2.9. MTT assayCancer/normal cell li

2.9. MTT assay
Cancer/normal cell lines (with cell density of 1.2  104 cell/well)
were seeded into each well of the 96-well microplates (Nunc,
Denmark) and incubated under cell growth conditions. According
to the adequate number of viable probiotic cells for fresh dairy
products (1e10  106 CFU/ml), 10 concentration rates (5 mg/ml to
50 mg/ml) were screened on four cancer cell lines. Different concentrations
of sterile bacterial secretions, pronase (Roche Applied
Science) treated/untreated secretions, were administrated into
each well after post-seeding for 24 h. Treated/untreated cell lines
were incubated for 48 h. The medium of each well after incubation
was replaced with equally fresh media containing 20 ml of MTT
solution (2 mg/ml). Incubation was continued under dark conditions
for 4 h. The medium of each well was again replaced with
200 ml DMSO plus 25 ml of Sorenson's glycine buffer (0.1 Mglycine,
0.1 M NaCl, pH 10.5) and incubated for 30 min at 37 C. The
absorbent of microplates were read using m Quant ELISA Reader
(Bio-tek Instruments, USA) at 570 nm. Taxol, as a famous anticancer
drug, was used as a positive control in this assessment

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.9 การ MTT assayบรรทัดที่เซลล์มะเร็ง/ปกติ (มีความหนาแน่นเซลล์ 1.2 104 เซลล์/ดี)มี seeded ในแต่ละดี microplates ดี 96 (Nuncเดนมาร์ก) และ incubated ภายใต้เงื่อนไขการเติบโตของเซลล์ ตามจำนวนเซลล์นมสดโปรไบโอติกส์ทำงานได้เพียงพอผลิตภัณฑ์ (1e10 106 CFU/ml) อัตราความเข้มข้น 10 (5 mg/ml ให้50 mg/ml) ถูกฉายบนบรรทัดสี่บรรทัดของเซลล์มะเร็ง ความเข้มข้นแตกต่างกันของใส่แบคทีเรียหลั่ง pronase (โรใช้วิทยาศาสตร์) รับ/ไม่ถูกรักษาหลั่ง ถูก administrated เป็นดีแต่ละหลังปลูกหลัง 24 h. รักษา/ไม่ถูกรักษาเซลล์บรรทัดมี incubated สำหรับ 48 h สื่อที่ดีแต่ละหลังจากบ่มถูกแทนที่ ด้วยกันสดสื่อประกอบด้วยปริมาณ 20 ml ของ MTTโซลูชั่น (2 mg/ml) บ่มเพาะวิสาหกิจได้อย่างต่อเนื่องภายใต้เงื่อนไขที่เข้มสำหรับ 4 h สื่อดีละถูกแทนอีกด้วยDMSO 200 ml บวก 25 ml ของ Sorenson glycine บัฟเฟอร์ (0.1 Mglycine0.1 M NaCl, pH 10.5) และ incubated สำหรับ 30 นาทีที่ 37 C. การดูดซับของ microplates ถูกอ่านโดยใช้ m Quant ELISA อ่าน(เครื่องมือชีวภาพ-tek สหรัฐอเมริกา) ที่ 570 nm Taxol เป็นชื่อเสียง anticancerยา ใช้เป็นตัวควบคุมค่าบวกในการประเมินนี้

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.9 MTT ทดสอบ
มะเร็ง / เซลล์ปกติ (ที่มีความหนาแน่นของเซลล์ 1.2? 104 เซลล์ / ดี)
เข้าไปในเมล็ดดีของแต่ละ 96 หลุม microplates (Nunc,
เดนมาร์ก) และบ่มภายใต้เงื่อนไขการเจริญเติบโตของเซลล์ ตาม
จำนวนที่เพียงพอของโปรไบโอติกเซลล์ทำงานได้สำหรับนมสด
ผลิตภัณฑ์ (1e10? 106 CFU / ml) อัตราความเข้มข้น 10 (5 mg / ml เพื่อ
50 mg / ml) ได้รับการคัดเลือกในเซลล์มะเร็งสี่ ความเข้มข้นที่แตกต่างกัน
ของแบคทีเรียหลั่งหมัน pronase (Roche ประยุกต์
วิทยาศาสตร์) ได้รับการปฏิบัติ / การหลั่งได้รับการรักษาที่ถูกปกครองออกเป็น
แต่ละดีหลังจากที่โพสต์เพาะเป็นเวลา 24 ชั่วโมง ได้รับการรักษา / เซลล์ได้รับการรักษา
ที่ถูกบ่มเป็นเวลา 48 ชั่วโมง กลางของแต่ละดีหลังจากบ่ม
ถูกแทนที่ด้วยสื่อที่สดใหม่อย่างเท่าเทียมกันมี 20 มิลลิลิตร MTT
วิธีการแก้ปัญหา (2 mg / ml) บ่มเพาะได้อย่างต่อเนื่องภายใต้เงื่อนไขที่มืด
เป็นเวลา 4 ชั่วโมง สื่อของดีแต่ละถูกแทนที่อีกครั้งกับ
200 มล DMSO บวก 25 มล. ของ buffer glycine ของโซเรน (0.1 Mglycine,
0.1 M NaCl ค่า pH 10.5) และบ่มเป็นเวลา 30 นาทีที่ 37 องศาเซลเซียส
ดูดซับของ microplates ถูกอ่านได้โดยใช้วิธี ELISA มควอนท์อ่าน
(Bio-tek เครื่องมือสหรัฐอเมริกา) ที่ 570 นาโนเมตร Taxol เป็นมะเร็งที่มีชื่อเสียงของ
ยาเสพติดที่ถูกนำมาใช้เป็นตัวควบคุมในเชิงบวกในการประเมินนี้

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.9 . MTT assay
มะเร็ง / ปกติเซลล์ ( เซลล์มีความหนาแน่น 1.2  104 เซลล์ / ดี )
1 เมล็ดในแต่ละอย่างดีของ 96 ดี microplates ( ขณะนี้ ,
เดนมาร์ก ) โดยภายใต้เงื่อนไขการเจริญเติบโตของเซลล์ ตาม
จำนวนเพียงพอของเซลล์โพรไบโอติกสายนม
สด ( 1e10  106 cfu / ml ) 10 อัตราความเข้มข้น 5 mg / ml

50 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร ) มี 4 เส้น เซลล์มะเร็งที่ความเข้มข้นต่างๆ
ของหลั่งแบคทีเรียฆ่าเชื้อโปรเนส (
วิทยาศาสตร์ประยุกต์ โรช ) ดูแล / รักษาหลั่ง มีรายหนึ่งเป็น
กันหลังการรักษาเป็นเวลา 24 ชั่วโมง / รักษาเซลล์
ถูกบ่ม 48 ชั่วโมงกลางของแต่ละดีหลังจากบ่ม
ถูกแทนที่ด้วยกันสดสื่อที่มี 20 ml ของ MTT
โซลูชั่น ( 2 mg / ml )บ่มเพาะได้ อย่างต่อเนื่อง ภายใต้เงื่อนไขที่มืด
4 H . สื่อกันอีกครั้งแทนที่ด้วย
200 ml DMSO บวก 25 มิลลิลิตรของเพลที่มีบัฟเฟอร์ ( 0.1 mglycine
0.1 M NaCl , pH 10.5 ) และบ่มที่ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 30 นาที 
ดูดซับของ microplates อ่านโดยใช้เครื่องอ่านอีไลเมตรคว ท์
( สหรัฐอเมริกาเครื่องมือ เทคไบโอ ) ที่ 570 นาโนเมตร แทคซอลเป็นยาต้านมะเร็ง
ที่มีชื่อเสียงถูกใช้เป็นตัวควบคุมบวกในการประเมินนี้