepared by mixing silica gel ‘G’ with
double distilled water in 1:3 volume ratios with constant
shaking for 5 min until homogeneous slurry was obtained.
The resultant slurry was coated on the glass plates with the
help of a Toshniwal applicator to give a 0.25 mm thick layer.
The plates were first air dried at room temperature and then
activated by heating at 100 ◦C for 1 h. After activation, the
plates were kept in airtight chamber until used.
(b) Impregnated TLC plates:
The activated silica gel plates were impregnated with
desired concentrations of SDS (0.1, 0.01, 0.008, 0.001
and 0.0001 M), CPC (0.1 and 0.00003 M), CTAB (0.1 and
0.0001 M) and TX-100 (0.01 and 0.0001 M) by developing
silica gel plates in aqueous solution of impregnant, followed
by drying of the plates at 100 ◦C in an electrically controlled
oven for 1 h.
2.2.8. Procedure
Thin layer chromatography was performed on unimpregnated
(or plain) and impregnated (with SDS, CPC, CTAB or TX-
100) silica gel layers in glass jars. Test solutions (1.0 L) were
applied by means of micropipette about 2 cm above the lower
edge of the plates. The spot was allowed to dry and then the
plates were developed in the chromatographic chamber presaturated
for 30 min with desired solvent system using ascending
technique. The solvent ascent was kept upto 10 cm from the
point of application. After development, the plates were dried
at 60 ◦C followed by spraying with freshly prepared ninhydrin
solution. All amino acids except l-proline appeared as violet
spots on heating TLC plates for 15–20 min at 60 ◦C. l-Proline
gives yellow spot. The RF values were calculated from the values
of RL (RF of the leading front) and RT (RF of the trailing
front):
RF = 0.5(RL + RT)
10
2.2.9. Separation
For the mutual separation, equal volumes (1.0 mL each) of lHis
and dl-Trp were mixed and 1.0 L of the resultant mixture
was loaded on SDS (0.001 M) impregnated silica gel 60 F254
HPTLC (S13) or SDS (0.001 M) impregnated silica gel TLC (S5)
plates. The plates were developed with mobile phase buffer pH
A. Mohammad, A. Zehra / Colloids and Surfaces A: Physicochem. Eng. Aspects 301 (2007) 404–411 407
2.3, the spots were detected and the RF values of the separated
amino acids were determined.
2.2.10. Interference
Investigating the effect of amines, inorganic anions and metal
cations on the mobility of amino acids is an important aspect as
all amino acids contain amino group (–NH2). For investigating
the interference of amines on separation of l-His and dl-Trp,
an aliquot (1.0L) of foreign substance (1% aqueous solution
of cations or anions and 1% alcoholic solution of amines) was
spotted along with the mixture (1.0L) of l-His and dl-Trp.
The chromatography was performed with M1–S5 (mobile phase,
buffer pH 2.3 and stationary phase, SDS (0.001 M) impregnated
silica gel) system. The spots were detected and the RF values of
amino acids were determined.
2.2.11. Chromatographic parameters
For checking the stability of the mixture and the reproducibility
of the RF values, equal volumes of 1% solutions of dl-Trp
and l-His were mixed and 1.0 or 0.015 L of the resultant mixture
was loaded on surfactant impregnated TLC and HPTLC
plates developed with mobile phase M1. The plates were dried
at 60 ◦C and spots were detected by ninhydrin solution. The
same process was repeated at the interval of 24 h for 5 days. The
chromatographic parameters such as RF (RF value of dl-Trp
minus RF value of l-His), α (separation factor), Rs (resolution)
and standard deviation were determined.
2.2.12. Limit of detection
The identification limit of l-His and dl-Trp was determined
by spotting different amounts of l-His and dl-Trp on
SDS (0.001 M) impregnated silica gel (S5) stationary phase and
developed with M1 mobile phase. The plates were detected as
described previously. The method was repeated with successive
lowering of the amount of amino acids. The lowest amount that
could be detected was taken as the limit of detection.
2.2.13. Specific detection of dl-Trp under UV radiation
For checking dl-Trp as an impurity in a sample of amino
acids, 1 mL of 0.1% solution of dl-Trp and equal volumes (1 mL
each) of 1% solution of all other amino acids (l-His, dl-Met,
l-Lys, dl-Thr and l-Leu) were mixed and 0.015L of resultant
mixture was loaded on SDS impregnated silica gel 60 F254
HPTLC plates (S13). The plates were developed with M1 and
completely dried at 60 ◦C and the fluorescence of dl-Trp was
observed under UV radiation (short wavelength).
2.2.14. Detection of Trp in drug sample
Beaded material of the capsule was fine powdered and dissolved
in 10 mL of double distilled water. Aliquot (10 L) of
the resultant sample was loaded an SDS impregnated silica layer
(S5) and developed with mobile phase (M1), followed by drying
at 60 ◦C for 20–25 min. Ninhydrin solution was used for the spot
detection.
3. Results and discussion
The results of the present study have been summarized in
Tables 1–5 and Figs. 1 and 2.
The results presented in Table 1 indicate that the mobility
of 10 essential amino acids on plain silica gel layer is influenced
marginally by the pH of borate–phosphate buffer systems
used as mobile phases. The RF values of all amino acids fluctuate
between 0.70 and 0.97 over the entire pH range (2.3, 5.38
and 9.04) of mobile phase. In view of better spot compactness,
mobile phase of pH 2.3 was selected for further studies.
Results listed in Table 2 deals with the use of silica stationary
phases impregnated with sodium dodecyl sulphate (SDS)
at five different concentration levels [i.e. much above critical
micelle concentration (CMC) (S2), above CMC (S3), at CMC
(S4), near CMC (S5), below CMC (S6)] for the chromatography
of amino acids using selected mobile phase M1 (pH 2.3
buffer). These concentration levels of SDS were selected for
impregnation, for the reasons that below CMC (0.0001 M), SDS
(CMC value of SDS in pure water is 0.0081 M) behaves as
an electrolyte whereas, above CMC (0.1 and 0.01 M) it forms
micelles and behaves entirely in different way as compared to
Tabl

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.2.3 การทดสอบแก้ไขปัญหาวิธีทดสอบ (1%) กรดอะมิโนถูกเตรียมไว้ในห้องน้ำกลั่น2.2.4 การจับใช้โซลูชัน ninhydrin 0.3% ในอะซีโตนในการตรวจพบทั้งหมดกรดอะมิโน2.2.5. ขั้นตอนที่เครื่องเขียนรหัสเครื่องเขียนขั้นตอนS1 เจล 'G'S2 เจล impregnated กับ SDS (0.1 M)S3 เจล impregnated กับ SDS (0.01 M)S4 เจล impregnated กับ SDS (0.008 M)S5 เจล impregnated กับ SDS (0.001 M)S6 เจล impregnated กับ SDS (0.0001 M)S7 เจล impregnated กับ CPC (0.1 M)S8 เจล impregnated กับ CPC (0.00003 M)S9 เจล impregnated กับ CTAB (0.1 M)S10 เจล impregnated กับ CTAB (0.0001 M)S11 เจล impregnated กับ TX-100 (0.01 M)S12 เจล impregnated กับ TX-100 (0.0001 M)S13 เจลแผ่น F254 HPTLC 60 impregnated กับ SDS 0.001 Mแผ่น F254 HPTLC 60 impregnated กับ 0.00003 M CPC เจล S14แผ่น F254 HPTLC 60 impregnated กับ 0.0001 M CTAB เจล S15S16 เจลแผ่น F254 HPTLC 60 impregnated กับมาก 0.0001 M TX 1002.2.6 การเคลื่อนระยะต่อระบบ borate – ฟอสเฟตบัฟเฟอร์เตรียมจากชุดต่าง ๆ ของกรด boric (0.04 M), กรดฟอสฟอริก(0.04 M) และโซเดียมไฮดรอกไซด์ (0.24 M) ได้ใช้เป็นมือถือขั้นตอนการรหัส pH ส่วนประกอบมือถือเฟส (v/v)กรด M1 Boric + กรดฟอสฟอริกคนละครึ่ง 2.3กรดฟอสฟอริกกรด M2 Boric + โซเดียมไฮดรอกไซด์50:50:8.6 5.38กรดฟอสฟอริกกรด M3 Boric + โซเดียมไฮดรอกไซด์50:50:23 9.042.2.7 การเตรียมแผ่น TLC(ก) แบบเจลบางชั้นแผ่น:แผ่น TLC เตรียมไว้ โดยผสมซิลิก้าเจล 'G' ด้วยน้ำกลั่นสองครั้งในอัตราส่วนปริมาณ 1:3 ด้วยค่าคงสั่นใน 5 นาทีจนสารละลายเป็นเนื้อเดียวกันได้รับน้ำผลแก่ที่เคลือบบนแผ่นแก้วด้วยการการใช้งาน Toshniwal ให้เป็นชั้นหนา 0.25 มม.แผ่นเครื่องแรกที่อบแห้งที่อุณหภูมิห้องแล้วเปิดใช้งาน โดยความร้อนที่ 100 ◦C สำหรับ 1 h หลังจากเปิดใช้งาน การแผ่นถูกเก็บไว้ในห้องแบบสุญญากาศจนใช้(ข) impregnated แผ่น TLC:แผ่นเปิดซิลิก้าเจลที่ impregnated กับระบุความเข้มข้นของ SDS (0.1, 0.01, 0.008, 0.001และ 0.0001 M), CPC (0.00003 และ 0.1 M), CTAB (0.1 และ0.0001 M) และ TX-100 (0.01 และมาก 0.0001 M) โดยการพัฒนาตามแผ่นเจลในละลายของ impregnantโดยการอบแห้งของแผ่นที่ 100 ◦C ในควบคุมด้วยระบบไฟฟ้าเตาอบสำหรับ 1 h2.2.8 การขั้นตอนทำ chromatography บางชั้นใน unimpregnated(หรือเป็นที่ธรรมดา) และ impregnated กับ SDS, CPC, CTAB หรือ TXเลเยอร์ซิลิก้าเจล 100) ในขวดแก้ว มีวิธีทดสอบ (1.0 ลิตร)ใช้ โดย micropipette ประมาณ 2 ซม.ด้านบนด้านล่างขอบของแผ่น จุดได้รับอนุญาตให้แห้งและการแผ่นได้รับการพัฒนาในห้อง chromatographic presaturatedใน 30 นาทีด้วยระบบตัวทำละลายต้องใช้จากน้อยไปมากเทคนิคการ ตัวทำละลายขึ้นถูกเก็บไว้สำหรับ 10 ซมจากการจุดของโปรแกรมประยุกต์ หลังจากพัฒนา แผ่นที่แห้งที่ 60 ◦C ตาม ด้วยพ่นกับ ninhydrin ลิ้มการแก้ปัญหา กรดอะมิโนทั้งหมดยกเว้น l proline ปรากฏเป็นม่วงจุดบนแผ่น TLC 15 – 20 นาทีที่ 60 ◦C ความร้อน l-Prolineให้จุดสีเหลือง ค่า RF ที่คำนวณได้จากค่าRL (RF ของด้านหน้าชั้นนำ) และรังสี (RF ของต่อท้ายหน้า):RF = 0.5 (RL + RT)102.2.9 แยกสำหรับแยกซึ่งกันและกัน เท่ากับปริมาณ (1.0 mL ละ) lHisและ dl Trp ได้ผสม และ 1.0 L ส่วนผสมผลแก่ถูกโหลดใน SDS (0.001 M) impregnated เจล 60 F254HPTLC (S13) หรือ SDS (0.001 M) impregnated เจล TLC (S5)แผ่น แผ่นได้รับการพัฒนา มีระยะเคลื่อนบัฟเฟอร์ pHอ.อาหรับ A. Zehra / Physicochem a:พื้นผิวและคอลลอยด์ ด้านสุขาภิบาล 301 (2007) 404-411 4072.3 จุดที่พบ และค่า RF ของการแยกกรดอะมิโนที่ถูกกำหนด2.2.10 รบกวนตรวจสอบผลของ amines, anions อนินทรีย์ และโลหะเป็นของหายากในการเคลื่อนไหวของกรดอะมิโนจะมีลักษณะสำคัญเป็นกรดอะมิโนทั้งหมดประกอบด้วยกลุ่มอะมิโน (– NH2) สำหรับการตรวจสอบรบกวนของ amines บนการแบ่งแยกพระ l และ dl Trpเป็นส่วนลงตัว (1.0 L) ของสารแปลกปลอม (1% ละลายเป็นของหายาก หรือ anions และ 1% แอลกอฮอล์โซลูชันของ amines) ได้ไอ้ด่างพร้อมผสม (1.0 L) ของ l พระ และ dl Trp.Chromatography ที่ทำกับ M1 – S5 (ระยะเคลื่อนบัฟเฟอร์ pH 2.3 และระยะเครื่องเขียน SDS (0.001 M) impregnatedระบบซิลิก้าเจล) จุดที่พบ และค่า RFกรดอะมิโนที่ถูกกำหนด2.2.11. chromatographic พารามิเตอร์สำหรับการตรวจสอบความมั่นคงของส่วนผสมและการ reproducibilityค่า RF เท่ากับปริมาณ 1% โซลูชั่นของ dl Trpและ l ของพระองค์ถูกผสม และ 1.0 หรือ L 0.015 ของผสมผลแก่โหลดบน surfactant impregnated TLC และ HPTLCแผ่นพัฒนา ด้วยระยะเคลื่อน M1 แผ่นที่แห้งที่ 60 ◦C และจุดตรวจพบ โดยโซลูชัน ninhydrin ที่กระบวนการเดียวกันถูกทำซ้ำในช่วงเวลา 24 ชม 5 วัน ที่พารามิเตอร์ chromatographic เช่น RF (RF ค่า dl Trpลบ RF ค่าของ l พระ), ด้วยกองทัพ (แยกตัว), Rs (ความละเอียด)และส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐานที่กำหนด2.2.12 ขีดจำกัดของการตรวจสอบระบุจำนวนของ l และกำหนด dl Trpด้วยการจำแตกต่างกันจำนวน l พระ และ dl-Trp บนซิลิก้าเจล (S5) กับระยะ impregnated SDS (0.001 M) และพัฒนาที่ มีระยะเคลื่อน M1 ตรวจพบเป็นแผ่นอธิบายไว้ก่อนหน้านี้ วิธีไม่ซ้ำกับต่อเนื่องลดลงของจำนวนกรดอะมิโน ยอดเงินที่ต่ำที่สุดพบถูกนำมาเป็นข้อจำกัดของการตรวจสอบได้2.2.13 เฉพาะตรวจ dl-Trp ภายใต้รังสีสำหรับตรวจสอบ dl Trp เป็นมลทินในตัวอย่างของอะมิโนกรด 1 mL ของ 0.1% ของ dl Trp และวอลุ่มเท่า (1 mLแต่ละ) ของ 1% ของทั้งหมดอื่น ๆ กรดอะมิโน (l พระ dl พบผสม l Lys, dl Thr และ l ลือ) และ L 0.015 ของ resultantส่วนผสมมีการโหลดใน SDS impregnated เจล 60 F254แผ่น HPTLC (S13) แผ่นได้รับการพัฒนากับ M1 และทั้งแห้งที่ 60 ◦C และ fluorescence ของ dl Trpสังเกตภายใต้รังสี (ความยาวคลื่นสั้น)2.2.14 ตรวจของ Trp ในตัวอย่างยาเสพติดวัสดุลูกปัดของแคปซูลถูกดีผง และส่วนยุบใน 10 มล.น้ำกลั่นคู่ ส่วนลงตัว (10 ลิตร) ของตัวอย่างผลแก่มีการโหลดชั้นเพิ่มซิลิก้า impregnated SDS(S5) และพัฒนา ด้วยระยะเคลื่อน (M1), ตาม ด้วยการอบแห้งที่ 60 ◦C สำหรับ 20 – 25 นาที Ninhydrin ใช้โซลูชันสำหรับจุดตรวจสอบ3. ผลลัพธ์ และสนทนามีการสรุปผลการศึกษาปรากฏในตาราง 1 – 5 และ Figs. 1 และ 2ผลที่แสดงในตารางที่ 1 บ่งชี้ว่า การเคลื่อนไหวกรดอะมิโนจำเป็น 10 ในเจลธรรมดา ชั้นได้รับอิทธิพลเปิด โดยค่า pH ของระบบบัฟเฟอร์ borate – ฟอสเฟตใช้เป็นเฟสเคลื่อนที่ ค่า RF ของกรดอะมิโนทั้งหมดผันผวนระหว่าง 0.70 และ 0.97 ช่วง pH ทั้ง (2.3, 5.38และ 9.04) ของเฟสเคลื่อนที่ มุมมองดี compactness จุดระยะเคลื่อนที่ของ pH 2.3 เลือกศึกษาเพิ่มเติมผลที่แสดงในตารางที่ 2 ข้อเสนอมีการใช้ซิลิก้าเครื่องเขียนระยะ impregnated กับโซเดียมซัลเฟต dodecyl (SDS)ที่ระดับความเข้มข้นแตกต่างกันห้า [เช่นมากข้างต้นที่สำคัญเข้มข้นของ micelle (CMC) (S2), เหนือ CMC (S3), ที่ CMC(S4), ใกล้ CMC (S5), ด้านล่าง CMC (S6)] ในการ chromatographyกรดอะมิโนที่ใช้มือถือเลือกระยะ M1 (pH 2.3บัฟเฟอร์) เลือกระดับความเข้มข้นเหล่านี้ขององค์กรในทำให้มีขึ้น สำหรับเหตุผลที่ CMC (มาก 0.0001 M), SDS(ค่า CMC ของ SDS ในน้ำบริสุทธิ์เป็น 0.0081 M) เป็นการทำงานของมีอิเล็กโทรในขณะที่ เหนือ CMC (0.1 และ 0.01 M) แบบmicelles และการทำงานทั้งหมดในวิธีที่แตกต่างกันเป็น compared เพื่อTabl

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.2.3 วิธีทดสอบ
การแก้ปัญหาการทดสอบ (1%) กรดอะมิโนได้จัดทำขึ้นคู่
น้ำกลั่น.
2.2.4 เครื่องตรวจจับ
0.3% ninhydrin วิธีการแก้ปัญหาในอะซีโตนถูกนำมาใช้ในการตรวจสอบทั้งหมด
กรดอะมิโน.
2.2.5 ขั้นตอนการเขียน
ขั้นตอนการเขียนรหัส
S1 ซิลิกาเจล 'G'
S2 ซิลิกาเจลชุบด้วย SDS (0.1 M)
ซิลิก้าเจล S3 ชุบด้วย SDS (0.01 M)
S4 ซิลิกาเจลชุบด้วย SDS (0.008 M)
S5 ซิลิกาเจลชุบด้วย SDS (0.001 M )
S6 ซิลิก้าเจลชุบด้วย SDS (0.0001 M)
S7 ซิลิกาเจลชุบด้วย CPC (0.1 M)
S8 ซิลิกาเจลชุบด้วย CPC (0.00003 M)
S9 ซิลิกาเจลชุบด้วย CTAB (0.1 M)
S10 ซิลิกาเจลชุบด้วย CTAB (0.0001 M )
ซิลิก้าเจล S11 ชุบด้วย TX-100 (0.01 M)
S12 ซิลิกาเจลชุบด้วย TX-100 (0.0001 M)
S13 ซิลิกาเจล 60 F254 แผ่น HPTLC ชุบด้วย 0.001 M SDS
ซิลิกาเจล S14 60 F254 แผ่น HPTLC ชุบด้วย 0.00003 M CPC
S15 ซิลิก้าเจล 60 F254 แผ่น HPTLC ชุบด้วย 0.0001 M CTAB
ซิลิกาเจล S16 60 F254 แผ่น HPTLC ชุบด้วย 0.0001 M TX-100
2.2.6 เฟสเคลื่อนที่
ต่อไปนี้ระบบบัฟเฟอร์ borate ฟอสเฟตที่เตรียมจาก
ชุดต่างๆของกรดบอริก (0.04 M), กรดฟอสฟอรัส
(0.04 M) และโซดาไฟ (0.24 M) ถูกนำมาใช้เป็นโทรศัพท์มือถือ
ขั้นตอน.
รหัสเฟสมือถือ (v / v) องค์ประกอบค่า pH
M1 กรดบอริก + กรดฟอสฟอรัส 50:50 2.3
กรดบอริก M2 + กรดฟอสฟอรัส + โซเดียม
ไฮดรอกไซ
50: 50: 8.6 5.38
M3 กรดบอริกกรดฟอสฟอรัส + + โซเดียม
ไฮดรอกไซ
50:50:23 9.04
2.2.7 การจัดทำแผ่น TLC
(ก) ซิลิกาเจลธรรมดาแผ่นชั้นบาง ๆ :
แผ่น TLC ถูกจัดทำขึ้นโดยซิลิกาเจลผสม 'G' กับ
น้ำกลั่นคู่ใน 1: 3 อัตราส่วนปริมาณที่มีอย่างต่อเนื่อง
. เขย่าเป็นเวลา 5 นาทีจนเป็นเนื้อเดียวกันสารละลายที่ได้รับ
ผลสารละลาย ถูกเคลือบบนแผ่นกระจกที่มี
ความช่วยเหลือของ applicator Toshniwal ที่จะให้ 0.25 มิลลิเมตรหนา.
แผ่นแรกถูกอากาศแห้งที่อุณหภูมิห้องแล้ว
เปิดใช้งานด้วยความร้อนที่ 100 ◦Cเป็นเวลา 1 ชั่วโมง หลังจากที่เปิดใช้งาน
แผ่นที่ถูกเก็บไว้ในห้องสุญญากาศจนใช้.
(ข) ชุบแผ่น TLC:
แผ่นเจลซิลิก้าเปิดใช้งานถูกฉาบไว้ด้วย
ความเข้มข้นที่ต้องการของ SDS (0.1, 0.01, 0.008, 0.001
และ 0.0001 M), CPC (0.1 และ 0.00003 M), CTAB (0.1 และ
0.0001 M) และ TX-100 (0.01 และ 0.0001 M) โดยการพัฒนา
แผ่นซิลิกาเจลในสารละลายของ impregnant ตาม
โดยการอบแห้งของแผ่นเปลือกโลกที่ 100 ◦Cในควบคุมด้วยระบบไฟฟ้า
เตาอบเป็นเวลา 1 ชั่วโมง
2.2.8 ขั้นตอนการ
รชั้นบางได้รับการดำเนินการเกี่ยวกับ unimpregnated
(หรือเปล่า) และชุบ (ระบบ SDS CPC, CTAB หรือ TX-
100) ชั้นซิลิกาเจลในขวดแก้ว โซลูชั่นการทดสอบ (1.0 ลิตร) ถูก
นำมาใช้โดยวิธีการของ micropipette ประมาณ 2 เซนติเมตรเหนือตอนล่าง
ขอบของแผ่นเปลือกโลก จุดที่ได้รับอนุญาตให้แห้งแล้ว
แผ่นได้รับการพัฒนาในห้อง presaturated โครมา
เป็นเวลา 30 นาทีมีระบบตัวทำละลายที่ต้องการใช้ทั้งหมดจาก
เทคนิค ขึ้นตัวทำละลายถูกเก็บไว้ไม่เกิน 10 ซม. จาก
จุดของการประยุกต์ใช้ หลังจากที่พัฒนาแผ่นแห้ง
ที่ 60 ◦Cตามด้วยการฉีดพ่นด้วยปรุงสดใหม่ ninhydrin
การแก้ปัญหา กรดอะมิโนทั้งหมดยกเว้น l-โพรลีนสีม่วงปรากฏเป็น
จุดบนแผ่น TLC ร้อนประมาณ 15-20 นาทีที่ 60 ◦C l-Proline
ให้จุดสีเหลือง ค่า RF จะถูกคำนวณจากค่า
ของ RL (RF ของด้านหน้าชั้นนำ) และ RT (RF ของท้าย
ด้านหน้า):
RF = 0.5 (RL + RT)
10
2.2.9 แยก
ร่วมกันสำหรับการแยกปริมาณที่เท่ากัน (1.0 มิลลิลิตรในแต่ละ) ของ lHis
และ DL-Trp ถูกผสมและ 1.0 ลิตรผสมผล
ถูกโหลดใน SDS (0.001 M) ชุบซิลิกาเจล 60 F254
HPTLC (S13) หรือ SDS (0.001 M ) ซิลิกาเจลชุบ TLC (S5)
แผ่น แผ่นได้รับการพัฒนาที่มีค่า pH บัฟเฟอร์เฟสเคลื่อนที่
เอ โมฮัมหมัดเอ Zehra / คอลลอยด์และพื้นผิว: Physicochem Eng ด้าน 301 (2007) 404-411 407
2.3 จุดที่ถูกตรวจพบและค่า RF ของแยก
กรดอะมิโนที่ได้รับการพิจารณา.
2.2.10 แทรกแซง
การตรวจสอบผลกระทบของเอมีน, แอนไอออนนินทรีย์และโลหะ
ไพเพอร์ในการเคลื่อนไหวของกรดอะมิโนที่เป็นสิ่งสำคัญเป็น
กรดอะมิโนทั้งหมดมีกลุ่มอะมิโน (-NH2) สำหรับการตรวจสอบการ
รบกวนของเอมีนในการแยก l-ของเขาและ DL-Trp,
aliquot (1.0L) ของสารต่างประเทศ (1% สารละลาย
ของไพเพอร์หรือแอนไอออนและ 1% วิธีการแก้ปัญหาที่มีส่วนผสมของเอมีน) ถูก
พบพร้อมกับส่วนผสม ( 1.0L) ของ l-ของเขาและ DL-Trp.
โคได้ดำเนินการกับ M1-S5 (เฟสเคลื่อนที่,
บัฟเฟอร์ pH 2.3 และเฟส, SDS (0.001 M) ชุบ
ซิลิกาเจล) ระบบ จุดที่ได้รับการตรวจพบและค่า RF ของ
กรดอะมิโนที่ได้รับการพิจารณา.
2.2.11 พารามิเตอร์โครมา
สำหรับการตรวจสอบความมั่นคงของส่วนผสมและการทำสำเนา
ของค่า RF ปริมาณที่เท่ากันของโซลูชั่น 1% ของ DL-Trp
และ l-ของเขาถูกผสมและ 1.0 หรือ 0.015 ลิตรผสมผล
ถูกโหลดบนผิวชุบ TLC และ HPTLC
แผ่นการพัฒนากับเฟสเคลื่อนที่ M1 แผ่นแห้ง
ที่ 60 ◦Cและจุดที่ถูกตรวจพบโดยใช้ ninhydrin การแก้ปัญหา
กระบวนการเดียวกันซ้ำแล้วซ้ำอีกในช่วงเวลา 24 ชั่วโมงเป็นเวลา 5 วัน
พารามิเตอร์โครมาเช่นคลื่นความถี่วิทยุ (RF ค่าของ DL-Trp
ลบค่าของ RF l-ของเขา) α (ปัจจัยแยก), อาร์เอส (ความละเอียด)
และค่าเบี่ยงเบนมาตรฐานได้รับการพิจารณา.
2.2.12 ขีด จำกัด ของการตรวจสอบ
วงเงินบัตรประจำตัวของ l-ของเขาและ DL-Trp ถูกกำหนด
โดยจุดแตกต่างของปริมาณ l-ของเขาและ DL-Trp ใน
SDS (0.001 M) ชุบซิลิกาเจล (S5) เฟสและ
พัฒนาด้วย M1 เฟสเคลื่อนที่ แผ่นถูกตรวจพบว่าเป็น
ที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ วิธีการซ้ำที่มีต่อเนื่อง
ลดปริมาณของกรดอะมิโน จำนวนเงินต่ำสุดที่
สามารถตรวจพบได้ถูกนำมาเป็นข้อ จำกัด ของการตรวจสอบ.
2.2.13 การตรวจสอบที่เฉพาะเจาะจงของ DL-Trp ภายใต้รังสียูวี
สำหรับการตรวจสอบ DL-Trp เป็นสิ่งเจือปนในกลุ่มตัวอย่างของอะมิโน
กรด 1 มิลลิลิตรของสารละลาย 0.1% ของ DL-Trp และปริมาณที่เท่ากัน (1 มิลลิลิตร
ในแต่ละ) ของการแก้ปัญหา 1% ของอะมิโนอื่น ๆ กรด (l-เขาดล-Met,
l-Lys, DL-ที่นั่นและ l-Leu) ถูกผสมและ 0.015L ผลของ
ส่วนผสมที่ถูกโหลดใน SDS ชุบซิลิกาเจล 60 F254
แผ่นเพลต (S13) แผ่นได้รับการพัฒนาด้วย M1 และ
แห้งสนิทที่ 60 ◦Cและการเรืองแสงของ DL-Trp ถูก
ตั้งข้อสังเกตภายใต้รังสียูวี (ความยาวคลื่นสั้น).
2.2.14 การตรวจหา Trp ยาเสพติดในกลุ่มตัวอย่าง
วัสดุลูกปัดของแคปซูลถูกปรับผงและละลาย
ใน 10 มิลลิลิตรของน้ำกลั่นคู่ aliquot (10 ลิตร)
ตัวอย่างผลถูกโหลด SDS ชุบชั้นซิลิกา
(S5) และการพัฒนากับเฟสเคลื่อนที่ (M1) ตามด้วยการอบแห้ง
ที่ 60 ◦C 20-25 นาที วิธีการแก้ปัญหา ninhydrin ที่ใช้สำหรับจุดที่
การตรวจสอบ.
3 ผลและการอภิปราย
ผลการศึกษาครั้งนี้ได้รับการสรุปไว้ใน
ตารางที่ 1-5 และมะเดื่อ 1 และ 2
ผลการแสดงในตารางที่ 1 แสดงให้เห็นว่าการเคลื่อนไหว
ของ 10 กรดอะมิโนในชั้นซิลิกาเจลธรรมดาได้รับอิทธิพล
เล็กน้อยโดยค่า pH ของระบบบัฟเฟอร์ borate ฟอสเฟต
ใช้เป็นขั้นตอนที่โทรศัพท์มือถือ ค่า RF ของกรดอะมิโนทั้งหมดมีความผันผวน
ระหว่าง 0.70 และ 0.97 ในช่วงค่า pH ทั้งหมด (2.3, 5.38
และ 9.04) ของเฟสเคลื่อนที่ ในมุมมองของความเป็นปึกแผ่นจุดที่ดีกว่า
เฟสเคลื่อนที่ของค่า pH 2.3 ได้รับเลือกสำหรับการศึกษาต่อไป.
ผลการระบุไว้ในตารางที่ 2 ข้อเสนอที่มีการใช้เครื่องเขียนซิลิกา
ขั้นตอนการชุบด้วยโซเดียมโดเดซิลซัลเฟต (SDS)
ที่ห้าระดับความเข้มข้นที่แตกต่างกัน [คือมากดังกล่าวข้างต้นที่สำคัญ
ไมเซลล์ ความเข้มข้น (CMC) (S2) เหนือ CMC (S3) ที่ซีเอ็มซี
(S4) ใกล้ CMC (S5) ด้านล่าง CMC (S6)] สำหรับโค
กรดอะมิโนที่เลือกใช้เฟสเคลื่อนที่ M1 (pH 2.3
บัฟเฟอร์) เหล่านี้ระดับความเข้มข้นของ SDS ถูกเลือกสำหรับ
การทำให้มีเหตุผลที่ด้านล่าง CMC (0.0001 M), SDS
(ค่า CMC ของ SDS ในน้ำบริสุทธิ์ 0.0081 M) ทำงานเป็น
อิเล็กโทรไลขณะที่เหนือ CMC (0.1 และ 0.01 M) มันเป็น
micelles และพฤติกรรมทั้งหมดในวิธีที่แตกต่างเมื่อเทียบกับ
Tabl

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.2.3 . ทดสอบโซลูชั่นโซลูชั่น
ทดสอบ ( 1% ) ของกรดอะมิโนที่ถูกเตรียมไว้ในน้ำกลั่น 2
.
2.2.4 . เครื่องตรวจจับ
โซลูชั่น ninhydrin 0.3% ) ถูกใช้เพื่อตรวจหากรดอะมิโนทั้งหมด
.
2.2.5 . เครื่องเขียนรหัสเฟสเฟส

) S1 ซิลิกาเจล ' g '
S2 ซิลิกาเจลที่ชุบด้วย SDS ( 0.1 M )
S3 ซิลิกาเจลที่ชุบด้วย SDS ( 0.01 M )
S4 ซิลิกาเจลที่ชุบด้วย SDS (
/ M )S5 ซิลิกาเจลที่ชุบด้วย SDS ( 0.001 m )
s6 ซิลิกาเจลที่ชุบด้วย SDS ( 2 M ) S7
ซิลิกาเจล impregnated กับ CPC ( 0.1 M )
s8 ซิลิกาเจล impregnated กับ CPC ( 0.00003 m )
3 ซิลิกาเจลที่ชุบด้วย ctab ( 0.1 M )
S10 ซิลิกาเจลที่ชุบด้วย ctab ( 26 ม. )
S11 ซิลิกาเจลที่ชุบด้วย tx-100 ( 0.01 M )
s12 ซิลิกาเจลที่ชุบด้วย tx-100 ( 2 M )
s13 ซิลิกาเจล 60 f254 hptlc แผ่นชุบด้วย 0.001 M SDS
s14 ซิลิกาเจล 60 f254 hptlc แผ่นชุบด้วย 0.00003 M CPC
S15 ซิลิกาเจล 60 f254 hptlc แผ่นชุบด้วย 2 M ctab
s16 ซิลิกาเจล 60 f254 hptlc แผ่นชุบด้วย 2 M tx-100
2.2.6 . เฟสเคลื่อนที่
ต่อไปนี้บอเรตและฟอสเฟตบัฟเฟอร์ระบบที่เตรียมจาก
ชุดต่าง ๆของกรดบอริก ( 0.04 M )กรดฟอสฟอริค
( 0.04 M ) และโซเดียม ไฮดรอกไซด์ ( 0.24 m ) ถูกใช้เป็นมือถือ

รหัสเฟส เฟสเคลื่อนที่ ( v / v ) องค์ประกอบ pH
M1 กรด กรดฟอสฟอริค ปี 2.3
m2 boric acid กรดฟอสฟอริกโซเดียมไฮดรอกไซ

50:50:8.6 5.38
M3 boric acid กรดฟอสฟอริกโซเดียม

50:50:23 9.04 โซดาไฟ
2.2.7 . การเตรียมแผ่นธรรมดา (
( )
: แผ่นซิลิกาเจลบางๆมีจานเตรียมโดยการผสมซิลิกาเจล ' g '
2 น้ำกลั่นในอัตราส่วน 1 : 3 ปริมาตรคงที่
เขย่าเป็นเวลา 5 นาทีจนเป็นเนื้อเดียวกันเสียได้ .
ซึ่งเป็นแป้งที่เคลือบบนแผ่นแก้วด้วย
ช่วยของ applicator toshniwal ให้ 0.25 มม. หนาชั้น
จานถูกอากาศ ก่อนอบแห้งที่อุณหภูมิห้อง จากนั้นใช้ความร้อนที่อุณหภูมิ 100 ◦
C เป็นเวลา 1 ชั่วโมงหลังจากการเปิดใช้งาน ,
แผ่นถูกห้องแน่นหนาจนใช้ .
( B ) ชุบทีแอลซี : แผ่นใช้แผ่นมีซิลิกาเจล

ที่ต้องการชุบกับความเข้มข้นของ SDS ( 0.1 , 0.01 และ 0.001
= 0.008 , CPC ( M ) , 0.1 และ 0.00003 M )
2 ctab ( 0.1 และ เมตร ) และ tx-100 ( 0.01 และ 0.0001 ) โดยการพัฒนา
ซิลิกาเจลแผ่นในสารละลายของ impregnant ตาม
โดยการอบแห้งจานที่ 100 ◦ C ในระบบไฟฟ้าควบคุมเตาอบเป็นเวลา 1 ชั่วโมง

2.2.8 . วิธีโครมาโตกราฟี
บางๆ มีการ unimpregnated
( หรือธรรมดา ) และชุบด้วย SDS , CPC , ctab หรือ TX -
100 ) ซิลิกาเจลเลเยอร์ในขวดแก้ว ทดสอบโซลูชั่น ( สำหรับผม )
ประยุกต์โดยใช้ไมโครปิเปตต์ประมาณ 2 เซนติเมตร เหนือล่าง
ขอบจาน จุดที่ได้รับอนุญาตให้แห้ง แล้ว
จานถูกพัฒนาขึ้นในห้อง และ presaturated
30 นาทีโดยใช้ระบบตัวทำละลายที่ต้องการขึ้น
เทคนิค ทางขึ้นตัวทำละลายที่ถูกเก็บไว้ไม่เกิน 10 เซนติเมตร จาก
จุดของการประยุกต์ใช้ หลังจากการพัฒนาแผ่นแห้ง
ที่ 60 ◦ C ตามด้วยการฉีดพ่นด้วยเตรียมสด ninhydrin
โซลูชั่น ทั้งหมดกรดอะมิโนโพรปรากฏเป็นสีม่วง
ยกเว้นจุดบนแผ่นความร้อน ( 15 – 20 นาทีที่ 60 ◦ซี. โพร
ให้จุดสีเหลือง RF ค่าคำนวณจากค่า
ของ RL ( RF หน้าา ) และ RT ( RF ต่อท้าย
ด้านหน้า ) :
RF = 0.5 ( RL RT )

2.2.9 10 . แยก
เพื่อแยกซึ่งกันและกัน ปริมาณเท่ากัน ( 1.0 มล. ในแต่ละ ) และ lhis
DL TRP ผสม 1.0 ลิตร
ผสมซึ่งถูกโหลดบน SDS ( 0001 m ) ชุบซิลิกาเจล 60 f254
hptlc ( s13 ) หรือ SDS ( 0.001 m ) ชุบ TLC ซิลิกาเจล ( S5 )
แผ่น จานถูกพัฒนาเป็นเฟสเคลื่อนที่บัฟเฟอร์ pH
. Mohammad , อ. Zehra / คอลลอยด์และพื้นผิว : physicochem . อังกฤษด้าน 301 ( 2550 ) – 411 404 407
2.3 , จุดตรวจพบค่า Rf ของแยกกรดอะมิโนถูก
.
2.2.10 . รบกวน
ศึกษาผลกระทบของแอนไอออนอนินทรีย์สารเอมีน และโลหะ
ในการเคลื่อนไหวของกรดอะมิโนคือ กว้างยาวสำคัญ
กรดอะมิโนทั้งหมดประกอบด้วยหมู่อะมิโน ( - nh2 ) ตรวจสอบ
การรบกวนของเอมีนในการแยกและ l-his DL ก
เป็นส่วนลงตัว ( 1.0l ) สารต่างประเทศ ( 1% ของไอออนบวกหรือไอออนสารละลาย
และสารละลายแอลกอฮอล์ 1% ของเอมีน ) คือ
ด่างพร้อมกับส่วนผสม ( 1.0l ) และ l-his DL TRP .
โครมาโทกราฟีได้กับ M1 ( S5 ( มือถือเฟส
บัฟเฟอร์ pH 2.3 และเครื่องเขียนเฟส , SDS ( 0.001 m ) ชุบ
ซิลิกาเจล ) ระบบ จุดที่ตรวจพบและ RF ค่า

2.2.11 กรดอะมิโนเป็น . .
พารามิเตอร์และเพื่อตรวจสอบเสถียรภาพของส่วนผสมและตรวจสอบ
ของ RF ค่าปริมาณเท่ากับ 1 %
TRP และโซลูชั่นของ DL l-his ผสม 1.0 หรือ 0.015 l
ผสมซึ่งเป็นสารลดแรงตึงผิวและชุบทินโหลด hptlc
แผ่นพัฒนาเฟสเคลื่อนที่ M1 จานแห้ง
ที่ 60 ◦ C และจุดที่ถูกตรวจพบโดย ninhydrin โซลูชั่น
กระบวนการเดียวกันซ้ำในช่วง 24 ชั่วโมง เป็นเวลา 5 วัน
และพารามิเตอร์เช่น RF ( RF ของค่า DL TRP
ลบค่า RF l-his ) α ( ปัจจัยการแยก ) , RS ( ความละเอียด ) และส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐานวิเคราะห์
.
2.2.12 . ขีดจำกัดของการตรวจหาและระบุขอบเขตของ l-his

DL TRP ตั้งใจ โดยเฉพาะปริมาณและ l-his DL TRP ใน
SDS ( 0.001 m ) ชุบซิลิกาเจล ( S5 ) เครื่องเขียนและพัฒนากับ M1
เฟสเฟสเคลื่อนที่ .จานถูกตรวจพบโดย
ที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ วิธีการทำซ้ำกับต่อเนื่อง
ลดปริมาณของกรดอะมิโน สุดยอด
สามารถตรวจพบได้ถูกกล่าวหาว่าเป็นขีดจำกัดของการตรวจหา
2.2.13 . เฉพาะการ DL TRP ภายใต้
รังสี UV ตรวจ DL TRP เป็นสิ่งเจือปนในตัวอย่างของกรดอะมิโน
1 มิลลิลิตรของสารละลาย 0.1% DL TRP และเท่าเทียมกัน ( ปริมาณ 1 มิลลิลิตร
แต่ละ ) 1% สารละลายของกรดอะมิโนอื่น ๆทั้งหมด ( l-his , DL กัน
l-lys , DL Thr และ l-leu ) ผสมส่วนผสมดังกล่าว 0.015l
ถูกโหลดบน SDS ชุบซิลิกาเจล 60 f254
hptlc แผ่น ( s13 ) จานถูกพัฒนาด้วย M1
อย่างสมบูรณ์และอบแห้งที่อุณหภูมิ 60 องศาเซลเซียส และ◦เรืองแสงของ DL trp คือ
สังเกตภายใต้รังสี UV ( ความยาวคลื่นสั้น )
2.2.14 . การตรวจหา TRP ใน
ตัวอย่างยาวัสดุลูกปัดของแคปซูลผง และละลายได้ดีใน
10 ml เพิ่มน้ำกลั่น ส่วนที่หารลงตัว ( 10 ลิตร ) ของตัวอย่างดังกล่าวถูกโหลด

( มีเฉพาะชั้นชุบซิลิกา S5 ) และพัฒนากับเฟสเคลื่อนที่ ( M1 ) ตามด้วยการอบแห้ง
ที่ 60 ◦ C 20 – 25 นาที ninhydrin สารละลายที่ใช้สำหรับจุดตรวจจับ
.
3 ผลและการอภิปราย
ผลการศึกษาได้สรุปใน
ตารางที่ 1 – 5 และมะเดื่อ . 1 และ 2
ผลลัพธ์แสดงในตารางที่ 1 พบว่า การเคลื่อนไหว
10 กรดอะมิโนแผ่นซิลิกาเจลธรรมดาคืออิทธิพล
เล็กน้อยโดยความเป็นกรดของบอเรตและฟอสเฟตบัฟเฟอร์ระบบ
ใช้เป็นเฟสเคลื่อนที่ RF คุณค่าของกรดอะมิโนทั้งหมดผันผวน
ระหว่าง 0.70 และ 0.97 ผ่านช่วง pH ทั้งหมด ( 2.3 , 5.38
กับ 9.04 ) ของเฟสเคลื่อนที่ . ในมุมมองของจุดแข็งดีกว่า
เฟสเคลื่อนที่ของความเป็นกรด 2.3 ถูกเลือกสำหรับการศึกษา .
ผลลัพธ์อยู่ในรางที่ 2 เกี่ยวข้องกับการใช้ซิลิกาเครื่องเขียน
ขั้นตอนที่ชุบด้วยสารละลายโซเดียมโดเดซิลซัลเฟต ( SDS ) ที่ระดับความเข้มข้นแตกต่างกัน
5 [ คือความเข้มข้นไมเซลล์วิกฤติมาก ข้างบน
( CMC ) ( S2 ) ข้างต้น CMC ( S3 ) ที่ CMC
( S4 ) , ใกล้ CMC ( S5 )ด้านล่าง CMC ( s6 ) ] สำหรับโครมาโตกราฟี
ของกรดอะมิโนที่ใช้เลือกเฟสเคลื่อนที่ M1 ( pH 2.3
บัฟเฟอร์ ) เหล่านี้ระดับความเข้มข้นของ SDS ได้คัดเลือก
เคลือบด้วยเหตุผลด้านล่างที่ CMC ( 2 เมตร ) , SDS
( CMC คุณค่าของ SDS ในน้ำบริสุทธิ์เป็น 0.0081 M ) ทำตัวเป็น
เป็นอิเล็กโทรไลต์ ส่วนข้างบน CMC ( 0.1 และ 0.01 M ) รูปแบบ
มัและการทํางานในลักษณะที่แตกต่างกันเมื่อเทียบกับทั้งหมด
โต๊ะ