DNA fragments were purified from aga

DNA fragments were purified from agarose gels using the AccuPrep Gel purification kit (Bioneer), and ligated into plasmid DNA digested with compatible restriction sites, or by using the In-Fusion HD Cloning Kit (Clontech) according to the manufacturer's recommendations. The plasmid was transformed into competent DH5α Escherichia coli (E. coli) (Invitrogen, Life Technologies) which were than cultivated on solid LB agar media containing 100 μg × mL−1 ampicillin. Linear transformation cassettes were extracted from plasmids by digestion with restriction enzymes cutting on both sides of the desired insert and purification from gel (Fig. 1)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ดีเอ็นเอเป็นเอ็ดสาย Puri จากเจล agarose ใช้เจล AccuPrep Puri ไฟชุดไอออนบวก (Bioneer) และ ligated เป็น DNA พลาสมิดย่อยกับเว็บไซต์ข้อ จำกัด ที่เข้ากันได้หรือโดยการใช้ในฟิวชั่น HD โคลน Kit (Clontech) ตามคำแนะนำของผู้ผลิต พลาสมิดก็กลายเป็นอำนาจDH5αอีโค (เชื้อ E. coli) (Invitrogen, เทคโนโลยีชีวิต) ซึ่งกว่าที่ปลูกในสื่อที่เป็นของแข็งที่มีอาหารเลี้ยงเชื้อ LB 100 ไมโครกรัมต่อมิลลิลิตร×-1 ampicillin เทปการแปลงเชิงเส้นสกัดจากพลาสมิดโดยตัดด้วยเอนไซม์ตัดทั้งสองด้านของแทรกที่ต้องการและไอออนบวกสาย Puri จากเจล (รูปที่ 1).

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ชิ้นส่วนดีเอ็นเอจึงเป็นปุริม
จากโรสเจลใช้ accuprep เจลปุริจึงบวกชุด ( bioneer ) , และผูกเป็นพลาสมิดดีเอ็นเอย่อยกับเว็บไซต์ข้อ จำกัด ที่เข้ากันได้ หรือใช้ในการฟิวชั่น HD ชุด ( clontech ) ตามคำแนะนำของผู้ผลิต ส่วนพลาสมิดกลายเป็นความสามารถαเชื้อ Escherichia coli ( E . coli DH5 ( Invitrogen ) ,เทคโนโลยีกับชีวิต ) ซึ่งมีมากกว่าบนอาหารแข็งอาหารวุ้นปอนด์ ( 100 μกรัม× ml − 1 ยาเพนนิซิลลิน เทปการแปลงเชิงเส้นถูกสกัดจากพลาสมิดโดยการย่อยด้วยเอนไซม์ตัดทั้งสองด้านของที่ต้องการแทรกประจุจึงพูจากเจล ( รูปที่ 1 )