Limiting dilution PCR was an improv

Limiting dilution PCR was an improvement over previous techniques,
such as competitive PCR, for quantification of PCR targets.
It was precise, had a wide dynamic range, and could detect and
quantify rare target molecules. However it had two disadvantages.
Firstly, it was an open system and had the potential for contamination
of the environment by amplified PCR product. Secondly, it was
a manual system and quite laborious. Our protocol was to perform
an initial series of PCRs involving three replicates at tenfold dilutions
of the sample in order to approximately determine the limit
of dilution and then to perform a definitive series of PCRs involving
5–10 replicates at each of a series of threefold dilutions around
the limit of dilution. The endpoint of all-or-none amplification was
assessed by electrophoresis

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

จำกัด PCR
ถูกลดสัดส่วนการปรับปรุงเทคนิคในช่วงก่อนหน้านี้เช่นPCR ในการแข่งขันสำหรับปริมาณของเป้าหมาย PCR. มันเป็นที่แม่นยำมีช่วงความกว้างและสามารถตรวจสอบและปริมาณโมเลกุลเป้าหมายที่หายาก แต่มันก็มีข้อเสียที่สอง. ประการแรกมันเป็นระบบที่เปิดกว้างและมีศักยภาพในการปนเปื้อนของสิ่งแวดล้อมโดยการขยายผลิตภัณฑ์ PCR ประการที่สองก็คือระบบด้วยตนเองและลำบากมากทีเดียว โปรโตคอลของเราคือการดำเนินการชุดแรกของ PCRs ที่เกี่ยวข้องกับสามซ้ำที่เจือจางสิบเท่าของกลุ่มตัวอย่างในการสั่งซื้อประมาณกำหนดขีดจำกัดของการลดสัดส่วนและจากนั้นจะดำเนินการชุดที่ชัดเจนของ PCRs ที่เกี่ยวข้องกับ5-10 ซ้ำในแต่ละชุดของเจือจางไตรสิกขา รอบขีดจำกัด ของการเจือจาง ปลายทางของการขยายทั้งหมดหรือไม่มีการประเมินโดยอิ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

จำกัดเทคนิคเจือจางคือการปรับปรุงมากกว่าเทคนิคเดิม
เช่น PCR แข่งขัน สำหรับปริมาณของดีเอ็นเอเป้าหมาย .
มันชัดเจน มี Dynamic Range กว้าง และสามารถตรวจหาปริมาณโมเลกุลเป้าหมาย
ของหายาก แต่มันมีข้อเสียสอง .
ประการแรกมันเป็นระบบเปิดและมีศักยภาพสำหรับการปนเปื้อนในสิ่งแวดล้อม โดยผลิตภัณฑ์ PCR
ขยาย . ประการที่สองมันเป็น
ระบบคู่มือและค่อนข้างลําบาก โปรโตคอลของเราแสดง
เป็นชุดเริ่มต้นของวิธีการที่เกี่ยวข้องกับ pcrs 3 ซ้ำ 10 เท่า
ของตัวอย่างในการประมาณหาลิมิต
เจือจางและจากนั้นดำเนินการชุดที่ชัดเจนของ pcrs เกี่ยวข้องกับ
5 – 10 นาทีในแต่ละชุดประกอบด้วย 3 ส่วนเจือจางรอบ
ขอบเขตเจือจางข้อมูลทั้งหมดหรือไม่ ( ถูก
ประเมินโดยวิธีอิเล็กโทรโฟรีซีส