Marburg virus (MARV) and Ebola viru

Marburg virus (MARV) and Ebola virus (EBOV), members of the family Filoviridae, represent a significant challenge to global public health. Currently, no licensed therapies exist to treat filovirus infections, which cause up to 90% mortality in human cases. To facilitate development of antivirals against these viruses, we established two distinct screening platforms based on MARV and EBOV reverse genetics systems that express secreted Gaussia luciferase (gLuc). The first platform is a mini-genome replicon to screen viral replication inhibitors using gLuc quantification in a BSL-2 setting. The second platform is complementary to the first and expresses gLuc as a reporter gene product encoded in recombinant infectious MARV and EBOV, thereby allowing for rapid quantification of viral growth during treatment with antiviral compounds. We characterized these viruses by comparing luciferase activity to virus production, and validated luciferase activity as an authentic real-time measure of viral growth. As proof of concept, we adapt both mini-genome and infectious virus platforms to high-throughput formats, and demonstrate efficacy of several antiviral compounds. We anticipate that both approaches will prove highly useful in the development of anti-filovirus therapies, as well as in basic research on the filovirus life cycle.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ไวรัส Marburg (MARV) และไวรัสอีโบลา (EBOV), สมาชิกของครอบครัว Filoviridae แสดงความท้าทายที่สำคัญการสาธารณสุขทั่วโลก บำบัดไม่อนุญาตอยู่การรักษาติดเชื้อ filovirus ซึ่งทำให้การตาย 90% ในกรณีมนุษย์ขึ้น เพื่อให้ง่ายต่อการพัฒนาของ antivirals รัสเหล่านี้ เราสร้างแพลตฟอร์มทั้งสองคัดกรองที่แตกต่างกันตามระบบพันธุศาสตร์ย้อน MARV และ EBOV เป็น secreted Gaussia luciferase (gLuc) เวทีแรกเป็น replicon จีโนมมินิไป inhibitors ไวรัสจำลองหน้าจอที่ใช้ gLuc นับตั้ง BSL 2 แพลตฟอร์มสองเสริมไปก่อน และแสดง gLuc เป็นผลิตภัณฑ์ยีนโปรแกรมรายงานเข้า MARV recombinant ติดเชื้อและ EBOV จึงอนุญาตให้นับอย่างรวดเร็วของไวรัสเจริญเติบโตในระหว่างการรักษาด้วยสารต้านไวรัส เราลักษณะไวรัสเหล่านี้ โดยการเปรียบเทียบกิจกรรม luciferase ผลิตไวรัส และตรวจสอบกิจกรรม luciferase เป็นตัวแท้จริงวัดเจริญเติบโตของไวรัส หลักฐานของแนวคิด เราปรับกลุ่มมินิและแพลตฟอร์มการติดเชื้อไวรัสรูปแบบอัตราความเร็วสูง และแสดงให้เห็นถึงประสิทธิภาพของสารต้านไวรัสหลาย เราคาดว่า ทั้งสองวิธีจะพิสูจน์ประโยชน์อย่างยิ่งในการพัฒนารักษาป้องกัน filovirus เช่นในการวิจัยในวงจรชีวิต filovirus

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ไวรัสบูร์ก (มาร์ฟ) และไวรัสอีโบลา (EBOV) สมาชิกในครอบครัว Filoviridae เป็นตัวแทนของความท้าทายที่สำคัญต่อสุขภาพของประชาชนทั่วโลก ปัจจุบันการรักษาที่ได้รับใบอนุญาตไม่อยู่เพื่อรักษาโรคติดเชื้อ filovirus ที่ทำให้เกิดการเสียชีวิตได้ถึง 90% ในกรณีของมนุษย์ เพื่ออำนวยความสะดวกการพัฒนาของไวรัสจากไวรัสเหล่านี้เราเป็นที่ยอมรับทั้งสองแพลตฟอร์มการตรวจคัดกรองที่แตกต่างกันขึ้นอยู่กับมาร์ฟและ EBOV ย้อนกลับระบบพันธุศาสตร์ที่หลั่งด่วน luciferase Gaussia (gLuc) แพลตฟอร์มแรกคือ Replicon มินิจีโนมเพื่อคัดกรองสารยับยั้งเชื้อไวรัสโดยใช้ปริมาณ gLuc ใน BSL-2 การตั้งค่า แพลตฟอร์มที่สองคือประกอบกับเป็นครั้งแรกและเป็นการแสดงออกถึงความ gLuc เป็นผลิตภัณฑ์ยีนนักข่าวเข้ารหัสในมาร์ฟและติดเชื้อ recombinant EBOV จึงอนุญาตให้ปริมาณอย่างรวดเร็วของการเจริญเติบโตของเชื้อไวรัสในระหว่างการรักษาด้วยสารต้านไวรัส เราโดดเด่นไวรัสเหล่านี้โดยการเปรียบเทียบกิจกรรม luciferase เพื่อการผลิตไวรัสและตรวจสอบกิจกรรม luciferase เป็นมาตรการเรียลไทม์ที่แท้จริงของการเจริญเติบโตของเชื้อไวรัส ในฐานะที่เป็นหลักฐานการแนวคิดเราปรับตัวเข้ากับทั้งมินิจีโนมและแพลตฟอร์มการติดเชื้อไวรัสในรูปแบบสูงผ่านและแสดงให้เห็นถึงประสิทธิภาพของสารต้านไวรัสหลาย เราคาดหวังว่าทั้งสองวิธีจะเป็นประโยชน์อย่างมากในการพัฒนาของการรักษาต่อต้าน filovirus เช่นเดียวกับในการวิจัยพื้นฐานเกี่ยวกับวงจรชีวิตของ filovirus

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ไวรัสมาร์เบิร์ก ( มาร์ ) และไวรัสอีโบล่า ( ebov ) , สมาชิกของฟิโลวิริดีครอบครัว เป็นตัวแทนของความท้าทายที่สำคัญสำหรับสุขภาพของประชาชนทั่วโลก ขณะนี้ไม่มีการอนุญาตมีอยู่เพื่อรักษาเชื้อฟิโลไวรัส ซึ่งทำให้ถึง 90% ของกรณีของมนุษย์ เพื่ออำนวยความสะดวกในการพัฒนายาต้านไวรัสเหล่านี้เราสร้างสองแตกต่างคัดกรองแพลตฟอร์มตามมาร์ ebov ย้อนกลับระบบ Express และพันธุศาสตร์ gaussia หลั่งเอนไซม์ลูซิเฟอเรส ( gluc ) แพลตฟอร์มแรกเป็นมินิโครโมโซม replicon หน้าจอการใช้สารยับยั้งไวรัส gluc ปริมาณในการตั้งค่า bsl-2 .แพลตฟอร์มที่สอง ประกอบกับก่อน และแสดง gluc เป็นยีนในเซลล์ติดเชื้อนักข่าวผลิตภัณฑ์เข้ารหัสและมาร์ ebov จึงให้ปริมาณอย่างรวดเร็วของการเจริญเติบโตของไวรัสในระหว่างการรักษาด้วยยาต้านไวรัสสารประกอบ เราลักษณะไวรัสเหล่านี้ โดยการเปรียบเทียบกิจกรรมเอนไซม์ลูซิเฟอเรสเพื่อการผลิตไวรัสและตรวจสอบกิจกรรมของเอนไซม์ลูซิเฟอเรสเป็นตัวจริงแบบเรียลไทม์วัดการเจริญเติบโตของไวรัส เป็นหลักฐานของแนวคิด เราปรับทั้งมินิและจีโนมไวรัสแพลตฟอร์มที่จะช่วยแสดงให้เห็นถึงประสิทธิภาพของหลาย ๆรูปแบบ และฤทธิ์ต้านสาร เราคาดหวังว่าทั้งสองวิธีจะเป็นประโยชน์อย่างมากในการพัฒนาของการรักษา ป้องกัน ฟิโลไวรัส ,ตลอดจนการวิจัยขั้นพื้นฐานในวงจรชีวิตของฟิโลไวรัส

.