Tetrazolium salt reduction is a commonly used, cost-effective indirect measure of viable cell
number. The most frequently used tetrazolium salts are 3-(4,5-dimethyethiazol-2-yl)-2,
5-diphenyltetrazolium bromide (MTT), sodium 3′-[1-phenylamino)-carbonyl]-3,4-tetrazolium]-bis
(4-methoxy-6-nitrobenzene) sulfonic acid hydrate (XTT), and 4-[3-(4-iodophenyl)-2-(4-nitrophenyl)- 2H-5-tetrazolio]-1,3-benzene disulfonate, water-soluble tetrazolium salt (WST-1). Despite their wide use and applicability, users of these assays may encounter a number of incompatibility problems depending on the study objectives. For example, compared to XTT and MTS, WST-1 is more stable, has a broader linear range and enables more rapid color development. MTT can be reduced by NADPH, FADH, FMNH, and NADH, but not by the cytochromes. Tetrazolium salts are generally cytotoxic because the formazan crystals that are produced from reduction of the salts must be solubilized with DMSO or HCl/isopropanol which destroys the cells under investigation so time-course experiments cannot be carried out [14]. MTT is not soluble in culture medium and is best suited for use with adherent cell lines; however, XTT is soluble in culture medium and is suitable for use with both non-adherent as well as adherent cell lines but XTT is not efficiently reduced without PMS (phenozine methosulfate) (www.assay.nih.gov/assay/). Thus, selection of the most appropriate tetrazolium salt as an indicator of metabolic activity is important. Alamar Blue circumvents many of the incompatibility issues described and offers many advantages over tetrazolium salts
ลดเกลือ Tetrazolium เป็นหน่วยวัดทางอ้อมใช้บ่อย คุ้มค่าของเซลล์ได้หมายเลข เกลือ tetrazolium ที่ใช้บ่อยที่สุดคือ 3-(4,5-dimethyethiazol-2-yl)-25 diphenyltetrazolium โบรไมด์ (MTT), โซเดียม 3′-[1-phenylamino)-carbonyl]-3,4-tetrazolium]-bis(4 กอย่าง 6 nitrobenzene) sulfonic กรดแก่ (XTT), และ 4-[3-(4-iodophenyl)-2-(4-nitrophenyl)-2 H-5-tetrazolio] - 1,3 - เบนซีน disulfonate เกลือ tetrazolium ที่ละลายน้ำได้ (WST-1) แม้ มีความกว้างใช้งานและความเกี่ยวข้อง assays เหล่านี้ผู้ใช้อาจพบจำนวนของปัญหากันขึ้นอยู่กับวัตถุประสงค์ของการศึกษา เช่น เมื่อเทียบกับ XTT และ MTS, WST-1 มีเสถียรภาพมากขึ้น มีหนึงเส้น และช่วยให้พัฒนาสีอย่างรวดเร็วมากขึ้น MTT สามารถลดได้ โดย NADPH, FADH, FMNH, NADH แต่ไม่ใช่ โดยการ cytochromes เกลือ Tetrazolium เป็น cytotoxic โดยทั่วไปเนื่องจากผลึก formazan ที่ผลิตจากของเกลือต้อง solubilized DMSO หรือ HCl/isopropanol ที่ทำลายเซลล์ภายใต้การตรวจสอบจึงไม่สามารถดำเนินการทดลองหลักสูตรเวลา [14] MTT ไม่ละลายในวัฒนธรรม และเหมาะสมที่สุดสำหรับใช้กับเซลล์สาวกบรรทัด อย่างไรก็ตาม XTT ละลายในวัฒนธรรม และเหมาะสำหรับใช้กับสายทั้งเซลล์ไม่ใช่มติ เป็นสาวก แต่ XTT ได้อย่างมีประสิทธิภาพลด โดย PMS (phenozine methosulfate) (www.assay.nih.gov/assay/) ดังนั้น เลือกเกลือ tetrazolium ที่เหมาะสมเป็นตัวบ่งชี้ของกิจกรรมการเผาผลาญเป็นสำคัญ Alamar บลู circumvents ปัญหาอธิบายไว้มากมาย และมีข้อดีหลายผ่านเกลือ tetrazolium
การแปล กรุณารอสักครู่..

ลดเกลือ tetrazolium เป็นที่ใช้กันทั่วไปมีประสิทธิภาพมาตรการทางอ้อมของเซลล์ทำงานได้
จำนวน ที่ใช้บ่อยที่สุด tetrazolium เกลือเป็น 3- (4,5-dimethyethiazol-2-YL) -2,
โบรไมด์ 5 diphenyltetrazolium (MTT) โซเดียม 3 '- [1 phenylamino) -carbonyl] -3,4-tetrazolium] -bis
(4-methoxy-6-nitrobenzene) กรดไฮเดรต (XTT) และ 4- [3- (4 iodophenyl) -2- (4-Nitrophenyl) - 2H-5-tetrazolio] -1,3-เบนซิน disulfonate น้ำละลายเกลือ tetrazolium (WST-1) แม้จะมีการใช้อย่างกว้างขวางของพวกเขาและการบังคับใช้ผู้ใช้ชุดตรวจเหล่านี้อาจพบจำนวนของปัญหาเข้ากันไม่ได้ขึ้นอยู่กับวัตถุประสงค์ของการศึกษา ตัวอย่างเช่นเมื่อเทียบกับ XTT และเอ็มทีเอ WST-1 มีเสถียรภาพมากขึ้น, มีช่วงเชิงเส้นที่กว้างขึ้นและช่วยให้การพัฒนาสีมากขึ้นอย่างรวดเร็ว MTT จะลดลงโดย NADPH, FADH, FMNH และ NADH แต่ไม่ได้โดยไซโตโครม เกลือ tetrazolium มักจะ cytotoxic เพราะผลึก formazan ที่มีการผลิตจากการลดลงของเกลือจะต้องละลายกับ DMSO หรือ HCl / isopropanol ซึ่งทำลายเซลล์ภายใต้การสอบสวนเพื่อทดลองเวลาแน่นอนไม่สามารถดำเนินการ [14] MTT ไม่ละลายในอาหารเลี้ยงเชื้อและเหมาะที่สุดสำหรับการใช้งานกับเซลล์สานุศิษย์; แต่ XTT ละลายในสื่อวัฒนธรรมและมีความเหมาะสมสำหรับการใช้งานที่มีทั้งที่ไม่ใช่พรรคพวกเช่นเดียวกับเซลล์สานุศิษย์ แต่ XTT จะไม่ลดลงอย่างมีประสิทธิภาพโดยไม่ต้อง PMS (phenozine methosulfate) (www.assay.nih.gov/assay/) ดังนั้นการเลือกของเกลือ tetrazolium ที่เหมาะสมที่สุดเป็นตัวบ่งชี้กิจกรรมการเผาผลาญเป็นสำคัญ Alamar ฟ้าหลีกเลี่ยงมากของปัญหาความไม่ลงรอยกันที่อธิบายและมีข้อดีกว่าเกลือ tetrazolium
การแปล กรุณารอสักครู่..

การลดเกลือ tetrazolium เป็นที่นิยมใช้มาตรการทางอ้อมที่มีประสิทธิภาพของเซลล์ได้หมายเลข ที่ใช้บ่อยที่สุด เกลือ tetrazolium 3 - ( 4,5-dimethyethiazol-2-yl ) - 25-diphenyltetrazolium โบรไมด์ ( MTT ) , โซเดียม 3 ’ - [ 1-phenylamino ) - คาร์บอนิล ] - 3,4-tetrazolium ] - ทวิ( 4-methoxy-6-nitrobenzene ) ลาร์โซเดียมคาร์บอเนต hydrate ( xtt ) , และ 4 - ( 3 - ( 4-iodophenyl ) - 2 - ( 4-nitrophenyl ) - 2h-5-tetrazolio ] - 1,3-benzene disulfonate เกลือละลายน้ำ tetrazolium ( wst-1 ) แม้จะใช้กว้างของพวกเขาและนำผู้ใช้ของยีนเหล่านี้อาจพบจำนวนของปัญหาเข้ากันไม่ได้ขึ้นอยู่กับการศึกษาวัตถุประสงค์ ตัวอย่างเช่น เมื่อเทียบกับ xtt และเอ็มทีเอ wst-1 มีเสถียรภาพมากขึ้น , มีช่วงกว้างเชิงเส้นและสีช่วยให้การพัฒนาอย่างรวดเร็วมากขึ้น MTT จะลดลง nadph ทั้งสอง fmnh , , , และการ , แต่ไม่ได้ โดยไซโตโครม . เกลือ tetrazolium มักจะเป็นพิษเพราะเหลือเชื่อที่ผลิตจากการลดเกลือ ต้องสร้างด้วย DMSO หรือ HCl / ไอโซโพรพานอลที่ทำลายเซลล์ภายใต้การสอบสวนเพื่อทดลองหลักสูตรเวลา ไม่สามารถดำเนินการ [ 14 ] MTT จะไม่ละลายในอาหารเลี้ยงเชื้อ และจะเหมาะที่สุดสำหรับใช้กับพลพรรคเซลล์ อย่างไรก็ตาม xtt สามารถละลายได้ในอาหารเลี้ยงเชื้อ และเหมาะสำหรับใช้กับทั้งไม่ติดรวมทั้งพลพรรคเซลล์แต่ xtt ไม่ได้มีประสิทธิภาพลดลง โดย PMS ( phenozine methosulfate ) ( www.assay . NIH . gov / วิเคราะห์ / ) ดังนั้น การเลือกของที่เหมาะสมที่สุด tetrazolium เกลือเป็นตัวบ่งชี้ของกิจกรรมการเผาผลาญอาหารเป็นสิ่งสำคัญ circumvents Alamar สีฟ้ามากมาย รธน. ประเด็นอธิบายและมีข้อดีกว่าเกลือ tetrazolium
การแปล กรุณารอสักครู่..
