AbstractFructooligosaccharides (FOS

Abstract
Fructooligosaccharides (FOSs) are functional food ingredients with prebiotic properties, and a recent increase in the use of oligosaccharides in the food industry has led to the search for “new” microorganisms and enzymes for the production of oligosaccharides. This paper focuses on the screening of yeasts obtained from fruits and flowers (from Brazilian tropical forests), and capable of secreting extra-cellular enzymes with high fructosyl transferase activity (FTA). The screening and isolation procedures resulted in four potentially interesting yeast strains: Candida sp. (LEB-I3), Rhodotorula sp. (LEB-U5.), Cryptococcus sp. (LEB-V2) and Rhodotorula sp. LEB-V10. All were able to produce more then 100 g l−1 of FOS from a 500 g l−1 sucrose solution, but only the last one, (LEB-V10), showed no hydrolytic activity with respect to the FOS produced, giving a continuous increase in FOS content up to the end of the reaction, when it was about 50% of the total carbohydrates.

Keywords
Fructooligosaccharides; Prebiotics; Fructosyl transferase; Yeasts; Screening
1. Introduction
The concept of functional food represents a food, or food ingredient, with positive effects on host health and/or well being beyond its nutritive value. In more recent years, the concept has become more directed towards food additives that may exert a positive effect on the gut microbiota composition, mainly probiotics and prebiotics. A probiotic is a live microbial feed supplement that exerts beneficial effects for the host, promoting a good microbiological balance in the intestine, and a prebiotic is a non-digestible food component that could stimulate selectively the growth and/or activity of a limited number of colonic bacteria (probiotic bacteria) [1].

Fructooligosaccharides (FOSs) are functional food ingredients, showing prebiotic properties. In the literature FOSs is generally accepted as a common name only for fructose oligomers composed of 1-kestose (GF2), nystose (GF3) and 1F-fructofuranosyl nystose (GF4), as shown in Fig. 1. The reaction mechanism depends on the source of the enzyme, but most of the microbial enzymes may catalyse the reactions of a readily reversible primary step and a subsequent irreversible step (Eq. (1)):

equation(1)

Turn MathJax on

where F is fructose, E is fructosyltransferase and R represents a carbonyl of an aldose. According to this mechanism, one molecule of sucrose serves as a donor and another acts as an acceptor for GF2 synthesis, releasing one molecule of glucose, for the production of GF3, the GF2 acts as an acceptor [2].

Fig. 1.
Chemical structure of fructooligosaccharides. (GF2: n = 2, kestose; GF3: n = 3, nystose; GF4: n = 4, 1F-fructofuranosyl nystose).
Figure options
FOSs can be produced by either invertase (β-fructofuranosidase) or transferases (β-d-fructosyltransferase) [3] and many reports can be found in the literature on the production of FOS by fungi such as Aspergillus niger [4], Aspergillus japonicus [5] and Aureobasidium sp. [6]. However, few reports can be found on its production by extra cellular yeast enzymes, although studies do exist on Kluyveromyces sp. and its inulinase enzyme [7] and on Rhodotorula sp., referring to the production of gluco- and galactooligosaccharides [8]. Vranešić et al. [9], Risso [10] and Treichel [11] have done a great number of studies on inulinase and FOS production by Kluyveromyces sp., but despite all their efforts and the high enzyme production achieved (1300 U ml−1), the maximum yield in FOS was about 12% in aqueous media and 18% in organic solvents.

The search for “new” enzymes for oligosaccharide production, using either microbial screening or molecular engineering, became necessary as a result of the increasing number of applications of oligosaccharides in the cosmetic, agrochemical, pharmaceutical and food industries.

The present study reports on the screening for high transfructosilating enzymes in yeasts strains isolated from fruits and flowers obtained from tropical Brazilian biomass. Tropical environments (forests) are one of the greatest sources of all kinds of living organisms, including yeasts, unicellular fungi with a ubiquitous distribution throughout almost all ecosystems. Brazil shows four regions of great biodiversity: the Amazon Forest; the Atlantic Forest (stretches along the Brazilian coast, showing an extremely diverse and unique mixture of vegetation); the Cerrado (tropical savanna eco-region) and the Pantanal (the world's largest wetland). Since Brazil is also a sucrose producing country (sugar-cane), and considering the increasing demand for FOS as a functional food, it would be interesting to find alternative processes for the production of fructooligosaccharides.

2. Experimental
2.1. Sample collection and yeast isolation

Fresh fruits and flowers were collected from the Amazon and Atlantic Forests and the Cerrado and Pantanal areas of Brazil. The samples collected were inoculated into 125 ml Erlenmeyer flasks con

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

บทคัดย่อFructooligosaccharides (ฟอสส์) มีส่วนผสมอาหาร prebiotic คุณสมบัติ และการเพิ่มขึ้นล่าสุดในการใช้ oligosaccharides ในอุตสาหกรรมอาหารได้นำไปสู่การค้นหา "ใหม่" จุลินทรีย์และเอนไซม์ในการผลิต oligosaccharides กระดาษนี้เน้นการคัดกรองของยีสต์ได้รับจากผลไม้และดอกไม้ (จากป่าเขตร้อนที่บราซิล), และสามารถซ่อนเอนไซม์เซลลูลาร์เป็นพิเศษกับกิจกรรมสูง fructosyl transferase (FTA) ขั้นตอนการคัดกรองและแยกผลในสี่อาจน่าสนใจสายพันธุ์ยีสต์: Candida sp. (LEB-I3), Rhodotorula sp. (LEB-U5.), Rhodotorula sp. LEB V10 และ Cryptococcus sp. (LEB V2) สามารถผลิต l−1 100 กรัมแล้วเพิ่มเติมของ FOS จากโซลูชันซูโครส l−1 500 กรัม แต่เพียงครั้งสุดท้ายหนึ่ง, (LEB-V10), พบกิจกรรมความคงทนไม่เกี่ยวกับ FOS ผลิต ให้การเพิ่มขึ้นอย่างต่อเนื่องใน FOS เนื้อหาของปฏิกิริยา เมื่อมันเป็นประมาณ 50% ของคาร์โบไฮเดรตรวมได้คำสำคัญFructooligosaccharides Prebiotics Fructosyl transferase รายีสต์ การคัดกรอง1. บทนำแนวคิดของอาหารเสริมแทนอาหารการ หรือส่วนผสมอาหาร มีผลในเชิงบวกในโฮสต์สุขภาพหรืออยู่นอกเหนือจากคุณค่าของ ในปีล่าสุด แนวคิดได้กลายเป็นมากขึ้นโดยตรงต่อวัตถุเจือปนอาหารที่อาจออกแรงผลบวกในลำไส้จุลินทรีย์องค์ประกอบ ส่วนใหญ่เป็นโปรไบโอติกและ prebiotics โปรไบโอติกเป็นสดจุลินทรีย์อาหารอาหารเสริมที่ออกแรงผลประโยชน์สำหรับโฮสต์ ส่งเสริมสมดุลจุลินทรีย์ในลำไส้ และ prebiotic คือ ส่วนประกอบของอาหารไม่ย่อยที่สามารถกระตุ้นการเลือกที่จะเติบโตและกิจกรรมของแบคทีเรีย colonic (แบคทีเรีย) จำนวนจำกัด [1]Fructooligosaccharides (ฟอสส์) เป็นส่วนผสมอาหาร แสดงคุณสมบัติ prebiotic ในวรรณคดี ฟอสส์เป็นที่รับรองทั่วไปเป็นชื่อทั่วไปสำหรับ oligomers ฟรักโทสเท่านั้นประกอบด้วย 1-kestose (GF2), nystose (GF3) และ nystose 1F fructofuranosyl (GF4), ดังที่แสดงในรูปที่ 1 กลไกปฏิกิริยาตามแหล่งที่มาของเอนไซม์นี้ แต่ส่วนใหญ่เอนไซม์จุลินทรีย์อาจกระตุ้นปฏิกิริยาย้อนกลับพร้อมขั้นตอนหลักและขั้นตอนไม่ถัด (Eq. (1)):equation(1)เปิด MathJaxF เป็นฟรักโทส E เป็น fructosyltransferase และ R แทน carbonyl ของ aldose การ ตามกลไกนี้ หนึ่งโมเลกุลของน้ำตาลซูโครสที่ทำหน้าที่เป็นผู้บริจาคอื่นทำหน้าที่เป็นตัวให้เป็นผู้รับสำหรับการสังเคราะห์ GF2 ปล่อยหนึ่งโมเลกุลของกลูโคส สำหรับการผลิตของ GF3, GF2 ยังทำหน้าที่เป็นตัวให้เป็นผู้รับ [2]รูปที่ 1 โครงสร้างทางเคมีของ fructooligosaccharides (GF2: n = 2, kestose GF3: n = 3, nystose GF4: n = 4, 1F fructofuranosyl nystose)ตัวเลือกรูปสามารถผลิตฟอสส์ invertase (β-fructofuranosidase) หรือ transferases (β-d-fructosyltransferase) [3] และรายงานจำนวนมากสามารถพบได้ในวรรณคดีของ FOS การผลิตจากเชื้อราเช่น Aspergillus ไนเจอร์ [4], Aspergillus หลัก [5] และ Aureobasidium sp. [6] อย่างไรก็ตาม รายงานบางส่วนได้จากการผลิต โดยเอนไซม์เซลลูลาร์เสริมยีสต์ แม้ว่าการศึกษาทำอยู่ บน Kluyveromyces sp.และของเอนไซม์ inulinase [7] และ Rhodotorula sp. อ้างอิงถึงการผลิตหนึ - galactooligosaccharides [8] Vranešić et al. [9], Risso [10] และ Treichel [11] ได้ทำการศึกษา inulinase และ FOS ผลิตจำนวนมาก โดย sp. Kluyveromyces แต่แม้ มีความพยายามและเอนไซม์สูงผลิตที่ประสบความสำเร็จ (1300 U ml−1) อัตราผลตอบแทนสูงสุดใน FOS ถูกละลายประมาณ 12% และ 18% ในตัวทำละลายอินทรีย์การค้นหาใหม่"เอนไซม์สำหรับการผลิต oligosaccharide ใช้คัดกรองจุลินทรีย์หรือวิศวกรรมโมเลกุล ก็จำเป็นเป็นผลมาจากการใช้งานของ oligosaccharides ในเครื่องสำอาง เคมีเกษตร อุตสาหกรรมยาและอาหารเพิ่มขึ้นรายงานการศึกษาปัจจุบันการคัดกรองสำหรับ transfructosilating สูงเอนไซม์ในยีสต์สายพันธุ์ที่แยกต่างหากจากผลไม้และดอกไม้ที่ได้จากชีวมวลเขตร้อนที่บราซิล ท่ามกลางสิ่งแวดล้อม (ป่า) เป็นหนึ่งในแหล่งต่าง ๆ ทุกชนิดของสิ่งมีชีวิต รวมทั้งยีสต์ เชื้อรา unicellular ด้วยการกระจายแพร่หลายตลอดเกือบทุกระบบนิเวศ ประเทศบราซิลแสดงสี่ภูมิภาคของความหลากหลายทางชีวภาพที่ดี: ป่าอเมซอน ป่าแอตแลนติก (ทอดยาวตามชายฝั่งบราซิล แสดงผสมมากหลากหลาย และเอกลักษณ์ของพืช); Cerrado (ซาวันร้อน eco ภูมิภาค) และ Pantanal (พื้นที่ชุ่มน้ำที่ใหญ่ที่สุดในโลก) เนื่องจากบราซิลเป็นประเทศผลิตซูโครส (อ้อย), และพิจารณาความต้องการที่เพิ่มขึ้นสำหรับ FOS เป็นอาหารทำงาน มันจะน่าสนใจเพื่อหาทางเลือกกระบวนการผลิตของ fructooligosaccharides2. ทดลอง2.1. ตัวอย่างแยกที่เก็บรวบรวมและยีสต์ผลไม้และดอกไม้ถูกเก็บรวบรวมจาก Amazon และ ป่าแอตแลนติก และ Cerrado และ Pantanal พื้นที่ของบราซิล ตัวอย่างที่เก็บรวบรวมได้ inoculated เป็นคอนขวด Erlenmeyer 125 มล.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

บทคัดย่อ
คาร์บอเนต (ฟอสส์) เป็นส่วนผสมอาหารทำงานที่มีคุณสมบัติ prebiotic และเพิ่มขึ้นล่าสุดในการใช้งานของ oligosaccharides ในอุตสาหกรรมอาหารได้นำไปสู่การค้นหาจุลินทรีย์ "ใหม่" และเอนไซม์สำหรับการผลิตของ oligosaccharides กระดาษนี้จะมุ่งเน้นไปที่การตรวจคัดกรองยีสต์ที่ได้รับจากผลไม้และดอกไม้ (จากป่าเขตร้อนของประเทศบราซิล) และความสามารถในการหลั่งเอนไซม์พิเศษโทรศัพท์มือถือที่มีกิจกรรม fructosyl สูง transferase (FTA) ขั้นตอนการตรวจคัดกรองและการแยกผลในสี่สายพันธุ์ยีสต์ที่น่าสนใจที่อาจเกิดขึ้น: Candida SP (LEB-I3) Rhodotorula SP (LEB-U5.) Cryptococcus SP (LEB-V2) และ Rhodotorula SP LEB-V10 ทั้งหมดมีความสามารถในการผลิตมากขึ้นแล้ว 100 GL-1 ของ FOS จากสารละลายน้ำตาลซูโครส 500 GL-1 แต่คนสุดท้าย (LEB-V10) พบว่าไม่มีกิจกรรมย่อยสลายด้วยความเคารพต่อ FOS ผลิตให้เพิ่มขึ้นอย่างต่อเนื่อง เนื้อหา FOS ขึ้นไปที่ปลายของการเกิดปฏิกิริยาเมื่อมันเป็นประมาณ 50% ของคาร์โบไฮเดรตทั้งหมด.

คำ
Fructooligosaccharides; prebiotics; transferase Fructosyl; ยีสต์; การตรวจคัดกรอง
1 บทนำ
แนวคิดของอาหารทำงานหมายถึงอาหารหรือส่วนประกอบของอาหารที่มีผลกระทบเชิงบวกต่อสุขภาพโฮสต์และ / หรือเป็นอยู่ที่ดีเกินกว่าค่าทางโภชนาการ ในปีที่ผ่านมามากขึ้นแนวคิดได้กลายเป็นผู้กำกับมากขึ้นต่อวัตถุเจือปนอาหารที่อาจออกแรงผลบวกต่อองค์ประกอบลำไส้ microbiota ส่วนใหญ่เป็นโปรไบโอติกและ prebiotics โปรไบโอติกเป็นอาหารเสริมอาหารสดจุลินทรีย์ที่ออกแรงผลประโยชน์สำหรับโฮสต์การส่งเสริมความสมดุลของจุลินทรีย์ที่ดีในลำไส้และ prebiotic เป็นส่วนประกอบอาหารที่ไม่ย่อยที่อาจกระตุ้นให้เกิดการคัดเลือกการเจริญเติบโตและ / หรือกิจกรรมของมีจำนวน จำกัด แบคทีเรียในลำไส้ใหญ่ (แบคทีเรีย) [1].

คาร์บอเนต (ฟอสส์) เป็นส่วนผสมอาหารทำงานได้แสดงให้เห็นถึงคุณสมบัติ prebiotic ในวรรณคดีฟอสส์เป็นที่ยอมรับกันโดยทั่วไปว่าเป็นชื่อสามัญเฉพาะสำหรับ oligomers ฟรุกโตสประกอบด้วย 1 kestose (GF2) nystose (GF3) และ 1F-fructofuranosyl nystose (GF4) ดังแสดงในรูป 1. กลไกการเกิดปฏิกิริยาขึ้นอยู่กับแหล่งที่มาของเอนไซม์ แต่ส่วนมากของเอนไซม์จุลินทรีย์อาจกระตุ้นปฏิกิริยาของขั้นตอนหลักพลิกกลับได้อย่างง่ายดายและเป็นขั้นตอนที่กลับไม่ได้ตามมา (สมการ (1).)

สมการ (1)

เปิด MathJax บน

ที่ F เป็นฟรุกโตส, อีเทสและอาร์แสดงให้เห็นถึงคาร์บอนิลของ aldose ตามที่กลไกนี้หนึ่งโมเลกุลของน้ำตาลซูโครสทำหน้าที่เป็นผู้บริจาคและการกระทำอื่นเป็นใบเสร็จสำหรับการสังเคราะห์ GF2 การปล่อยหนึ่งโมเลกุลของน้ำตาลกลูโคสในการผลิต GF3 ที่ GF2 ทำหน้าที่เป็นตัวรับ [2].

รูป 1.
โครงสร้างทางเคมีของ Fructooligosaccharides (GF2: n = 2 kestose; GF3: n = 3 nystose; GF4: n = 4, 1F-fructofuranosyl nystose).
ตัวเลือกรูปที่
ฟอสส์สามารถผลิตได้โดยทั้งอินเวอร์ (β-fructofuranosidase) หรือราน (β-D- เทส) [3] และรายงานจำนวนมากสามารถพบได้ในหนังสือที่เกี่ยวกับการผลิตของ FOS โดยเชื้อราเช่นเชื้อรา Aspergillus ไนเจอร์ [4], Aspergillus japonicus [5] และ Aureobasidium SP [6] อย่างไรก็ตามรายงานไม่กี่สามารถพบได้ในการผลิตโดยเอนไซม์ยีสต์มือถือพิเศษถึงแม้ว่าการศึกษาจะอยู่บน Kluyveromyces SP และเอนไซม์ inulinase มัน [7] และ Rhodotorula sp. หมายถึงการผลิตและ gluco- galactooligosaccharides ม [8] Vranešić et al, [9], Risso [10] และ Treichel [11] ได้ทำจำนวนมากของการศึกษาเกี่ยวกับ inulinase และการผลิต FOS โดย Kluyveromyces sp. แต่แม้จะมีความพยายามทั้งหมดของพวกเขาและการผลิตเอนไซม์สูงที่ประสบความสำเร็จ (1300 U ML-1) ที่ อัตราผลตอบแทนสูงสุดใน FOS เป็นประมาณ 12% ในตัวกลางที่เป็นของเหลวและ 18% ในตัวทำละลายอินทรีย์.

การค้นหาสำหรับ "ใหม่" เอนไซม์สำหรับการผลิต Oligosaccharide โดยใช้การตรวจคัดกรองจุลินทรีย์หรือวิศวกรรมโมเลกุลกลายเป็นสิ่งจำเป็นเป็นผลมาจากจำนวนที่เพิ่มขึ้นของการใช้งานของ oligosaccharides ในเครื่องสำอาง, เคมีเกษตร, อุตสาหกรรมยาและอาหาร.

รายงานการศึกษาในปัจจุบันการตรวจคัดกรองสำหรับเอนไซม์ transfructosilating สูงในยีสต์ด้วยจากที่แยกได้จากผลไม้และดอกไม้ที่ได้รับจากชีวมวลบราซิลเขตร้อน สภาพแวดล้อมที่ร้อน (ป่า) เป็นหนึ่งในแหล่งที่ยิ่งใหญ่ที่สุดของทุกชนิดของสิ่งมีชีวิตรวมทั้งยีสต์เชื้อราจุลินทรีย์มีการกระจายแพร่หลายไปทั่วเกือบทุกระบบนิเวศ บราซิลแสดงให้เห็นถึงสี่ภูมิภาคของความหลากหลายทางชีวภาพที่ดี: อเมซอนป่า; ป่าแอตแลนติก (ทอดยาวไปตามชายฝั่งบราซิลแสดงส่วนผสมมากที่มีความหลากหลายและเป็นเอกลักษณ์ของพืช); Cerrado (เขตร้อนวันนาเชิงนิเวศภูมิภาค) และ Pantanal (พื้นที่ชุ่มน้ำที่ใหญ่ที่สุดในโลก) ตั้งแต่บราซิลนอกจากนี้ยังมีการผลิตน้ำตาลซูโครสประเทศ (อ้อย) และเมื่อพิจารณาจากความต้องการที่เพิ่มขึ้นสำหรับ FOS เป็นอาหารทำงานก็จะเป็นที่น่าสนใจที่จะหาทางเลือกสำหรับกระบวนการผลิต Fructooligosaccharides ได้.

2 การทดลอง
2.1 การเก็บตัวอย่างและยีสต์แยก

ผลไม้สดและดอกไม้ที่ถูกเก็บรวบรวมจาก Amazon และแอตแลนติกป่าและ Cerrado และพื้นที่ Pantanal บราซิล ตัวอย่างที่เก็บรวบรวมถูกเชื้อเข้า 125 มล. ขวด Erlenmeyer Con

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

บทคัดย่อfructooligosaccharides ( ฟอส ) ส่วนผสมอาหารฟังก์ชันที่มีคุณสมบัติพรีไบโอติก และเพิ่มขึ้นล่าสุดในการใช้เทคโนโลยีในอุตสาหกรรมอาหารได้ นำไปสู่การค้นหา " จุลินทรีย์ใหม่ " และเอนไซม์สำหรับการผลิตของเทคโนโลยี . กระดาษนี้จะเน้นที่การคัดกรองของยีสต์ที่ได้จากผลไม้และดอกไม้ ( จากป่าเขตร้อนบราซิล ) , และความสามารถในการหลั่งเอนไซม์เสริมโทรศัพท์มือถือกับกิจกรรมของฟรุกโตซิลสูง ( FTA ) ขั้นตอนการคัดแยกและผลใน 4 สายพันธุ์ยีสต์อาจน่าสนใจ : Candida sp . ( leb-i3 ) Rhodotorula sp . ( leb-u5 ) ล. sp . ( leb-v2 Rhodotorula sp . ) และ leb-v10 . ทั้งหมดสามารถผลิตมากกว่า 100 g L − 1 ของ FOS จาก 500 g L − 1 สารละลายซูโครส แต่สุดท้าย ( leb-v10 ) พบว่าไม่มีคุณภาพ กิจกรรมเกี่ยวกับ FOS ที่ผลิตให้ต่อเนื่องเพิ่มความแข็งแรง เนื้อหาถึงจุดสิ้นสุดของปฏิกิริยา เมื่อมันเกี่ยวกับ 50% ของคาร์โบไฮเดรตทั้งหมดคำสำคัญfructooligosaccharides ; พรีไบโอติกฟรุกโตซิลทรานสเฟอเรส ; ยีสต์ ; การคัดเลือก ;1 . แนะนำแนวคิดของอาหารสุขภาพเป็นอาหารหรือส่วนประกอบอาหารที่มีผลกระทบในเชิงบวกต่อสุขภาพของโฮสต์และ / หรือเป็นอย่างดีนอกเหนือจากคุณค่าทางโภชนาการของมัน ใน ปี ล่าสุด แนวคิดได้กลายเป็นเพิ่มเติมโดยตรงไปยังวัตถุเจือปนอาหารที่อาจจะออกแรงผลบวกในลำไส้ไมโครไบโ ้าองค์ประกอบ ส่วนใหญ่เป็นโปรไบโอติก และพรีไบโอติกส์ . เป็นจุลินทรีย์โปรไบโอติก คือ สด อาหารเสริมที่สร้างผลประโยชน์ให้เจ้าภาพ ส่งเสริมทางด้านจุลชีววิทยาเป็นอย่างดีสมดุลในลำไส้ และเป็นพรีไบโอติก เป็นอาหารไม่ย่อยองค์ประกอบที่สามารถกระตุ้นการเจริญเติบโต และ / หรือ เลือกกิจกรรมของจำนวนจำกัด ( colonic แบคทีเรียโพรไบโอติกแบคทีเรีย ) [ 1 ]fructooligosaccharides ( ฟอส ) ส่วนผสมอาหารฟังก์ชัน แสดงคุณสมบัติพรีไบโอติก . ในวรรณคดี ฟอส เป็นที่ยอมรับกันโดยทั่วไปว่าเป็นชื่อทั่วไปสำหรับฟรักโทสหน่วยประกอบด้วย 1-kestose ( gf2 ) nystose ( gf3 ) และชั้น 1 fructofuranosyl nystose ( gf4 ) ดังแสดงในรูปที่ 1 กลไกปฏิกิริยาขึ้นอยู่กับแหล่งที่มาของเอนไซม์ แต่ส่วนใหญ่ของเอนไซม์ของจุลินทรีย์อาจกระตุ้นปฏิกิริยาผันกลับได้ของพร้อมการก้าวและต่อมาได้ก้าว ( อีคิว ( 1 : ) )สมการ ( 1 )เปิด mathjax บนที่ F เป็นฟรักโทส , E fructosyltransferase และ R เป็นคาร์บอนิลของอัลโดส . ตามกลไกนี้ หนึ่งโมเลกุลของน้ำตาลซูโครสเป็นผู้บริจาคและอีกหน้าที่เป็นพระนาสิกสำหรับการสังเคราะห์ gf2 ปล่อยหนึ่งโมเลกุลของกลูโคส เพื่อผลิต gf3 , gf2 ทำหน้าที่เป็นพระนาสิก [ 2 ]รูปที่ 1โครงสร้างทางเคมีของ fructooligosaccharides . ( gf2 : n = 2 , เคสโทส ; gf3 : N = 3 , nystose ; gf4 : n = 4 , 1f fructofuranosyl nystose )เลือกรูปฟอสสามารถผลิตได้ โดยเปรียบเทียบ ( บีตา - fructofuranosidase ) หรือทราน เฟอร์เรส ( บีตา - d-fructosyltransferase ) [ 3 ] และรายงานหลายสามารถพบได้ในวรรณคดีในการผลิต FOS โดยเชื้อราเช่นเชื้อรา Aspergillus niger [ 4 ] , [ 5 ] และ aureobasidium japonicus Aspergillus sp . [ 6 ] อย่างไรก็ตาม รายงานไม่กี่สามารถพบได้ในการผลิตของเอนไซม์ของเซลล์ยีสต์เป็นพิเศษ แม้ว่าการศึกษาจะอยู่ใน kluyveromyces sp . และเอนไซม์ [ 7 ] และ inulinase Rhodotorula sp . , หมายถึงการผลิตกลูโค - galactooligosaccharides [ 8 ] vrane ซิค et al . [ 9 ] , risso [ 10 ] และ treichel [ 11 ] ได้หมายเลขที่ดีของการศึกษาใน inulinase ผสมการผลิต โดย kluyveromyces sp . , แต่แม้จะมีความพยายามของพวกเขาทั้งหมดและการผลิตเอนไซม์สูงได้ ( − 1 , + 1 , 300 u ) ให้ผลในความแข็งแรง คือประมาณ 12% และ 18% ในสารละลายในสื่อ ตัวทำละลายอินทรีย์ค้นหา " เอนไซม์ใหม่ " เพื่อผลิตโอลิโกแซคคาไรด์ โดยใช้ทั้งการคัดกรองจุลินทรีย์หรือโมเลกุล วิศวกรรม เป็น จำเป็น เป็นผลจากการเพิ่มจำนวนของการประยุกต์ใช้เทคโนโลยีใน agrochemical เครื่องสำอาง อุตสาหกรรมยาและอาหารปัจจุบันการศึกษารายงานเกี่ยวกับการคัดกรองสูง transfructosilating เอ็นไซม์ยีสต์สายพันธุ์ที่แยกได้จากผลไม้และดอกไม้ที่ได้รับจากบราซิลร้อนชีวมวล สภาพแวดล้อมในเขตร้อนชื้น ( ป่า ) เป็นหนึ่งในแหล่งที่มาที่ยิ่งใหญ่ที่สุดของทุกชนิดของสิ่งมีชีวิต ได้แก่ ยีสต์ เชื้อราเซลล์เดียวที่มีแพร่หลายกระจายทั่วระบบนิเวศเกือบทั้งหมด บราซิลแสดงสี่ภูมิภาคของความหลากหลายทางชีวภาพ : Amazon ป่า ; ป่าแอตแลนติก ( ทอดยาวไปตามชายฝั่งของบราซิล แสดงมากหลากหลายและผสมผสานพืช ) ; เซอร์ราโด ( เขตนิเวศป่าเขตร้อน ) และแพนทานัล ( พื้นที่ชุ่มน้ำที่ใหญ่ที่สุดของโลก ) เนื่องจากบราซิลเป็นประเทศที่ผลิตซูโครส ( อ้อย ) และเมื่อพิจารณาจากความต้องการเพิ่มขึ้นสำหรับ FOS เป็นอาหารสุขภาพ มันจะน่าสนใจที่จะหากระบวนการทางเลือกสำหรับการผลิต fructooligosaccharides .2 . ทดลอง2.1 . การเก็บตัวอย่างและการแยกยีสต์ผลไม้สดและดอกไม้ เก็บข้อมูลจาก Amazon และป่าแอตแลนติกและเซอราโด้และพื้นที่ Pantanal ของบราซิล ตัวอย่างแบบสอบถามเชื้อ ERL 125 มล.