Canine and feline heartworm disease

Canine and feline heartworm diseases
(Dirofilariasis) are caused by filarial nematode,
Dirofilaria immitis which are transmitted by mosquitoes
(Aedes spp., Anopheles spp., Culex spp., and
Armigeres spp.). Heartworm infections in dogs and
cats have been reported worldwide. (1,2) In most cases,
signs of the disease will appear within 1 - 2 years
after infection. Typical signs include coughing,
labored breathing, weakness, exercise intolerance,
symptoms which cause severe cardiopulmonary
problems and even death.(3) Dirofilariasis is also a
zoonotic filariasis that causes human pulmonary
dirofilariasis. Accidental infections with D. immitis in
humans have been reported. (4,5) Human pulmonary
dirofilariasis develops when the immature parasites
die in the right ventricle, embolized, disseminated
to the lungs, and then located in small branches of
the pulmonary arteries. Chest radiography exhibits
noncalcified or calcified nodules of 1 - 3 cm in
diameter, called coin lesions. (6,7) The lesions are often
inaccurately diagnosed as primary or metastatic
lung cancer. Partial lung resection followed by
histopathological examination is therefore necessary
for definitive diagnosis. (8)
In feline dirofilariasis, however, the diagnosis
of this disease is more difficult than the canine
heartworm. Most feline heartworm infections are light
and consist of less than six adult worms, where usually
only one or two worms are present, and approximately
one-third of these cases include worms of the same
sex. Microfilaremia is seldomly observed in infected
cats. The chances of finding microfilariae are
ameliorated by using modified Knott’s or Millipore filter
concentration techniques. (2) However, these methods
are difficult, loborious, time consuming, and have low sensitivity.
For the detection of the human filarial
nematode (Wuchereria bancrofti and Brugia malayi)
DNA in the patient blood and mosquito samples, the
specific quantitative real-time PCR (qPCR) methods
have been developed. (9-15) qPCR can be as sensitive
as one microfilaria of W. bancrofti and B. malayi by
using multiple copies of the filarial genes such as
SspI (13) and HhaI (12) were selected for amplification
of the targeted gene.
In this study, we compare three different
DNA extraction methods for their efficiency to extract
D. immitis microfilarial DNA. The efficiency of the
extraction was evaluated by using a D. immitis-specific
qPCR assay which targets the nematode single copy
gene for glutathione-S-transferase (gst). (16) We believe
that this extraction method will be helpful to amplify
other genes with high sensitivity and specificity.
Materials and Methods
Animals
D. immitis microfilariae were kindly provided
by Dr. Sonthaya Tiawsirisup (Parasitology Unit,
Department of Pathology, Faculty of Veterinary
Science, Chulalongkorn University, Thailand).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Canine and feline heartworm diseases(Dirofilariasis) are caused by filarial nematode,Dirofilaria immitis which are transmitted by mosquitoes(Aedes spp., Anopheles spp., Culex spp., andArmigeres spp.). Heartworm infections in dogs andcats have been reported worldwide. (1,2) In most cases,signs of the disease will appear within 1 - 2 yearsafter infection. Typical signs include coughing,labored breathing, weakness, exercise intolerance,symptoms which cause severe cardiopulmonaryproblems and even death.(3) Dirofilariasis is also azoonotic filariasis that causes human pulmonarydirofilariasis. Accidental infections with D. immitis inhumans have been reported. (4,5) Human pulmonarydirofilariasis develops when the immature parasitesdie in the right ventricle, embolized, disseminatedto the lungs, and then located in small branches ofthe pulmonary arteries. Chest radiography exhibitsnoncalcified or calcified nodules of 1 - 3 cm indiameter, called coin lesions. (6,7) The lesions are ofteninaccurately diagnosed as primary or metastaticlung cancer. Partial lung resection followed byhistopathological examination is therefore necessaryfor definitive diagnosis. (8)In feline dirofilariasis, however, the diagnosisof this disease is more difficult than the canineheartworm. Most feline heartworm infections are lightand consist of less than six adult worms, where usuallyonly one or two worms are present, and approximatelyหนึ่งในสามกรณีดังกล่าวรวมถึงหนอนของเดียวกันเพศ Microfilaremia seldomly แล้วหรือไม่ในการติดเชื้อแมว มีโอกาสค้นหา microfilariaeameliorated โดยปรับเปลี่ยนอนาหรือกรองมากเทคนิคความเข้มข้น (2) อย่างไรก็ตาม วิธีการเหล่านี้จะยาก loborious เวลาที่ใช้ และมีความไวต่ำตรวจบุคคล filarialนีมาโทดา (ปัญหาสาธารณและสุข)ดีเอ็นเอในเลือดผู้ป่วยและตัวอย่างยุง การเฉพาะเชิงปริมาณแบบ real-time PCR (qPCR) วิธีได้รับการพัฒนา qPCR (9-15) สามารถเป็นสำคัญเป็น microfilaria หนึ่งของปริมาณสาธารณและ malayi เกิดโดยใช้ยีน filarial หลายสำเนาเช่นSspI (13) และ HhaI (12) ถูกเลือกสำหรับการขยายของยีนเป้าหมายในการศึกษานี้ เราเปรียบเทียบสามแตกต่างกันวิธีการสกัดดีเอ็นเอสำหรับประสิทธิภาพของการแยกD. immitis ดีเอ็นเอ microfilarial ประสิทธิภาพของการแยกถูกประเมินโดย D. immitis เฉพาะวิเคราะห์ qPCR ซึ่งเป้าหมายสำเนาเดียวนีมาโทดายีนสำหรับกลูตาไธโอน-S-transferase (gst) (16) เราเชื่อว่าที่สกัดด้วยวิธีนี้จะช่วยขยายยีนอื่น ๆ ที่มีความไวสูงและ specificityวัสดุและวิธีการสัตว์D. immitis microfilariae ได้กรุณาโดยดร. Sonthaya Tiawsirisup (หน่วยปรสิตวิทยาภาควิชาพยาธิวิทยา คณะสัตววิทยาศาสตร์ จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย ประเทศไทย)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

สุนัขและแมวโรค heartworm
(Dirofilariasis) ที่เกิดจากไส้เดือนฝอย filarial,
พยาธิ Dirofilaria immitis ซึ่งจะถูกส่งโดยยุง
(Aedes spp. ยุงก้นปล่อง spp. เอสพีพียุง.
และเอสพีพีArmigeres.)
การติดเชื้อพยาธิหัวใจในสุนัขและแมวได้รับรายงานทั่วโลก (1,2)
ในกรณีส่วนใหญ่อาการของโรคจะปรากฏขึ้นภายใน1-2
ปีหลังจากการติดเชื้อ อาการทั่วไป ได้แก่
ไอหายใจลำบาก, อ่อนแอ, การออกกำลังกายการแพ้,
อาการที่ทำให้เกิดหัวใจรุนแรงปัญหาและแม้กระทั่งความตาย (3). Dirofilariasis ยังเป็นโรคเท้าช้างzoonotic ที่ทำให้เกิดปอดของมนุษย์dirofilariasis การติดเชื้ออุบัติเหตุด้วยดี immitis ในมนุษย์ได้รับรายงาน (4,5) ในปอดของมนุษย์dirofilariasis พัฒนาเมื่อปรสิตอ่อนตายในช่องที่ถูกต้องเกิดภาวะเผยแพร่ไปยังปอดและตั้งอยู่แล้วในสาขาเล็กๆ ของหลอดเลือดแดงที่ปอด การจัดแสดงนิทรรศการถ่ายภาพรังสีทรวงอกก้อน noncalcified หรือจนใจของ 1-3 ซม. ในเส้นผ่าศูนย์กลางเรียกว่าแผลเหรียญ (6,7) แผลมักจะได้รับการวินิจฉัยที่ไม่ถูกต้องเป็นหลักหรือการแพร่กระจายโรคมะเร็งปอด การผ่าตัดปอดบางส่วนตามด้วยการตรวจสอบทางจุลพยาธิวิทยาจึงเป็นสิ่งที่จำเป็นสำหรับการวินิจฉัยที่ชัดเจน (8) ใน dirofilariasis แมว แต่การวินิจฉัยของโรคนี้เป็นเรื่องยากมากขึ้นกว่าสุนัขheartworm ส่วนใหญ่การติดเชื้อพยาธิหัวใจแมวมีน้ำหนักเบาและประกอบด้วยน้อยกว่าหกหนอนผู้ใหญ่ที่มักจะมีเพียงหนึ่งหรือสองเวิร์มที่มีอยู่และประมาณหนึ่งในสามของกรณีเหล่านี้รวมถึงหนอนเดียวกันเพศสัมพันธ์ Microfilaremia เป็นที่สังเกต seldomly ที่ติดเชื้อในแมว โอกาสในการหา microfilariae มีการปรับตัวดีขึ้นโดยใช้การปรับเปลี่ยนKnott หรือคกรองเทคนิคเข้มข้น (2) แต่วิธีการเหล่านี้เป็นเรื่องยาก, loborious ใช้เวลานานและมีความไวต่ำ. สำหรับการตรวจสอบของ filarial มนุษย์ไส้เดือนฝอย(Wuchereria bancrofti และ Brugia malayi) ดีเอ็นเอในเลือดของผู้ป่วยและตัวอย่างยุงที่เฉพาะเจาะจงในเวลาจริงเชิงปริมาณPCR (qPCR) วิธีการได้รับการพัฒนา (9-15) qPCR อาจจะมีความละเอียดอ่อนเป็นหนึ่งmicrofilaria W. bancrofti ของ B. malayi และโดยใช้หลายสำเนาของยีนfilarial เช่นSSPI (13) และ HhaI (12) ถูกเลือกสำหรับการขยายของยีนที่กำหนดเป้าหมาย. ใน การศึกษาครั้งนี้เราเปรียบเทียบสามที่แตกต่างกันวิธีการสกัดดีเอ็นเอสำหรับประสิทธิภาพของพวกเขาที่จะดึงดี immitis ดีเอ็นเอ microfilarial ประสิทธิภาพของการสกัดถูกประเมินโดยใช้ D. immitis เฉพาะทดสอบqPCR ซึ่งเป้าหมายไส้เดือนฝอยสำเนาเดียวยีนกลูตาไธโอน-S-transferase (GST) (16) เราเชื่อว่าวิธีการสกัดนี้จะเป็นประโยชน์ในการขยายยีนอื่นๆ ที่มีความไวและความจำเพาะสูง. วัสดุและวิธีการสัตว์ดี immitis microfilariae ได้ให้ความกรุณาโดยดร. สนธยา Tiawsirisup (ปรสิตวิทยาหน่วยภาควิชาพยาธิวิทยาคณะสัตวแพทยศาสตร์จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

สุนัขและแมว heartworm โรค
( กลุ่มชุดงาน ) ที่เกิดจาก filarial ตัวกลม
นกกระปูดเล็กซึ่งจะส่งโดยยุง
( ยุงลายยุงก้นปล่องและยุงรำคาญชนิด spp . , ,
กว้างไกล spp . ) การติดเชื้อ heartworm ในสุนัขและแมว
มีรายงานทั่วโลก ( 2 ) ในกรณีส่วนใหญ่
อาการของโรคจะปรากฏภายใน 1 - 2 ปี
หลังจากการติดเชื้อ อาการทั่วไปรวมถึงไอ
หายใจติดขัด , ความอ่อนแอ , การออกกำลังกาย ซึ่งก่อให้เกิดปัญหาทางหัวใจและปอด

อาการรุนแรงและเสียชีวิต และ ( 3 ) กลุ่มชุดงานมีจํานวนมาก ทำให้เกิดโรคเท้าช้าง

กลุ่มชุดงานปอดมนุษย์ บังเอิญเชื้อกับ D .
immitis ในมนุษย์ได้รับการรายงาน ( 4 , 5 ) กลุ่มชุดงานปอด
มนุษย์พัฒนาเมื่อปรสิต
เด็กตายในหัวใจห้องล่างขวา embolized ,7
ไปยังปอด แล้วตั้งอยู่ในแขนง
หลอดเลือดแดงที่ปอด การถ่ายภาพรังสีทรวงอก จัดแสดง
noncalcified หรือหลายก้อน 1 - 3 ซม. ในเส้นผ่าศูนย์กลาง
เรียกว่ารอยเหรียญ ( 6 , 7 ) รอยโรคมักจะไม่ถูกต้องวินิจฉัยเป็นหลัก หรือแพร่กระจาย

มะเร็งปอด บางส่วนของปอดผ่าตัดตามทางจึงจำเป็น

สอบให้ชัดเจน การวินิจฉัย( 8 ) ในแมว

กลุ่มชุดงาน อย่างไรก็ตาม การวินิจฉัยของโรคนี้จะยากกว่า Heartworm สุนัข

การติดเชื้อ heartworm แมวส่วนใหญ่จะเบา
และประกอบด้วยน้อยกว่าหกผู้ใหญ่หนอนที่มักจะ
เพียงหนึ่งหรือสองหนอนในปัจจุบัน และประมาณหนึ่งในสามของกรณีเหล่านี้รวมถึง
หนอนของเพศเดียวกัน

microfilaremia คือแทบจะไม่ได้พบในแมวที่ติดเชื้อ

โอกาสที่จะพบไมโครฟิลาเรียเป็นภาคดัดแปลง
โดยใช้น๊อตหรือเทคนิคสมาธิกรอง
มิลลิ . ( 2 ) อย่างไรก็ตาม วิธีการเหล่านี้
ยากบริโภค loborious , เวลา , และมีความไวต่ำ
ตรวจหาของไส้เดือนฝอย filarial
มนุษย์ ( wuchereria bancrofti และ บรูเกีย มาลาไย )
ดีเอ็นเอในผู้ป่วยเลือดและตัวอย่างยุง
เฉพาะเชิงปริมาณแบบเรียลไทม์พีซีอาร์ ( qpcr ) วิธีการ
ได้รับการพัฒนา ( 9-15 ) qpcr จะอ่อนไหว
เป็นหนึ่งไมโครฟิลาเรีย . bancrofti และ มาลาไยโดย
ใช้หลายสำเนาของยีน filarial เช่น
ไอพีสตาร์ ( 13 ) และ hhai ( 12 ) สุ่มของยีนเป้าหมาย (
.
ในการศึกษานี้เราจะเปรียบเทียบสามวิธีที่แตกต่างกันของการสกัดดีเอ็นเอ
ประสิทธิภาพการสกัด
D